በ chromatofocusing እና isoelectric ትኩረት መካከል ያለው ቁልፍ ልዩነት ክሮማቶኮከሲንግ የአምድ ክሮማቶግራፊ ዘዴ ሲሆን ion exchange resins የሚጠቀም ሲሆን አይዞኤሌክትሪክ ትኩረት የማይንቀሳቀስ ፒኤች ቀስ በቀስ ጄል የሚጠቀም የኤሌክትሮፊዮሬሲስ ቴክኒክ ነው።
Chromatofocusing እና isoelectric ትኩረት ፕሮቲኖችን እንደየማይለየ ኤሌክትሪክ ነጥብ የሚለያዩ ሁለት ቴክኒኮች ናቸው። ሁለቱም chromatofocusing እና isoelectric ትኩረት ትልቅ የመፍታት ሃይል አላቸው። Chromatofocusing ከፍተኛ ጥራት ያለው የአምድ ክሮሞግራፊ ዘዴ ሲሆን አይዞኤሌክትሪክ ትኩረት ኤሌክትሮፊዮሬቲክ መለያየት ዘዴ ነው።በተጨማሪም ክሮማቶፎከሲንግ የኤሌትሪክ መስክን አይጠቀምም አይዞኤሌክትሪክ ትኩረት ኤሌክትሪክ መስክ ያስፈልገዋል።
Chromatofocusing ምንድን ነው?
Chromatofocusing ፕሮቲኖችን እንደየማይለየ ኤሌክትሪክ ነጥብ የሚለያይ የከፍተኛ ኤሊዩሽን ክሮማቶግራፊ አይነት ነው። የ ion ልውውጥ ሬንጅ አምድ እና ከውስጥ የተገነባ የፒኤች ቅልመት ይጠቀማል። ከአይኦኤሌክትሪክ ትኩረት በተለየ ክሮሞቶኮከሲንግ የኤሌክትሪክ መስክን አያካትትም። Chromatofocusing በጣም ተመሳሳይ የሆኑ ሞለኪውሎችን በ0.02 ፒኤች አሃዶች ብቻ ሊፈታ የሚችል ኃይለኛ የመንጻት ዘዴ ነው። ስለዚህ፣ chromatofocusing በጣም ተመሳሳይ ክፍሎችን ለመለየት ከፍተኛ ጥራት በሚያስፈልግበት ጊዜ እንደ የመጨረሻ የማጥራት ደረጃ በጣም ተስማሚ ነው።
በ chromatofocusing ውስጥ፣ ናሙናው ከጅምር ቋት ጋር በማደባለቅ አምድ ላይ ይተገበራል። ከአይኦኤሌክትሪክ ነጥባቸው በላይ በሆነ ፒኤች ላይ ያሉ ፕሮቲኖች በአሉታዊ መልኩ ቻርጅ ይደረጋሉ እና ከአምዱ አናት አጠገብ ይቆያሉ እና ሌሎች ፕሮቲኖች ከአይኦኤሌክትሪክ ነጥባቸው በታች ባለው ፒኤች ላይ ወደ አምድ ይፈልሳሉ።ከፍተኛው የ isoelectric ነጥብ ያለው ፕሮቲን በመጀመሪያ ይገለጣል እና ዝቅተኛው የአይዞኤሌክትሪክ ነጥብ ያለው ፕሮቲን ከአምዱ መጨረሻ ይወጣል። ይህ ቴክኒክ እንደ ፕሮቲን ዝናብ እና የፒኤች ቅልመት መስመራዊነት ባሉ በርካታ ምክንያቶች ተፅዕኖ ይኖረዋል።
የኢሶኤሌክትሪክ ትኩረት ምንድን ነው?
Isoelectric ማተኮር የተለያዩ ሞለኪውሎችን በአይዞኤሌክትሪክ ነጥብ ላይ በመመስረት የሚለይ ቴክኒክ ነው። ኤሌክትሮ ፎከሲንግ በመባልም ይታወቃል። ይህ ዘዴ ብዙውን ጊዜ በጄል ውስጥ ለፕሮቲን መለያየት ጥቅም ላይ ይውላል። በአይዞኤሌክትሪክ ትኩረት፣ ናሙናው በማይንቀሳቀስ የፒኤች ግሬዲየንት (IPG) ጄል ውስጥ ይታከላል። አይፒጂ ጄል ከፒኤች ግሬዲየንት ጋር የተቀናጀ አሲሪላሚድ ጄል ማትሪክስ ነው። ፕሮቲኖች የኢኤሌክትሪክ ነጥቦቻቸውን ፒኤች ክልል እስኪያገኙ ድረስ ወደ ካቶድ ይፈልሳሉ። አንድ ፕሮቲን ምንም የተጣራ ክፍያ ወደሌለው ፒኤች ሲደርስ ፍልሰት ይቆማል እና ቋሚ ባንድ ይሰጣል። በተመሳሳይ፣ እያንዳንዱ ፕሮቲን ከኢኤሌክትሪክ ነጥቡ ጋር በሚዛመድ የፒኤች ቅልመት ውስጥ ባንድ ነጥብ ላይ ይሰጣል።
ሥዕል 01፡ Isoelectric ትኩረት
የኢሶኤሌክትሪክ ትኩረት የሁለት-ልኬት ጄል ኤሌክትሮፎረሲስ የመጀመሪያ ደረጃ ነው። በዚያ ቴክኒክ፣ ፕሮቲኖች በመጀመሪያ እንደ ኢኤሌክትሪክ ነጥቦቻቸው በ isoelectric ትኩረት ይለያያሉ ከዚያም በሞለኪውላዊ ክብደታቸው በኤስዲኤስ-ገጽ ይለያሉ።
በ Chromatofocusing እና Isoelectric Focusing መካከል ያለው ተመሳሳይነት ምንድን ነው?
- Chromatofocusing እና isoelectric ማተኮር ሁለት ከፍተኛ መፍትሔ መንገዶች ናቸው።
- ሁለቱም በፕሮቲን ኢኤሌክትሪክ ነጥብ ላይ የተመሰረቱ ናቸው።
- እነዚህ ቴክኒኮች pH gradient ይጠቀማሉ።
- ሁለቱም ሂደቶች የሰውን የሂሞግሎቢን ልዩነቶችን ለመለየት መረጃ ሰጪ ናቸው።
- የፒአይ እሴቶች በትንሹ በ0.02 pH አሃዶች የሚለያዩባቸውን ሞለኪውሎች መፍታት ይችላሉ።
በ Chromatofocusing እና Isoelectric Focusing መካከል ያለው ልዩነት ምንድን ነው?
Chromatofocusing ከፍተኛ ጥራት ያለው የአምድ ክሮማቶግራፊ ቴክኒክ ሲሆን ፕሮቲኖችን እንደ ኢኤሌክትሪክ ነጥባቸው ይለያል። በአንጻሩ አይዞኤሌክትሪክ ማተኮር ፕሮቲኖችን እንደ አይዞኤሌክትሪክ ነጥባቸው የሚለይ የኤሌትሪክ መስክ በካፒላሪ ውስጥ በተሰራው የፒኤች ቅልመት ላይ በመተግበር ፕሮቲኖችን የሚለይ ኤሌክትሮ ፎረቲክ ዘዴ ነው። ስለዚህ በ chromatofocusing እና isoelectric ትኩረት መካከል ያለው ቁልፍ ልዩነት ይህ ነው።
በ chromatofocusing እና isoelectric ትኩረት መካከል ያለው ሌላው ልዩነት chromatofocusing የኤሌክትሪክ መስክን አያካትትም ፣የአይዞኤሌክትሪክ ትኩረት ደግሞ የኤሌክትሪክ መስክ ያስፈልገዋል።
ማጠቃለያ - Chromatofocusing vs Isoelectric Focusing
Chromatofocusing እና isoelectric ትኩረት ከፍተኛ የሞለኪውሎች በተለይም በጣም ተመሳሳይ ሞለኪውሎች የመፍታት ችሎታ ያላቸው ሁለት ተመሳሳይ ቴክኒኮች ናቸው። Chromatofocusing ከፍተኛ ጥራት ያለው የአምድ ክሮማቶግራፊ ቴክኒክ ሲሆን አይዞኤሌክትሪክ ትኩረት ኤሌክትሮፊዮራይዝስ ዘዴ ነው። Chromatofocusing የኤሌክትሪክ መስክን አያካትትም፣ ከአይኦኤሌክትሪክ ትኩረት በተለየ። ስለዚህ፣ ይህ በ chromatofocusing እና isoelectric ትኩረት መካከል ያለውን ልዩነት ያጠቃልላል።
