በአይዮን ልውውጥ እና በመጠን ማግለል መካከል ያለው ቁልፍ ልዩነት ion ልውውጥ ክሮማቶግራፊ እንደ ክፍያው መጠን ion ንጥረ ነገሮችን ለመተንተን ጥቅም ላይ የሚውል ሲሆን የመጠን ማግለል ክሮማቶግራፊ ደግሞ ትላልቅ ሞለኪውሎችን በመጠን መጠን ለመተንተን ይጠቅማል።
Chromatography የተለያዩ ድብልቅ ነገሮችን ለመተንተን የሚያገለግል የትንታኔ ዘዴ ነው። የ chromatographic ቴክኒኮች የተሰየሙት ቁሳቁሶቹን ለመተንተን በሚጠቀሙበት መለኪያ መሰረት ነው - ለምሳሌ. የመጠን ማግለል ክሮማቶግራፊ፣ ion exchange chromatography፣ ወዘተ.
አዮን ልውውጥ Chromatography ምንድነው?
Ion ልውውጥ ክሮማቶግራፊ አዮኒክ ንጥረ ነገሮችን የምንመረምርበት የትንታኔ ዘዴ ነው።ብዙውን ጊዜ ኦርጋኒክ ያልሆኑ አኒዮኖች እና cations (ማለትም ክሎራይድ እና ናይትሬት አኒዮን እና ፖታሲየም, ሶዲየም cations) ለመተንተን ጠቃሚ ነው. ምንም እንኳን በጣም የተለመደ ዘዴ ባይሆንም, ኦርጋኒክ ionዎችን በመጠቀም መተንተን እንችላለን. ከዚህም በላይ ፕሮቲኖች በተወሰኑ የፒኤች እሴቶች ላይ ሞለኪውሎች ስለሚሞሉ ፕሮቲኖችን ለማጣራት ይህን ዘዴ ልንጠቀምበት እንችላለን. እዚህ ፣ የተሞሉ ቅንጣቶች የሚያያይዙበት ጠንካራ የማይንቀሳቀስ ደረጃን እንጠቀማለን። ለምሳሌ፣ ረዚን ፖሊቲሪሬን-ዲቪኒልቤንዜን ኮፖሊመሮችን እንደ ጠንካራ ድጋፍ ልንጠቀም እንችላለን።
ሥዕል 01፡ ከ Ion ልውውጥ Chromatography በስተጀርባ ያለው ቲዎሪ
ይህን የበለጠ ለማብራራት፣ የቋሚ ደረጃው እንደ ሰልፌት አኒዮኖች ወይም quaternary amine cations ያሉ ቋሚ ionዎች አሉት። የዚህን ሥርዓት ገለልተኝነት ለመጠበቅ ከፈለግን እያንዳንዳቸው ከቆጣሪ ion (ከተቃራኒ ክፍያ ጋር ion) ጋር ማያያዝ አለባቸው።የቆጣሪው ion cation ከሆነ, ስርዓቱን እንደ cation exchange resin ብለን እንጠራዋለን. ነገር ግን, ቆጣሪው አኒዮን ከሆነ, ስርዓቱ የአዮን ልውውጥ ሙጫ ነው. በተጨማሪም፣ በ ion-exchange chromatography ውስጥ አምስት ዋና ዋና ደረጃዎች አሉ፡
- የመጀመሪያ ደረጃ
- የዒላማው ማስተዋወቅ
- የኤሉሽን መጀመሪያ
- የኤሌሽን መጨረሻ
- ዳግም መወለድ
የመካተት ክሮማቶግራፊ ምንድነው?
Size exclusion chromatography ወይም SEC በድብልቅ ውስጥ ያሉ ሞለኪውሎች በመጠን እና በሞለኪውል ክብደት የሚለያዩበት የትንታኔ ዘዴ ነው። ብዙውን ጊዜ, ማክሮ ሞለኪውሎች ከሚባሉት ትላልቅ ሞለኪውሎች ጋር ይሠራል. በተለምዶ የውሃ መፍትሄ ለመተንተን ጥቅም ላይ ይውላል. ከዚያም ጄል ማጣሪያ ክሮሞግራፊ ይባላል. ኦርጋኒክ መሟሟት ሲሆን ጄል ፐርሜሽን ክሮማቶግራፊ ይባላል።
Gel filtration chromatography የመጠን አግላይ ክሮማቶግራፊ ሲሆን በውስጡም የውሃ መፍትሄ እንደ ሞባይል ደረጃ የምንጠቀምበት ነው።ስለዚህ, በዚህ ዘዴ ውስጥ ብዙ ጊዜ የምንጠቀመው የሞባይል ደረጃ የውሃ ማጠራቀሚያ ነው. እንዲሁም, ለዚህ መለያየት ክሮማቶግራፊክ አምድ እንጠቀማለን, እና ዓምዱን በተቦረቦረ ዶቃዎች ማሸግ ያስፈልገናል. ብዙውን ጊዜ ሴፋዴክስ እና አጋሮዝ እንደ ቀዳዳው ቁሳቁስ ጠቃሚ ናቸው። ስለዚህ፣ እነዚህ ነገሮች የሙከራዎቻችን ቋሚ ደረጃ ናቸው። ከዚህም በላይ እኛ የምንለያይባቸውን የማክሮ ሞለኪውሎች መጠን ለማወቅ የእነዚህን ዶቃዎች ቀዳዳ መጠን ልንጠቀም እንችላለን። ሆኖም፣ ግምት ብቻ ነው።
ስእል 02፡ የመጠን መገለል ክሮማቶግራፊ
Gel permeation chromatography የመጠን ማግለል አይነት ክሮማቶግራፊ ሲሆን በውስጡም ኦርጋኒክ ሟሟን እንደ ሞባይል ደረጃ የምንጠቀምበት ነው። ስለዚህ, ለዚሁ ዓላማ እንደ ሄክሳን እና ቶሉቲን የመሳሰሉ መፍትሄዎችን መጠቀም እንችላለን.የቋሚ ደረጃው ባለ ቀዳዳ ቁሳቁስ ነው፣ ልክ እንደ ጄል ማጣሪያ ክሮሞግራፊ። ይህ ዘዴ ብዙውን ጊዜ በፖሊመሮች እና ሌሎች ኦርጋኒክ-የሚሟሟ ቁሳቁስ ላይ ይተገበራል። የቴክኒኩ አሰራር ዘዴ ከጄል ማጣሪያ ክሮማቶግራፊ ጋር ተመሳሳይ ነው።
በአዮን ልውውጥ እና የመጠን መገለል ክሮማቶግራፊ መካከል ያለው ልዩነት ምንድን ነው?
Chromatography የተለያዩ ድብልቅ ነገሮችን ለመተንተን የሚያገለግል የትንታኔ ዘዴ ነው። በአዮን ልውውጥ እና በመጠን ማግለል ክሮሞግራፊ መካከል ያለው ቁልፍ ልዩነት ion ልውውጥ ክሮማቶግራፊ እንደ ክፍያው አዮኒክ ንጥረ ነገሮችን ለመተንተን ጥቅም ላይ የሚውል ሲሆን የመጠን ማግለል ክሮማቶግራፊ ትላልቅ ሞለኪውሎችን በመጠን መጠን ለመተንተን ይጠቅማል።
ከታች ኢንፎግራፊክ በአዮን ልውውጥ እና በመጠን ማግለል ክሮማቶግራፊ መካከል ስላለው ልዩነት የበለጠ መረጃ ይሰጣል።
ማጠቃለያ - Ion ልውውጥ vs መጠን ማግለል Chromatography
Chromatography የተለያዩ ድብልቅ ነገሮችን ለመተንተን የሚያገለግል የትንታኔ ዘዴ ነው። በአዮን ልውውጥ እና በመጠን ማግለል ክሮሞግራፊ መካከል ያለው ቁልፍ ልዩነት ion ልውውጥ ክሮማቶግራፊ እንደ ክፍያው አዮኒክ ንጥረ ነገሮችን ለመተንተን ጥቅም ላይ የሚውል ሲሆን የመጠን ማግለል ክሮማቶግራፊ ትላልቅ ሞለኪውሎችን በመጠን መጠን ለመተንተን ይጠቅማል።
