በNAAT እና PCR መካከል ያለው ቁልፍ ልዩነት ኤንኤኤቲ በተለያዩ መንገዶች የዘረመል ቁሳቁሱን የሚያጎላ ሲሆን ይህም ፖሊሜሬሴይ ቻይንት ምላሽን፣ ስትራንድ ማፈናቀልን ወይም በግልባጭ መገልበጥ መካከለኛ ማጉላት ሲሆን PCR ደግሞ ጄኔቲክ ቁሳቁሶችን ብቻ በመጠቀም የሚያሰፋ ዘዴ ነው። የሙቀት ብስክሌት።
በሽታ አምጪ ተህዋሲያን በዋነኛነት የሚታወቁት በዘረመል ቁስ በማጉላት ነው። በዚህ አካባቢ ያሉ አብዛኛዎቹ ቴክኒኮች የሚያተኩሩት በእውነተኛ ጊዜ ውስጥ የተወሰኑ ቅደም ተከተሎችን በማጉላት በሽታ አምጪ ተህዋሲያንን የጄኔቲክ ቁሳቁሶችን በመለየት ላይ ነው. ስለዚህ, ውጤቶቹ በምርመራው ሁኔታ በጣም በፍጥነት ይመረታሉ. NAAT፣ PCR፣ biosensor እና LCR በርካታ ቴክኒኮች በላብራቶሪዎች ውስጥ በሽታ አምጪ ተህዋሲያንን በዘረመል ለመጨመር ያገለግላሉ።
NAAT ምንድን ነው?
Nucleic acid amplification test (NAAT) በሞለኪውላር ባዮሎጂ ውስጥ የሚገኝ ዘዴ ሲሆን ጄኔቲክ ቁሶችን በተለያዩ መንገዶች ለምሳሌ ፖሊሜሬሴ ሰንሰለታዊ ምላሽ፣ የስትሬድ ማፈናቀል ማጉላት ወይም ወደ ጽሑፍ ግልባጭ ማድረጊያ ማጉላት። የጄኔቲክ ቁሳቁሶችን ማጉላት በNAAT ሂደት ውስጥ እንደ ligation chain reaction እና ቅርንጫፍ ያለው የዲ ኤን ኤ ምላሽ (quantiplex b DNA) ባሉ ቴክኒኮች ሊከናወን ይችላል። NAAT የዋትሰን-ክሪክ ቤዝ ማጣመርን ልዩነት ይጠቀማል። በኤንኤኤቲ አሰራር፣ ነጠላ-ክር ያለው መፈተሻ ወይም ፕሪመር ሞለኪውል ከዒላማው ዲ ኤን ኤ ወይም አር ኤን ኤ ሞለኪውል ጋር ተዳቅሏል። ስለዚህ የመመርመሪያው ፈትል ንድፍ የመለየት ስሜትን እና ልዩነትን ለማሻሻል ከፍተኛ ጠቀሜታ አለው. በመቀጠል የኤንኤኤቲ ቀጣዩ ደረጃ ለማወቅ ብዙ ቅጂዎችን በመስራት የጄኔቲክ ቁሳቁሶችን ያጎላል።
ምስል 01፡ NAAT
NAAT በአሁኑ ጊዜ እንደ ኒሴሪያ ጨብጥ፣ ክላሚዲያ ትራኮማቲስ፣ ማይኮባክቲሪየም ሳንባ ነቀርሳ እና SARS-COV2 ያሉ በሽታ አምጪ ተህዋሲያንን ለማግኘት ተፈጻሚ ነው። ከዚህም በላይ የ NAAT ፈተና የመስኮቱን ጊዜ ለማሳጠር ተዘጋጅቷል. የመስኮቱ ጊዜ በሽተኛው በበሽታው በተያዘበት እና በፀረ-ሰው ምርመራዎች አወንታዊ ሆነው በሚታዩበት መካከል ያለው ጊዜ ነው። በተጨማሪም የኤንኤኤቲ የማጣሪያ ዘዴ ለመጀመሪያ ጊዜ በ1999 በኤፍዲኤ ጸድቋል። NAAT ዝቅተኛ የዲ ኤን ኤ ወይም አር ኤን ኤ ደረጃን መለየት፣ ከፍተኛ ትብነት እና ከፍተኛ ልዩነትን ጨምሮ ብዙ ጥቅሞች አሉት።
PCR ምንድን ነው?
PCR በሞለኪውላር ባዮሎጂ ውስጥ የሙቀት ብስክሌትን ብቻ በመጠቀም የጄኔቲክ ቁሳቁሶችን የሚያሰፋ ዘዴ ነው። PCR የ polymerase chain reaction ማለት ነው። እንደ ባክቴሪያ፣ ፈንገሶች እና ቫይረሶች ካሉ አካል የጄኔቲክ ቁሶችን ለመለየት የሚደረግ ሙከራ ነው። በበሽታ ምርመራ, PCR ሰውየው በምርመራው ጊዜ በሽታ አምጪ ተህዋሲያን ካለበት በሽታ አምጪ ተህዋሲያን መኖሩን ይመረምራል.በበሽታ ምርመራ፣ PCR ፕሮቶኮል በርካታ ደረጃዎች አሉት፣ እነሱም የናሙና አሰባሰብ፣ የዲኤንኤ ማውጣት፣ PCR እና ቅደም ተከተል። በሽታ አምጪ ተህዋሲያንን በመመርመር, የተሰበሰበው ናሙና የጄኔቲክ ቁሳቁሶችን (ዲ ኤን ኤ ወይም አር ኤን ኤ) ለማውጣት ጥቅም ላይ ይውላል. በ PCR ማሽን ውስጥ ቴርማል ሳይክል በሚባለው የጄኔቲክ ቁስ ውስጥ በሚሊዮን የሚቆጠሩ ቅጂዎችን ለማምረት PCR ሂደት ልዩ ኬሚካሎችን፣ ፕሪመርሮች እና ኢንዛይሞችን ይፈልጋል። ከ PCR ምርት ከተስፋፋ በኋላ በሽታ አምጪ ተህዋሲያን ሊታወቅ ይችላል. ሳይንቲስቶች ውጤቱን ለመተርጎም ልዩ ሶፍትዌር ይጠቀማሉ።
ምስል 02፡ PCR
ከተጨማሪ፣ በአሁኑ ጊዜ በጥናቱ ውስጥ ጥቅም ላይ የሚውሉ የተለያዩ የ PCR ዓይነቶች አሉ። RT-PCR፣ Multiplex PCR፣ RAPD እና Nsted PCR ከእነዚህ መካከል ጥቂቶቹ ናቸው። PCR በተለይ የpharyngitis (Streptococl pharyngitis)፣ ያልተለመደ የሳንባ ምች (Chlymydia pneumoniae)፣ ኩፍኝ (ሞርቢሊቫይረስ)፣ ሄፓታይተስ (ኤች.ቢ.ቪ) እና አልሰረቲቭ urogenital infection (Haemophilus ducreyi) ለይቶ ለማወቅ ጠቃሚ ነው።
በNAAT እና PCR መካከል ያሉ ተመሳሳይነቶች ምንድን ናቸው?
- NAAT እና PCR ሁለት ጠቃሚ ሞለኪውላር ባዮሎጂካል ዘዴዎች ናቸው እነዚህም ጀነቲካዊ ቁሳቁሶችን ለማጉላት ያገለግላሉ።
- ኑክሊክ አሲዶች (ዲ ኤን ኤ ወይም አር ኤን ኤ) በሁለቱም ቴክኒኮች ተጨምረዋል።
- ፈጣን እና ፈጣን ቴክኒኮች ናቸው።
- ሁለቱም ቴክኒኮች በአሁኑ ጊዜ ለበሽታ ምርመራ ጥቅም ላይ ይውላሉ።
- ከተለመዱት ዘዴዎች ውድ ናቸው።
በNAAT እና PCR መካከል ያለው ልዩነት ምንድን ነው?
NAAT በሞለኪውላር ባዮሎጂ ውስጥ የሚገኝ ዘዴ ሲሆን በርካታ ዘዴዎችን በመጠቀም የዘረመል ቁሳቁሶቹን የሚያሰፋ ሲሆን PCR በሞለኪውላር ባዮሎጂ ደግሞ የሙቀት ብስክሌትን ብቻ በመጠቀም ጄኔቲክ ቁሳቁሶችን የሚያጎላ ዘዴ ነው። NAAT የተለያዩ የዘረመል ማጉላት ቴክኒኮችን እንደ ፖሊሜሬሴ ሰንሰለት ምላሽ፣ የስትራንድ ማፈናቀል ማጉላት፣ የጽሑፍ ግልባጭ መካከለኛ ማጉላት፣ የሊጌሽን ሰንሰለት ምላሽ እና የቅርንጫፍ ዲ ኤን ኤ ምላሽ (quantiplex b DNA)።በሌላ በኩል፣ PCR እንደ RT-PCR ያሉ የተለያዩ የጄኔቲክ ቁሳቁሶችን ማጉላት ቴክኒኮችን ይጠቀማል። Multiplex PCR፣ RAPD፣ Nsted PCR። ስለዚህ፣ ይህ በNAAT እና PCR መካከል ያለው ቁልፍ ልዩነት ነው።
ከታች ያለው ኢንፎግራፊክ በNAAT እና PCR መካከል ያለውን ልዩነት በጎን ለጎን ለማነፃፀር በሰንጠረዥ ያቀርባል።
ማጠቃለያ - NAAT vs PCR
በላቦራቶሪዎች ውስጥ የዘረመል ቁሳቁሶችን ለማጉላት የሚያገለግሉ የተለያዩ ሞለኪውላር ባዮሎጂካል መሳሪያዎች አሉ። NAAT፣ PCR፣ biosensor እና LCR በርካታ እንደዚህ አይነት ቴክኒኮች ናቸው። ኤንኤኤቲ እንደ ፖሊሜሬሴ ሰንሰለታዊ ምላሽ፣ ስትራንድ ማፈናቀል፣ ወይም ወደ ጽሑፍ ግልባጭ-መካከለኛ ማጉላት ያሉ በርካታ መንገዶችን በመጠቀም ጄኔቲክ ቁሳቁሶችን የሚያጎላ ሞለኪውላዊ ባዮሎጂያዊ ቴክኒክ ነው። PCR በሞለኪውላር ባዮሎጂ ውስጥ የሙቀት ብስክሌትን በመጠቀም የጄኔቲክ ቁሳቁሶችን የሚያሰፋ ዘዴ ነው። ስለዚህ፣ ይህ በNAAT እና PCR መካከል ያለው ቁልፍ ልዩነት ነው።
