በአገናኝ እና አስማሚ መካከል ያለው ቁልፍ ልዩነት ማገናኛ አንድ የተጣመረ ጫፍ ሲኖረው ማገናኛ አንድ የተጣመረ ጫፍ የለውም።
DNA ligation ሁለት የዲኤንኤ ሞለኪውሎችን አንድ ላይ በማጣመር ፎስፎዲስተር ቦንድ በመፍጠር ሂደት ነው። ዲ ኤን ኤ ሊጋዝ የተባለው ኢንዛይም ይህንን ምላሽ ያነሳሳል። በዘመናዊ ሞለኪውላር ባዮሎጂካል መስኮች እንደ ዳግመኛ ዲ ኤን ኤ ቴክኖሎጂ እና ዲ ኤን ኤ ክሎኒንግ ካሉ ወሳኝ እርምጃዎች አንዱ ነው። የሊግጌሽን ቅልጥፍና የሚወሰነው በዲ ኤን ኤ ሞለኪውሎች ላይ በሚጣመሩበት ጫፍ ላይ ነው። ሁለት ዓይነት የዲ ኤን ኤ ጫፎች እንደ ተለጣፊ ጫፎች እና ጠፍጣፋ ጫፎች አሉ። የሊቲንግ ቅልጥፍና ከተጣበቁ ጫፎች ይልቅ ከፍተኛ ነው. የታለመው የዲኤንኤ ሞለኪውሎች ጠፍጣፋ ጫፎች ካላቸው፣ አስማሚ ወይም አገናኝ የሚባሉ ሞለኪውሎች ጠቃሚ ይሆናሉ።አስማሚዎች እና ማያያዣዎች በዲኤንኤ መለቀቅ ውስጥ የሚረዱ በኬሚካል የተዋሃዱ ኦሊጎኑክሊዮታይድ ሞለኪውሎች ናቸው። የውስጥ ገደብ ጣቢያዎችም አሏቸው። አስማሚ አንድ የሚያጣብቅ ጫፍ እና አንድ ጠፍጣፋ ጫፍ ሲኖረው አያያዥ ሁለት ጠፍጣፋ ጫፎች አሉት።
ሊንከር ምንድነው?
Linker በኬሚካላዊ የተቀናጀ ኦሊጎኑክሊዮታይድ ተከታታይ ድርብ-ክር ነው። ሊንከር ሁለት ጠፍጣፋ ጫፎች አሉት። ሊንከር ጥርት ያለ ጫፍ ያላቸውን የዲ ኤን ኤ ሞለኪውሎችን ወደ ቬክተር ለማገናኘት ይጠቅማል። አንድ ወይም ከዚያ በላይ የውስጥ ገደብ ጣቢያዎችን ይዟል። እነዚህ ገደብ ጣቢያዎች ለገደብ ኢንዛይሞች እንደ መታወቂያ ጣቢያዎች ይሰራሉ።
ምስል 01፡ ሊንክከር
ከሊጅንግ በኋላ ዲኤንኤ በገደብ ኢንዛይሞች የተጣመረ ጫፎችን ለማምረት በድጋሚ ተገድቧል። EcoRI-linkers እና sal-I ማገናኛዎች በብዛት ጥቅም ላይ የሚውሉ ማገናኛዎች ናቸው።
አስማሚ ምንድነው?
አንድ አስማሚ ሁለት የዲ ኤን ኤ ሞለኪውሎችን አንድ ላይ ለማገናኘት የሚያገለግል ባለ ሁለት መስመር ኦሊጎኑክሊዮታይድ ቅደም ተከተል ነው። አንድ ጠፍጣፋ ጫፍ እና አንድ የተጣበቀ ወይም የተጣመረ ጫፍ ያለው አጭር ቅደም ተከተል ነው. ስለዚህ፣ በአንደኛው ጫፍ ላይ ባለ ነጠላ ጅራት ያቀፈ ነው፣ ይህም የዲኤንኤ መገጣጠም ቅልጥፍናን ይጨምራል።
ምስል 02፡ የዲኤንኤ ልገሳ በአዳፕተር
ከተጨማሪ፣ አስማሚው የውስጥ ገደብ ጣቢያዎች አሉት። ስለዚህ፣ ከሊጅንግ በኋላ፣ ዲ ኤን ኤ አዲስ የሚወጣ ተርሚነስ ለመፍጠር በተገቢው ገደብ ኢንዛይሞች ሊገደብ ይችላል። የአስማሚዎች አንዱ ጉዳቱ ሁለት አስማሚዎች ከራሳቸው ጋር በማጣመር ዳይመርሮችን መፍጠር መቻላቸው ነው። ይህን ማስቀረት የሚቻለው በአልካላይን ፎስፌትስ በተባለ ኢንዛይም በማከም ነው።
በሊንከር እና አስማሚ መካከል ያለው ተመሳሳይነት ምንድን ነው?
- ሁለቱም ማገናኛ እና አስማሚ ባለ ሁለት መስመር አጭር oligonucleotide ተከታታዮች ናቸው።
- የውስጥ ገዳቢ ጣቢያዎችን ይይዛሉ።
- ከዚህም በላይ በኬሚካል የተዋሃዱ የዲኤንኤ ሞለኪውሎች እና ሰው ሰራሽ ሞለኪውሎች ናቸው።
- ሁለት የዲኤንኤ ሞለኪውሎችን በአንድ ላይ ማገናኘት ይችላሉ።
- ከአገናኞች እና አስማሚዎች ከተጣመሩ በኋላ ዲ ኤን ኤው ተጣባቂ ጫፎችን ለማምረት በእገዳ ኢንዛይሞች ተገድቧል።
በሊንከር እና አስማሚ መካከል ያለው ልዩነት ምንድን ነው?
አያያዥ በኬሚካላዊ መልኩ የተዋሃደ አጭር ኦሊጎኑክሊዮታይድ ዱፕሌክስ ሲሆን ባለ ሁለት ጠፍጣፋ ጫፎች። አስማሚ በኬሚካላዊ መልኩ የተዋሃደ አጭር ኦሊጎኑክሊዮታይድ ዱፕሌክስ አንድ ተጣባቂ ጫፍ እና አንድ ጠፍጣፋ ጫፍ ነው። ስለዚህ, ይህ በአገናኝ እና አስማሚ መካከል ያለው ቁልፍ ልዩነት ነው. ከዚህም በላይ አስማሚዎች ዳይመርሮችን ሊፈጥሩ ይችላሉ, አገናኞች ግን ዲመሮችን አይፈጥሩም. ስለዚህ፣ ይህ በአገናኝ እና አስማሚ መካከል ሌላ ጉልህ ልዩነት ነው።
ከዚህ በታች በአገናኝ እና አስማሚ መካከል ያለው ልዩነት በሠንጠረዥ መልክ ነው።
ማጠቃለያ - ሊንከር vs አስማሚ
Linker እና adapter ሁለት አይነት በኬሚካላዊ የተቀናጁ ኦሊጎኑክሊዮታይዶች ናቸው እነዚህም ብሉንት-መጨረሻ ዲ ኤን ኤ ለማገናኘት ይጠቅማሉ። ሊንከር ሁለት ጠፍጣፋ ጫፎች ሲኖሩት አስማሚ አንድ ጠፍጣፋ ጫፍ እና አንድ የተጣመረ ጫፍ አለው። ስለዚህ, ይህ በአገናኝ እና አስማሚ መካከል ያለው ቁልፍ ልዩነት ነው. ውስጣዊ እገዳዎች ያላቸው ባለ ሁለት-ክሮች ሞለኪውሎች ናቸው. በዲኤንኤ ቴክኖሎጂ እና በዲኤንኤ ክሎኒንግ በስፋት ጥቅም ላይ ይውላሉ።
