ቁልፍ ልዩነት - RNASE A vs RNASE H
ሪቦኑክሊዝስ በተለይ አር ኤን ኤ ወደ ትናንሽ ክፍሎች የሚያዋርድ ኒዩክለሴሶች ናቸው። በሁለት ምድቦች ሊከፈሉ ይችላሉ; endoribonucleases እና exoribonucleases. Endoribonuclease አንድ ነጠላ ፈትል ወይም ባለ ሁለት ፈትል አር ኤን ኤ ዝቅ የሚያደርግ ኢንዶኑክሊዝ ነው። የፎስፎዲስተር ቦንዶችን በአር ኤን ኤ ፖሊኑክሊዮታይድ ሰንሰለት ውስጥ ይሰብራል። ምሳሌዎቹ RNase A፣ RNase III፣ RNase T1፣ RNase P እና RNase H. Exoribonuclease ኤክሶኑክሊዝ ሲሆን አር ኤን ኤ ተርሚናል ኑክሊዮታይድን ከአር ኤን ኤ ሞለኪውል 5'end ወይም 3'end በማስወገድ ነው። ምሳሌዎቹ RNase R፣ RNase II፣ RNase D እና RNase PH ናቸው።በ RNASE A እና RNASE H መካከል ያለው ቁልፍ ልዩነት RNase A የጣፊያ ራይቦኑክሊዝ ሲሆን ነጠላ-ክር ያለው አር ኤን ወደ ትናንሽ ክፍሎች የሚቀንስ ሲሆን RNase H ደግሞ በአር ኤን ኤ ዲ ኤን ኤ ውስጥ ያለውን አር ኤን ኤ ወደ ትናንሽ ክፍሎች የሚከፋፍል ልዩ ያልሆነ ኢንዛይም ነው። የሃይድሮሊክ ዘዴ።
አር ኤን ኤ ምንድን ነው?
RNase A የጣፊያ ራይቦኑክሊዝ ነው በተለይ ያልተጣመሩ ሳይቶሲን እና የኡራሲል ቅሪቶችን በ 3' ባለ ነጠላ ገመድ አር ኤን ኤ ላይ የሚሰነጣጥቅ። RNase H ከፍ ባለ የጨው ክምችት (0.3M ወይም ከዚያ በላይ የNaCl ትኩረት) ይሰራል። የሃይድሮሊክ ምላሽ ሁለት ደረጃዎች ነው. በ 2'፣ 3' ሳይክል ሞኖፎስፌት መካከለኛ በኩል ባለ 3' ፎስፈረስላይት ያለው ምርት ይፈጥራል። ምንም እንኳን በከፍተኛ የጨው ክምችት ላይ ባለ ነጠላ-ክር ላለው አር ኤን ኤ የተወሰነ ቢሆንም፣ ባለ ሁለት ክር አር ኤን ኤ እና አር ኤን ኤ በአር ኤን ኤ ዲ ኤን ኤ ዲቃላ ዝቅተኛ የNaCl ትኩረት (ከ0.3M NaCl በታች) ዝቅ ሊያደርግ ይችላል።
ብሩስ ሜሪፊልድ ይህን ኢንዛይም ለመጀመሪያ ጊዜ ሰራ። RNase A በሞለኪውላዊ ምርምር ውስጥ በጣም ታዋቂ የሆነ ኢንዛይም ነው. Bovine pancreatic RNase A የ RNase A ምሳሌ ነው እና በቤተ ሙከራ ውስጥ ጥቅም ላይ ከሚውሉ በጣም ጠንካራ ከሆኑ ኢንዛይሞች አንዱ ነው. ይህ ኢንዛይም ለእንቅስቃሴው ኮፋክተር አያስፈልገውም። በጣም የሙቀት መጠን ያለው ኢንዛይም ነው. RNase A ትክክለኛው የአሚኖ አሲድ ቅደም ተከተል የተገኘበት የመጀመሪያው ኢንዛይም እና ሦስተኛው ፕሮቲን ነው። ይህ ኢንዛይም 124 አሚኖ አሲዶች እና 12600da ሞለኪውላዊ ክብደት ያለው በጣም ትንሽ ነው። እና አራት የሂስቲዲን ቅሪቶች አሉት (የእሱ 12 እና 119 የካታሊቲክ ምላሽን ያካትታል)።
ሥዕል 01፡ RNase A
RNase A ድፍድፍ ናሙና በማፍላት ሊገለል ይችላል። በሚፈላበት ጊዜ ሁሉም ሌሎች ኢንዛይሞች ቀሪውን RNase A. RNase A በሚያስደንቅ ሁኔታ የተረጋጋ ኢንዛይም ያበላሻሉ። ይህ ኢንዛይም በሪቦኑክሊዝ ኢንቢክተር ፕሮቲን፣ ሄቪ ሜታል እና ዩሪዲን ቫንዳቴት ኮምፕሌክስ ይከላከላል።
RNase H ምንድን ነው?
አርናሴ ኤች ልዩ ያልሆነ የሪቦኑክለስ ኢንዛይም ሲሆን አር ኤን ኤ በአር ኤን ኤ ዲ ኤን ኤ ዲቃላ በሃይድሮሊቲክ ምላሽን ሊያዋርድ ይችላል። RNase H በአር ኤን ኤ-ዲ ኤን ኤ ዲቃላ ውስጥ ያለውን የአርኤንኤን 3'- O-P ቦንድ ይሰጣታል። በመጨረሻም 3'OH እና 5' ፎስፌት የተቋረጡ ምርቶችን ያመርታል። በዲ ኤን ኤ ውስጥ አዳዲስ የዲ ኤን ኤ ክሮች ከተፈጠሩ በኋላ አር ኤን ኤ ፕሪመርን በማስወገድ ወሳኝ ሚና ይጫወታል። በላብራቶሪ ሁኔታዎች ውስጥ፣ በተለይም አር ኤን ኤ በአር ኤን ኤ ዲ ኤን ኤ ዲ ኤን ኤ እና ያልተቀላቀለ አር ኤን ኤ ዝቅ ያደርገዋል። እና ይህ ኢንዛይም አብዛኛውን ጊዜ የአር ኤን ኤ አብነት ለማጥፋት ጥቅም ላይ የሚውለው በመጀመሪያ ተጨማሪ የዲ ኤን ኤ ሲዲኤን ሲሰራ ከተሰራ በኋላ ነው።
ምስል 02፡ RNase H
RNase H በኒውክሌዝ መከላከያ ምርመራዎች ላይም ይጠቀማል። እንዲሁም የ poly A ጅራትን ከኤምአርኤን ከማስወገድ ጋር ሊካተት ይችላል. RNase H በሴሉ ውስጥ እና ውጭ ያለውን ኮድ የማይሰጥ አር ኤን ኤን የማጥፋት ችሎታ አለው።የብረት ionዎች ለዚህ የፕሮቲን እንቅስቃሴ እንደ ተባባሪዎች ይፈለጋሉ. ቼሌተር (EDTA) የ RNase H ኢንዛይም ለመግታት ጥቅም ላይ ሊውል ይችላል።
በአር ኤን ኤ እና አር ኤን ኤ እና አር ኤን ኤ ኤች መካከል ያሉ ተመሳሳይነቶች ምንድን ናቸው?
- ሁለቱም በተፈጥሮ ውስጥ ፕሮቲን ናቸው።
- ሁለቱም ኢንዶሪቦኑክለስ ናቸው።
- ሁለቱም አር ኤንኤን ዝቅ ማድረግ ይችላሉ።
- ሁለቱም የሃይድሮሊክ ምላሽን ያከናውናሉ።
- ሞለኪውላር ላብራቶሪዎች እነዚህን ሁለቱንም ይጠቀማሉ።
በ RNASE A እና RNASE H መካከል ያለው ልዩነት ምንድን ነው?
RNASE A vs RNASE H |
|
| RNase A የጣፊያ ራይቦኑክሊዝ ነው በተለይ በ 3’ ያልተጣመሩ ሳይቶሲን እና የኡራሲል አር ኤን ኤ ቅሪቶች በከፍተኛ የጨው ክምችት ላይ የሚሰነጠቅ። | RNase H ልዩ ያልሆነ የሪቦኑክለስ ኢንዛይም ሲሆን አር ኤን ኤ በአር ኤን ኤ ዲ ኤን ኤ ዲቃላ በሃይድሮሊክ ምላሽ በኩል ሊያዋርድ ይችላል። |
| የአር ኤን ኤ የማጽዳት ተፈጥሮ | |
| RNase A በተለይ ባለ ነጠላ-ፈትል አር ኤን ኤ በከፍተኛ የጨው ክምችት ይሰጣታል። | RNase H አር ኤን ኤ በአር ኤን ኤ ዲቃላ ውስጥ ይሰልጣል። |
| የተግባር ተባባሪ ምክንያቶች | |
| RNase A ለእንቅስቃሴው ተባባሪዎችን አያስፈልገውም። | RNase H ለእንቅስቃሴው ተባባሪ በመሆን የብረት ions ያስፈልገዋል። |
| የፕሮቲን እንቅስቃሴ አጋቾች | |
| Ribonuclease inhibitor ፕሮቲን፣ሄቪ ሜታል እና ዩሪዲን ቫንዳቴት ኮምፕሌክስ የ RNAse A እንቅስቃሴን ይከለክላል። | A chelator (EDTA) የ RNase H እንቅስቃሴን ይከለክላል። |
| አር ኤን ኤ ፕሪመር መወገድ በዲኤንኤ ድግግሞሽ | |
| RNase A ለአር ኤን ኤ ፕሪመር በዲኤንኤ መባዛት ጥቅም ላይ አይውልም። | RNase H ለአር ኤን ኤ ፕሪመር በዲኤንኤ መባዛት ጥቅም ላይ ይውላል። |
| የዲኤንኤ አብነት መወገድ በተሟላ ዲ ኤን ኤ (ሲ-ዲ ኤን ኤ) ውህደት | |
| RNase A የተጨማሪ ዲኤንኤ (ሲ-ዲኤንኤ) ውህደት ጊዜ ለአር ኤን ኤ አብነት ለማስወገድ ጥቅም ላይ አይውልም። | RNase H በተጨማሪ ዲኤንኤ (ሲ-ዲኤንኤ) ውህደት ጊዜ ለአር ኤን ኤ አብነት መወገድ ጥቅም ላይ ይውላል። |
| የፖሊ-ኤ-ጅራትን በ mRNA ውስጥ ማስወገድ ወደ ኦሊጎ (ዲቲ) | |
| RNase A "poly-A tail" በ mRNA hybridized to oligo (dt) ውስጥ ለማስወገድ አያገለግልም። | RNase H በ mRNA ውስጥ "ፖሊ-A ጅራትን" ለማስወገድ ጥቅም ላይ ይውላል ወደ oligo (dt) |
ማጠቃለያ - RNASE A vs RNASE H
ሪቦኑክሊየስ አር ኤን ኤ ወደ ትናንሽ ክፍሎች የመሰንጠቅ ችሎታ ያላቸው ኑክሌዝ ኢንዛይሞች ናቸው። ሁለት ዓይነት ናቸው; endoribonucleases እና exoribonucleases. Endoribonuclease አንድ-ክር ወይም ባለ ሁለት-ክር አር ኤን የመቀነስ ችሎታ ያለው ኢንዶኑክሊዝ ነው። እና በአር ኤን ኤ ፖሊኑክሊዮታይድ ሰንሰለት ውስጥ ያለውን የፎስፎዲስተር ቦንድ ይቆርጣል። RNase A እና RNase H ሁለት endoribonucleases ናቸው። RNase A የጣፊያ ራይቦኑክሊዝ ነው በተለይ ያልተጣመሩ ሳይቶሲን እና የኡራሲል ቅሪቶችን በ 3' ጫፍ ነጠላ-ክር አር ኤን ኤ ላይ ከፍ ባለ የጨው ክምችት ላይ የሚሰብር። RNase H ልዩ ያልሆነ የራይቦኑክለስ ኢንዛይም ሲሆን አር ኤን ኤ በአር ኤን ኤ-ዲ ኤን ኤ ዲቃላ በሃይድሮሊክ ምላሽ በኩል ዝቅ የሚያደርግ ነው። ይህ በRNase A እና RNase H መካከል ያለው ልዩነት ነው።
PDF RNASE A vs RNASE H አውርድ
የዚህን ጽሁፍ ፒዲኤፍ ስሪት አውርደው እንደ ጥቅስ ማስታወሻ ከመስመር ውጭ ዓላማ መጠቀም ይችላሉ። እባኮትን የፒዲኤፍ ቅጂ እዚህ ያውርዱ በ RNASE A እና RNASE H መካከል ያለው ልዩነት
