የቁልፍ ልዩነት - ሞቅ ያለ ከቀዝቃዛ ሙከራ ጋር
ሙቅ እና ቀዝቃዛ ትራይፕሲንናይዜሽን በእንስሳት ሴል ባህል ውስጥ ያሉ ሴሎችን ኢንዛይም ለመከፋፈል የሚያገለግሉ ሁለት ዘዴዎች ናቸው። በሙቅ እና በቀዝቃዛው ትራይፕሲንዜዜሽን መካከል ያለው ቁልፍ ልዩነት እንደ ስሞቹ, ትራይፕሲን ለሴሉላር መበታተን በሚጨመርበት የሙቀት መጠን ይወሰናል. ሞቃታማ ትራይፕሲንናይዜሽን ከፍ ባለ የሙቀት መጠን (36.5 - 37 0C) ሲሆን ቀዝቃዛው ትራይፕሲንናይዜሽን ደግሞ በዝቅተኛ የሙቀት መጠን ይከሰታል።
በመጀመሪያ ደረጃ የእንስሳት ህዋሶችን በማዳበር ሂደት ውስጥ ሶስት ዋና ዋና ዘዴዎች ጥቅም ላይ የዋሉ እና ውጤታማ መሆናቸውን አረጋግጠዋል።ሦስቱ ዘዴዎች የሴሎች ሜካኒካል ክፍፍል ፣የሴሎች ኢንዛይማዊ ክፍፍል እና ዋና የማስፋፊያ ዘዴን ያካትታሉ። ወደ ሴሎች መገለል የሚያመራውን የሴሎች ኢንዛይም መከፋፈል እና የሚከናወነው በፕሮቲን-አዋዳጅ ኢንዛይም ትራይፕሲን ነው። ስለዚህ, ይህ ሂደት ትራይፕሲኒዜሽን በመባል ይታወቃል. ትራይፕሲንናይዜሽን በሁለት የተለያዩ ሁኔታዎች ማለትም ሞቅ ያለ ትሪፕሲናይዜሽን እና ቀዝቃዛ ትራይፕሲንዜሽን ሊደረግ ይችላል። ሞቅ ያለ ትራይፕሲንናይዜሽን በሞቃታማ ሁኔታ ውስጥ ያሉ ሴሎችን በ 36.5 - 37 0C የሙቀት መጠን የማከም ዘዴ ነው። ቀዝቃዛ ትራይፕሲንናይዜሽን በቀዝቃዛ ሁኔታዎች ውስጥ የሚካሄደው የትራይፕሲን ህክምና ሂደት ሲሆን በተለይም በረዶ በጣም ዝቅተኛ የሙቀት መጠንን ጠብቆ ይቆያል።
ሞቅ ያለ ሙከራ ምንድነው?
Trypsinization ሴሉላር ክፍሎችን ለመለያየት ህዋሶችን መነጠል ዋና የሕዋስ ባህልን መፍጠር ይቻላል። ትራይፕሲን የፕሮቲን መበላሸት ኢንዛይም ነው፣ እና በ trypsinization ውስጥ ጥቅም ላይ የሚውለው የኢንዛይም ድብልቅ ድፍድፍ ማውጣት ወይም የተጣራ ምርት ሊሆን ይችላል።ድፍድፍ ማውጫው ሌሎች አበላሽ የሆኑ ኢንዛይሞች ስላሉት ለፕሮቲን ሊሲስ እና የሕዋስ መበታተን የበለጠ ውጤታማ ነው ተብሏል።
የሞቀ ትራይፕሲንናይዜሽን በከፍተኛ ሙቀት ውስጥ ለሚከሰት የሕዋስ መበታተን በብዛት ጥቅም ላይ የሚውለው የኢንዛይም ዘዴ ነው። በ trypsinization ህክምና ከመደረጉ በፊት, የሚፈለገው ቲሹ በትንሽ ቁርጥራጮች ተቆርጧል. ቀላል የመከፋፈል ሂደቱን ያመቻቻል. የተቆረጠው ቲሹ ዲስሴክሽን ባሳል ጨው መካከለኛ ተብሎ በሚታወቀው ልዩ ሚዲያ ይታጠባል።
የማጠቢያው ሂደት እንደተጠናቀቀ ሴሎቹ ወደ ፍላስክ ይለወጣሉ ገባሪ ኢንዛይም እሱም ትራይፕሲን። ይህ ቴክኒክ የሞቀ ትራይፕሲንናይዜሽን ፕሮቶኮልን እንደሚያሳይ፣ ትራይፕሲን በ37 0C አካባቢ ለአራት ሰአታት ያህል የሙቀት መጠን ይቀመጣል።
ምስል 01፡ ትራይፕሲን
ይዘቱ የተቀላቀሉ እና የሚቀሰቀሱት ለፕሮቶኮሉ ቀላልነት እና የመለያየት ሂደቱን ለማፋጠን የሴንትሪፍግሽን ዘዴዎችን በመጠቀም ነው። የተመከረው ጊዜ ከተደረሰ በኋላ ሴሎቹ ከሱፐርኔሽን ሊገኙ ይችላሉ. ከሱፐርኔታንት የተገኙት ህዋሶች በተወሰነ የሙቀት መጠን እና ሰዓት ይከተላሉ።
ቀዝቃዛ ትሪፕሲንዜሽን ምንድን ነው?
ቀዝቃዛ ትራይፕሲንናይዜሽን ሌላው በቀዝቃዛ ሁኔታዎች ውስጥ የሚከሰት ትራይፕሲንናይዜሽን ነው። በዚህ ዘዴ የተቆራረጡ እና የሚታጠቡ ህዋሶች በበረዶ ውስጥ በጠርሙስ ውስጥ ይቀመጣሉ እና ከዚያም በትሪፕሲን ይቀባሉ. የመርከስ ጊዜ በጣም ረጅም ነው - ከ6 - 24 ሰአታት።
የማጠቡ ሂደት ከተጠናቀቀ በኋላ ትራይፕሲን ከሴል ሊዛት ውስጥ ይወገዳል እና የቲሹ ቁርጥራጮቹ በ 37 0C ለ 20 - 30 ደቂቃዎች ተጨማሪ ይከተላሉ። የሴሎች መበታተን የሚከሰተው በተደጋጋሚ የቲሹ ድብልቅ በቧንቧ በመገጣጠም ነው.ይህ ሴሎቹ ከሽፋን ተለያይተው ወደ ከፍተኛው ክፍል እንዲመጡ ያስችላቸዋል. ህዋሳቱ ከመጠን በላይ ከሆነ በኋላ በሚፈለገው የሙቀት መጠን እና ጊዜ ውስጥ ይበቅላሉ።
የቀዝቃዛ ትራይፕሲንናይዜሽን ዘዴ በርካታ ጥቅሞች አሉት
- የህዋሱ ጉዳት ስለሚቀንስ አዋጭ ሴሎች ከፍተኛ ምርት። ሴንትሪፍግሽን ደረጃዎችን ባለመጠቀም የሕዋስ ጉዳቱ ይቀንሳል።
- በጣም ምቹ ዘዴ።
- አነስተኛ አድካሚ።
የቀዝቃዛ ትራይፕሲንናይዜሽን ዘዴ ዋና ገደብ ከፍተኛ መጠን ያለው መጠን በአንድ አጋጣሚ መጠቀም አይቻልም።
በሞቅ እና በቀዝቃዛ ትራይፕሲንዜዜሽን መካከል ያለው ተመሳሳይነት ምንድን ነው?
- ሁለቱም የሙቅ እና የቀዝቃዛ ትራይፕሲንዜሽን ሂደቶች ሴሎችን ለመለያየት ትራይፕሲንን ኢንዛይም ይጠቀማሉ።
- ሁለቱም የሙቅ እና የቀዝቃዛ ትራይፕሲንናይዜሽን ሂደቶች በሴሎች ባህል ሂደቶች ውስጥ ህዋሶችን ለመለያየት ያገለግላሉ።
- በሁለቱም ሞቅ ያለ እና ቀዝቃዛ ትሪፕሲንናይዜሽን ሕክምና ሂደቶች፣ ሴሎቹ የሚመነጩት ከሱፐርኔታንት ነው።
በሞቅ እና በቀዝቃዛ ትራይፕሲንዜሽን መካከል ያለው ልዩነት ምንድን ነው?
ሞቅ ያለ ከቀዝቃዛ ትሪፕሲኒዜሽን |
|
| የሞቀ ትራይፕሲንዜሽን በሞቃታማ ሁኔታ ውስጥ ያሉ ሴሎችን በ36.5 – 37 0።። | ቀዝቃዛ ትራይፕሲንናይዜሽን በቀዝቃዛ ሁኔታዎች ውስጥ የሚካሄደው የትራይፕሲን ህክምና ሂደት ሲሆን በተለይም በረዶ ዝቅተኛ የሙቀት መጠንን ጠብቆ ይቆያል። |
| ፕሮቶኮል | |
| የተቆራረጡ የቲሹ ቁርጥራጮች በ37 0C ያለማቋረጥ በሂደቱ ይጠበቃሉ። | የተቆራረጡ የቲሹ ቁርጥራጮች መጀመሪያ ላይ በበረዶ ቅዝቃዜ ይጠበቃሉ ከዚያም በ37 0. ይቀመጣሉ |
| ሙቀት | |
| ሞቅ ያለ ትራይፕሲንናይዜሽን በ36.5 - 37 0 ይከሰታል። | ቀዝቃዛ ትራይፕሲንናይዜሽን በበረዶ ቅዝቃዜ ይከሰታል። |
| የሚፈጀው ጊዜ | |
| ለጠቅላላው ሂደት (4 ሰአታት አካባቢ) ለሞቀ ትራይፕሲንዜሽን የሚሆን አነስተኛ ጊዜ ያስፈልጋል። | ለቀዝቃዛ ትራይፕሲንናይዜሽን ረዘም ያለ ጊዜ ያስፈልጋል (6 - 24 ሰአታት አካባቢ)። |
| የአዋጭ ሴሎች ውጤት | |
| በሞቀ trypsinization ዝቅተኛ። | በቀዝቃዛ ትራይፕሲንናይዜሽን ከፍ ያለ። |
| የሴንትሪፍጌሽን አጠቃቀም | |
| በሞቃት ትራይፕሲንናይዜሽን ውስጥ ያሉ ሴሎችን ለመለያየት ሴንትሪፍግሽን ያስፈልጋል። | በቀዝቃዛ ትራይፕሲንናይዜሽን ሴንትሪፍግሽን አያስፈልግም። |
| የመጀመሪያው ቲሹ ብዛት ለትራይፕሲኒዜሽን | |
| ትልቅ መጠን ያለው ቲሹ በሞቀ ትራይፕሲንናይዜሽን መጠቀም ይቻላል። | ትንሽ የቲሹ መጠን በቀዝቃዛ ትራይፕሲንናይዜሽን መጠቀም ይቻላል። |
| የህዋስ ጉዳት | |
| በሙቅ ትራይፕሲንናይዜሽን ምክንያት ከፍተኛ። | በቀዝቃዛ ትራይፕሲንናይዜሽን ምክንያት ያነሰ። |
ማጠቃለያ - ሞቅ ያለ ከቀዝቃዛ ትሪፕሲኒዜሽን
Trypsinization ፕሮቲን-አዋዳጁን ኢንዛይም ትራይፕሲን በሴል ባህል ሂደት ወቅት የአንደኛ ደረጃ የሴል ባህሎችን ለመለያየት እና ለማዘጋጀት የምንጠቀምበት ዘዴ ነው። በሂደቱ ወቅት ጥቅም ላይ በሚውሉት ሙቀቶች ላይ በመመርኮዝ ሁለት ዋና ዋና የ trypsinization ዘዴዎች አሉ. ሞቃት እና ቀዝቃዛ ትራይፕሲንዜሽን ናቸው. ሞቅ ያለ ትራይፕሲንናይዜሽን በ37 0C ሲደረግ ቀዝቃዛ ትራይፕሲንናይዜሽን ግን በበረዶ ቀዝቃዛ ሁኔታዎች ውስጥ ይከናወናል።ምንም እንኳን ቀዝቃዛ ትራይፕሲንናይዜሽን ለመጨረስ ረዘም ያለ ጊዜ የሚወስድ ቢሆንም ከፍተኛ የሆነ አዋጭ ሴሎች ምርት እንዳለው ይነገራል። ይህ የሆነበት ምክንያት የሕዋስ ጉዳት በብርድ ትሪፕሲኒዜሽን ውስጥ ኃይለኛ ማዕከላዊ እርምጃዎችን ስለማይጠቀም ነው። ይህ በሞቀ እና በቀዝቃዛ ትራይፕሲንዜሽን መካከል ያለው ልዩነት ነው።
