በአፊኒቲ እና ion ልውውጥ ክሮማቶግራፊ መካከል ያለው ቁልፍ ልዩነት ቻርጅ የተደረገባቸውን ወይም ያልተሞሉ ክፍሎችን በድብልቅ ለመለየት አፊኒቲ ክሮማቶግራፊን መጠቀም የምንችል ሲሆን ነገር ግን ion exchange chromatography በመጠቀም ቻርጅ የተደረገባቸውን ንጥረ ነገሮች በድብልቅ መለየት እንችላለን።
ክሮማቶግራፊ በድብልቅ ውስጥ የሚፈለጉትን ክፍሎች የምንለይበት ዘዴ ነው። እንደ ፈሳሽ ክሮማቶግራፊ ፣ ጋዝ ክሮማቶግራፊ ፣ ወዘተ ያሉ የተለያዩ ዓይነቶች አሉ ። የ Affinity chromatography እና ion exchange chromatography ሁለት የፈሳሽ ክሮማቶግራፊ ንዑስ ምድቦች ናቸው። በተጨማሪም በእነዚህ ቴክኒኮች ውስጥ ሁለት ደረጃዎች አሉ. እነሱም የቋሚ ደረጃ እና የሞባይል ደረጃ ናቸው።የእነዚህ ቴክኒኮች አላማ በተንቀሳቃሽ ስልክ ደረጃ ላይ ባለው የቋሚ ደረጃ ላይ ያሉትን ክፍሎችን፣ እንደ ክፍሎቹ አስገዳጅነት በመለየት ነው።
አፊኒቲ ክሮማቶግራፊ ምንድነው?
አፊኒቲ ክሮማቶግራፊ ባዮኬሚካላዊ ቴክኒክ ሲሆን በድብልቅ ውስጥ ያሉ ክፍሎችን በእነዚህ ክፍሎች መካከል ባለው መስተጋብር ለመለየት የምንጠቀምበት ዘዴ ነው።
በዚህ ጉዳይ ላይ የምንጠቀማቸው ግንኙነቶች የሚከተሉትን ያካትታሉ፡
- አንቲጂን-የፀረ-ሰው መስተጋብር
- የኢንዛይም-ንዑስ መስተጋብሮች
- የመቀበያ-ሊጋንድ መስተጋብር
- የፕሮቲን-ኒውክሊክ አሲድ መስተጋብር
በዚህ ቴክኒክ፣የሞለኪውሎች ሞለኪውላዊ ባህሪያትን ለዚህ መለያየት ቴክኒክ እንጠቀማለን። እዚህ፣ የሚፈለገው ውህድ ከቋሚ ደረጃ ጋር በሃይድሮጂን ትስስር፣ በአዮኒክ መስተጋብር፣ በዲሰልፋይድ ድልድይ፣ በሃይድሮፎቢክ መስተጋብር፣ ወዘተ በኩል እንዲገናኝ እንፈቅዳለን።ከቋሚው ደረጃ ጋር የማይገናኙ ሞለኪውሎች በመጀመሪያ ይገለላሉ. ስለዚህ, ከተደባለቀው ልንለየው እንችላለን. የሚፈለገው ውህድ ከቋሚው ደረጃ ጋር ተጣብቆ ይቆያል. ስለዚህ ሟሟን ተጠቅመን ነቅለን እንዲወጣ ማድረግ እንችላለን።
ሥዕል 01፡ Chromatographic አምድ
አፊኒቲ ክሮማቶግራፊ ከውህድ ውስጥ የሚገኘውን ንጥረ ነገር የማጠራቀሚያ መፍትሄን በመጠቀም በማጥራት እና በማተኮር ጠቃሚ ነው። እንዲሁም, በድብልቅ ውስጥ የማይፈለጉትን ንጥረ ነገሮች ለመቀነስ ይረዳል. ለዚህ ሂደት የምንጠቀመውን መሳሪያ ስናስብ በቋሚ ደረጃችን የተሞላ አምድ መጠቀም አለብን። ከዚያም የምንለያይባቸውን ባዮሞለኪውሎች የያዘውን የሞባይል ደረጃ መጫን አለብን።በመቀጠል ከቋሚው ደረጃ ጋር እንዲቆራኙ ይፍቀዱላቸው. ከዚያ በኋላ የማጠቢያ ቋት በመጠቀም ኢላማ ያልሆኑትን ባዮሞለኪውሎች ልንለያይ እንችላለን፣ነገር ግን የመለያየቱን ሂደት ስኬታማ ለማድረግ የታለሙ ሞለኪውሎች ለቋሚ ደረጃ ከፍተኛ ቅርበት ሊኖራቸው ይገባል።
አዮን ልውውጥ Chromatography ምንድነው?
Ion chromatography የፈሳሽ ክሮማቶግራፊ አይነት ሲሆን አዮኒክ ንጥረ ነገሮችን የምንመረምርበት ነው። ብዙውን ጊዜ, ኢንኦርጋኒክ አኒዮኖች እና cations (ማለትም ክሎራይድ እና ናይትሬት አኒዮኖች እና ፖታሲየም, ሶዲየም cations) ለመተንተን እንጠቀማለን. ብዙም ያልተለመደ ቢሆንም፣ ኦርጋኒክ ionዎችንም መተንተን እንችላለን። ከዚህም በላይ ፕሮቲኖች በተወሰኑ የፒኤች እሴቶች ላይ ሞለኪውሎች ስለሚሞሉ ፕሮቲኖችን ለማጣራት ይህን ዘዴ ልንጠቀምበት እንችላለን. እዚህ ፣ የተሞሉ ቅንጣቶች የሚያያይዙበት ጠንካራ የማይንቀሳቀስ ደረጃን እንጠቀማለን። ለምሳሌ፣ ረዚን ፖሊቲሪሬን-ዲቪኒልቤንዜን ኮፖሊመሮችን እንደ ጠንካራ ድጋፍ ልንጠቀም እንችላለን።
ስእል 02፡ የ ion ልውውጥ ደረጃዎች ክሮማቶግራፊ
ይህን የበለጠ ለማብራራት፣ የቋሚ ደረጃው እንደ ሰልፌት አኒዮኖች ወይም quaternary amine cations ያሉ ቋሚ ionዎች አሉት። የዚህን ስርዓት ገለልተኝነት ለመጠበቅ ከፈለግን እያንዳንዳቸው ከቁጥጥር (ከተቃራኒ ክፍያ ጋር ion) ጋር ማያያዝ አለባቸው. በዚህ ውስጥ ፣ ቆጣሪው cation ከሆነ ፣ ከዚያ ስርዓቱን እንደ cation exchange resin ብለን እንጠራዋለን። ነገር ግን፣ ቆጣሪው አኒዮን ከሆነ፣ ስርዓቱ የአንዮን መለዋወጫ ሙጫ ነው።
በአዮን ልውውጥ ሂደት ውስጥ አምስት ዋና ዋና ደረጃዎች አሉ፤
- የመጀመሪያ ደረጃ
- የዒላማ ማስታወቂያ
- የኤሉሽን መጀመሪያ
- የኤሌሽን መጨረሻ
- ዳግም መወለድ
በግንኙነት እና በአዮን ልውውጥ መካከል ያለው ልዩነት ምንድን ነው?
አፊኒቲ ክሮማቶግራፊ ባዮኬሚካላዊ ቴክኒክ ሲሆን በድብልቅ ውስጥ ያሉትን ክፍሎች በእነዚህ ክፍሎች መካከል ያለውን መስተጋብር በመለየት የምንጠቀመው ሲሆን ion ክሮማቶግራፊ ደግሞ አዮኒክ ንጥረ ነገሮችን የምንመረምርበት ፈሳሽ ክሮማቶግራፊ አይነት ነው። ስለዚህ በአፊኒቲ እና በ ion ልውውጥ ክሮማቶግራፊ መካከል ያለው ዋና ልዩነት ion exchange chromatography መጠቀም የምንችለው ለ ion ንጥረ ነገሮች መለያየት ብቻ ሲሆን አፊኒቲ ክሮማቶግራፊ ሁለቱንም የተጫኑ እና ያልተሞሉ ቅንጣቶችን የመለየት ችሎታ አለው። የስራ መርሆውን በሚመለከቱበት ጊዜ, በአፊኒቲ እና በ ion ልውውጥ ክሮሞግራፊ መካከል ያለው ልዩነት የዒላማ ሞለኪውሎች ለቋሚው ደረጃ ከፍተኛ ቅርበት ስላላቸው ነው. ነገር ግን፣ ለአይዮን ልውውጥ ክሮማቶግራፊ፣ ኢላማ ሞለኪውሎች ከቋሚው የደረጃ ወለል ጋር ተቃራኒ ክፍያ አላቸው።
ከታች ያለው ኢንፎግራፊክ በአፊኒቲ እና ion ልውውጥ ክሮማቶግራፊ መካከል ያለውን ልዩነት እንደ ጎን ለጎን ንጽጽር ያቀርባል።
ማጠቃለያ - አፊኒቲ vs ion ልውውጥ Chromatography
በማጠቃለያ፣ ዝምድና እና ion ልውውጥ ክሮማቶግራፊ ሁለት አይነት ፈሳሽ ክሮማቶግራፊ ቴክኒኮች ናቸው። በአፊኒቲ እና ion ልውውጥ ክሮማቶግራፊ መካከል ያለው ቁልፍ ልዩነት ቻርጅ የተደረገባቸውን ወይም ያልተሞሉ ክፍሎችን በድብልቅ ለመለየት አፊኒቲ ክሮማቶግራፍን መጠቀም መቻላችን ሲሆን ነገር ግን ion exchange chromatography በመጠቀም የተሞሉ ክፍሎችን በድብልቅ መለየት እንችላለን።
