በቀጥታ እና በተዘዋዋሪ ኢሚውኖፍሎረሰንስ መካከል ያለው ቁልፍ ልዩነት ቀጥተኛ ኢሚውኖፍሎረሰንስ ከፍላጎት ዒላማ በተቃራኒ የሚሰራ ነጠላ ፀረ እንግዳ አካላትን ሲጠቀም በተዘዋዋሪም ኢሚውኖፍሎረሰንስ ሁለት ፀረ እንግዳ አካላትን በመጠቀም የወለድ ዒላማውን ለመሰየም ነው።
Immunofluorescence ወይም cell imaging የተወሰነ ኢላማ አንቲጂንን በፍሎሮፎር ለመሰየም የሚያገለግል ዘዴ ነው። እዚህ፣ ፍሎሮፎሬው በብርሃን መነቃቃት ላይ ብርሃንን እንደገና ሊያሰራጭ የሚችል የፍሎረሰንት ኬሚካላዊ ውህድ ነው። አንድ ፍሎሮፎር ከተፈለገው አንቲጂን ጋር ሲገናኝ በናሙናው ውስጥ ያለውን የዒላማ ሞለኪውል ለመለየት ያስችላል። የበለጠ ለመግለጽ፣ አንቲጂን ከተወሰነ ፀረ እንግዳ አካል ጋር ሲገናኝ፣ ከፍሎሮፎረስ ጋር ሊጣመር ይችላል።ስለዚህ፣ በፍሎረሰንስ ማይክሮስኮፕ ሲመለከቱ በናሙናው ውስጥ የታለመው አንቲጂን እንዳለ በቀላሉ ማወቅ ይቻላል።
ከዚህም በተጨማሪ ሁለት አይነት የበሽታ መከላከያ (immunfluorescence) አሉ። ቀጥተኛ እና ቀጥተኛ ያልሆነ immunofluorescence. በቀጥታ እና በተዘዋዋሪ በ immunofluorescence መካከል ያለው ልዩነት በዋናነት ጥቅም ላይ በሚውሉት ፀረ እንግዳ አካላት ብዛት እና በፍሎሮፎር ውህደት ላይ ነው። ማለትም፣በቀጥታ ኢሚውኖፍሎረሰንስ ውስጥ፣ፍሎሮፎሬው በቀጥታ ከዋናው ፀረ እንግዳ አካል ጋር ይገናኛል፣በተዘዋዋሪም ኢሚውኖፍሎረሰንስ ውስጥ ፍሎሮፎሬው ከሁለተኛ ደረጃ ፀረ እንግዳ አካላት ጋር ይገናኛል።
ቀጥታ Immunofluorescence ምንድን ነው?
Immunofluorescence የተወሰኑ ኢላማ አንቲጂኖችን ለመለየት ፀረ እንግዳ አካላትን ይጠቀማል። ቀጥተኛ immunofluorescence ከሁለቱ የimmunofluorescence ዓይነቶች አንዱ ነው። በቀጥታ ኢሚውኖፍሎረሰንስ ውስጥ አንድ ነጠላ ፀረ እንግዳ አካላት (ዋና ፀረ እንግዳ አካላት) ያካትታል እና ፍሎሮፎሩ ከዋናው ፀረ እንግዳ አካላት ጋር በቀጥታ ይገናኛል። ፀረ እንግዳ አካላትን ከታለመው አንቲጂን ጋር ሲያቆራኝ ፍሎሮፎር ፍሎረሰንስ ያመነጫል ይህም በፍሎረሰንስ ማይክሮስኮፕ ሊታወቅ ይችላል።
ምስል 01፡ ቀጥታ Immunofluorescence
ነገር ግን ቀጥተኛ ኢሚውኖፍሎረሽንስ በጣም ውድ ዘዴ ነው ምክንያቱም ዋናዎቹ የተዋሃዱ ፀረ እንግዳ አካላት ከሁለተኛ ደረጃ ፀረ እንግዳ አካላት ጋር ሲነፃፀሩ ውድ ናቸው። ሆኖም ፣ እሱ ተጨማሪ እርምጃን አያካትትም ፣ አጭር ዘዴ። በተጨማሪም ፣ ልዩ ያልሆኑ ማሰሪያዎች በቀጥታ በ immunofluorescence ውስጥ ይቀንሳሉ። ስለዚህ, ዝርያዎች ተሻጋሪ ምላሽ ዝቅተኛ ነው. ነገር ግን በማወቅ፣የቀጥታ የimmunofluorescence ትብነት ከተዘዋዋሪ immunofluorescence ጋር ሲወዳደር ደካማ ነው።
ቀጥታ ያልሆነ Immunofluorescence ምንድነው?
የተዘዋዋሪ ኢሚውኖፍሎረሴንስ ሁለተኛው ዓይነት የበሽታ መከላከያ አይነት ሲሆን ይህም ሁለት አይነት ፀረ እንግዳ አካላትን ማለትም አንደኛ እና ሁለተኛ ደረጃ ፀረ እንግዳ አካላትን በዒላማው አንቲጂን መለያ ምልክት ውስጥ ያካትታል።በዚህ ዘዴ, ፍሎሮፎር ከሁለተኛ ደረጃ ፀረ እንግዳ አካላት ጋር ይገናኛል. ስለዚህ ይህ ዘዴ ተጨማሪ እርምጃን ያካትታል።
ምስል 02፡ Immunofluorescence
ነገር ግን በርካታ ፍሎሮፎሮች ከሁለተኛ ደረጃ ፀረ እንግዳ አካላት ጋር ሊጣመሩ ስለሚችሉ እና በቀላሉ ለማወቅ ስለሚያስችለው በዚህ ዘዴ ውስጥ ያለው ስሜት ከፍተኛ ነው። በተጨማሪም, ቀጥተኛ ያልሆነ immunofluorescence የሁለተኛ ደረጃ ፀረ እንግዳ አካላት ውህደት አነስተኛ ዋጋ ያለው እና ቀላል በመሆኑ ምክንያት ዋጋው አነስተኛ ነው. ከቀጥታ ኢሚውኖፍሎረሰንስ ጋር ሲነጻጸር፣ ዝርያው ተሻጋሪ ምላሽ በተዘዋዋሪ መንገድ ከፍተኛ ነው።
በቀጥታ እና በተዘዋዋሪ Immunofluorescence መካከል ያለው ተመሳሳይነት ምንድን ነው?
- ሁለት አይነት የimmunofluorescence ቴክኒክ ናቸው።
- ዋና ፀረ እንግዳ አካላት እና ፍሎሮፎር በሁለቱም ዘዴዎች ውስጥ ይሳተፋሉ።
- እንዲሁም አንቲጂን-አንቲቦዲ ምላሽ በሁለቱም ዘዴዎች ይከሰታል።
- በተጨማሪም ሁለቱም ቀጥተኛ እና ቀጥተኛ ያልሆኑ ኢሚውኖፍሎረሰንስ አንቲጂንን ለመለየት የፍሎረሰንስ ማይክሮስኮፕን ይጠቀማሉ።
በቀጥታ እና በተዘዋዋሪ Immunofluorescence መካከል ያለው ልዩነት ምንድን ነው?
Immunofluorescence በቀጥታም ሆነ በተዘዋዋሪ ጥቅም ላይ ከሚውሉት ፀረ እንግዳ አካላት ጋር ባለው የፍሎሮፎር ውህደት ላይ የተመሰረተ ሊሆን ይችላል። በቀጥተኛ ኢሚውኖፍሎረሰንስ ውስጥ, ፍሎሮፎሮው ከዋናው ፀረ እንግዳ አካላት ጋር ይገናኛል, እሱም በዚህ ዘዴ ውስጥ የሚያካትት ነጠላ ፀረ እንግዳ አካላት. በተቃራኒው ፣ በተዘዋዋሪ immunofluorescence ፣ ፍሎሮፎር ከሁለተኛው ፀረ እንግዳ አካላት ጋር ይገናኛል ፣ ይህ በቴክኒክ ውስጥ ከሚሳተፉት ሁለት ፀረ እንግዳ አካላት አንዱ ነው። ስለዚህም በቀጥታ እና በተዘዋዋሪ ኢሚውሮፍሎረሴንስ መካከል ያለው ዋና ልዩነት ከፍሎሮፎር ጋር የሚያገናኘው ፀረ እንግዳ አካል ነው።
የሚከተለው ኢንፎግራፊክ በቀጥታ እና በተዘዋዋሪ የበሽታ ፍሎረሰንት መካከል ያለውን ልዩነት ጎን ለጎን ንፅፅር ያቀርባል።
ማጠቃለያ - ቀጥተኛ ያልሆነ Immunofluorescence
Immunofluorescence በናሙና ውስጥ የተወሰኑ አንቲጂኖች መኖራቸውን ለመለየት የሚያገለግል ዘዴ ነው። ይህ ዘዴ የተወሰኑ ፀረ እንግዳ አካላትን ይጠቀማል. ስለዚህ በዚህ ውስጥ ፀረ እንግዳ አካላት የፍሎረሰንት ማይክሮስኮፕ በመጠቀም ለመለየት ከ fluorophores ጋር ይገናኛሉ. ከዚህም በላይ ሁለት ዓይነት የበሽታ መከላከያ (immunofluorescence) ማለትም ቀጥተኛ እና ቀጥተኛ ያልሆነ የበሽታ መከላከያ (immunofluorescence) አሉ. ቀጥተኛ immunofluorescence አንድ ነጠላ ፀረ እንግዳ አካላት እና ፍሎሮፎርን በቀጥታ ከዚህ ፀረ እንግዳ አካላት ጋር ያካትታል። ቀጥተኛ ያልሆነ immunofluorescence ሁለት ፀረ እንግዳ አካላትን ያካትታል; የመጀመሪያ ደረጃ እና ሁለተኛ ደረጃ እና ፍሎሮፎሮ ከሁለተኛ ደረጃ ፀረ እንግዳ አካላት ጋር ተጣምሯል.በርካታ ሁለተኛ ደረጃ ፀረ እንግዳ አካላት ከዋና ፀረ እንግዳ አካላት ጋር ሊተሳሰሩ ስለሚችሉ እና በርካታ ፍሎሮፎሮች ከሁለተኛ ደረጃ ፀረ እንግዳ አካላት ጋር ሊጣመሩ ስለሚችሉ፣ ቀጥተኛ ያልሆነ ኢሚውኖፍሎረሰንስ ከቀጥታ ዘዴው የበለጠ ጥንቃቄ የተሞላበት ዘዴ ነው። በተጨማሪም ቀጥተኛ ያልሆነ ዘዴ ከቀጥታ ዘዴው ያነሰ ዋጋ አለው. ስለዚህ፣ ይህ በቀጥታ እና በተዘዋዋሪ በክትባት በሽታ የመከላከል ስርዓት መካከል ያለው ልዩነት ነው።
