የቁልፍ ልዩነት - ጀል መቆለል vs መለያየት ጄል
የSDS-PAGE ቴክኒክን ለማብራራት ጄል እና መለያየት ጄል የሚሉት ቃላት ጥቅም ላይ ይውላሉ። SDS-PAGE ወይም sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide gel electrophoresis የፕሮቲን ሞለኪውሎችን በሞለኪውላዊ ክብደታቸው ለመለየት የሚያገለግል የላብራቶሪ ዘዴ ነው። ከቴክኒኩ በስተጀርባ ያለው ጽንሰ-ሐሳብ የተለያየ ሞለኪውላዊ ክብደት ያላቸው ፕሮቲኖች የተለያዩ የፍልሰት መጠኖችን ያሳያሉ; ዝቅተኛ ሞለኪውላዊ ክብደት ሞለኪውሎች በፍጥነት ይፈልሳሉ ነገር ግን ከፍተኛ ሞለኪውላዊ ክብደት ሞለኪውሎች ቀስ ብለው ይፈልሳሉ። የፍልሰት መካከለኛው ጄል ነው። ጄል መደራረብ እና መለያየት ጄል ተብለው የተሰየሙ ሁለት ዓይነት ጄል ዓይነቶች አሉ።ጄል በሚደራረብበት እና በመለየት መካከል ያለው ቁልፍ ልዩነት የተደራራቢ ጄል ፒኤች 6.8 ሲሆን የመለያው ጄል ፒኤች 8.8 ነው።
Stacking Gel ምንድን ነው?
Stacking ጄል በኤስዲኤስ-ገጽ ቴክኒክ ውስጥ ይበልጥ የተጠናከረ የመፍትሄው ጄል (የመለያ ጄል) አናት ላይ የተቀመጠ ዝቅተኛ የተጠናከረ ፖሊacrylamide gel ነው። የቁልል ጄል የኤሌክትሮፊዮሬሲስን መፍትሄ ለማሻሻል ጥቅም ላይ ይውላል. በናሙናው ውስጥ ባሉ ፕሮቲኖች ላይ ተጽዕኖ በሚያሳድር ጄል እና መፍታት ጄል ክምችት መካከል ባለው ልዩነት ምክንያት መፍትሄው ይጨምራል። በተደራራቢ ጄል ውስጥ ያለው የ polyacrylamide መጠን አነስተኛ ስለሆነ የቀዳዳው መጠን ከፍ ያለ ነው። ይህ ደግሞ መለያየትን ለመጨመር ይረዳል።
የተደራራቢው ጄል ልቅ የሆነ ፖሊacrylamide ጄል ሲሆን ትልቅ ቀዳዳ ያለው 7% ፖሊacrylamide ነው። እነዚህ ቀዳዳዎች ለትልቅ የፕሮቲን ሞለኪውሎች እንደ ትልቅ እንቅፋት ሆነው አይሠሩም። ስለዚህ ይህ ጄል በእነዚያ ፕሮቲኖች እንቅስቃሴ ላይ ትንሽ ይነካል ። ይህም በሁለት ጄል መካከል በማተኮር እንደ ፕሮቲን ተንቀሳቃሽነት እና መጠን መለያየትን ይፈጥራል።
ምስል 01፡ SDS-ገጽ Acrylamide Gel
የተደራራቢ ጄል ፒኤች 6.8 ነው። የእሱ ፒኤች ጄል በ 2 ፒኤች አሃዶች ከሚፈታ ይልቅ አሲዳማ ነው። ይህ ፒኤች ዝቅተኛ የ ion ጥንካሬን ያመለክታል ስለዚህ ከፍተኛ የኤሌክትሪክ መከላከያ. ይህ በጄል ውስጥ ከሚገኙት ሌሎች ክስ ቅንጣቶች ይልቅ የፕሮቲኖችን እንቅስቃሴ ያነሳሳል።
ጀል የሚለየው ምንድን ነው?
የኤስዲኤስ-PAGEቴክኒክ ጄል ወይም መፍትሄ ሰጪ ጄል በከፍተኛ ደረጃ የተጠናከረ ፖሊacrylamide ጄል ዝቅተኛ በሆነ የተከመረ ጄል ላይ የተቀመጠ ነው። የመለየት ጄል ከፍተኛ መጠን ያለው ፖሊacrylamide (10%) ይዟል. የዚህ ጄል ፒኤች እንደ pH=8.8 ተጠብቆ ይቆያል፣ይህም ከተደራራቢ ጄል የበለጠ የፒኤች መጠን ነው።
ሥዕል 02፡ ኤ ጄል ኤሌክትሮፎረሲስ አፓራተስ
የፕሮቲን ሞለኪውሎች ወደ መለያየት ጄል ሲደርሱ የነዚያ ሞለኪውሎች ፍልሰት ይቀንሳል ምክንያቱም መለያየቱ ጄል ከፍተኛ መጠን ያለው ትንሽ ቀዳዳ ያለው ሲሆን ይህም ለፕሮቲን ሞለኪውሎች እንቅስቃሴ ትልቅ እንቅፋት ሆኖ ያገለግላል።. ይህ ፍጥነት መቀነስ ሌሎቹ ፕሮቲኖች ቀስ ብለው እንዲሰደዱ ያስችላቸዋል፣ይህም በሁለቱ ጂሎች መካከል ጠባብ እና የተጠናከረ ባንድ እንዲኖር ያደርጋል።
በጄል ቁልል እና ጄል መለያየት መካከል ያለው ግንኙነት ምንድን ነው?
ሁለቱም Stacking Gel እና Separating Gel አይነቶች በአንድ መሳሪያ ውስጥ ጥቅም ላይ ይውላሉ።
ጀል በመደርደር እና ጄል በመለየት መካከል ያለው ልዩነት ምንድን ነው?
Stacking Gel vs Separating Gel |
|
| Stacking ጄል በኤስዲኤስ-ገጽ ቴክኒክ ውስጥ ይበልጥ የተጠናከረ የመፍትሄው ጄል (የመለያ ጄል) አናት ላይ የተቀመጠ ዝቅተኛ የተጠናከረ ፖሊacrylamide gel ነው። | የኤስዲኤስ-ገጽ ቴክኒክ ጄል መለያየት ወይም መፍታት በጣም የተጠናከረ ፖሊacrylamide ጄል በዝቅተኛ የተከመረ ጄል አናት ላይ ይቀመጣል። |
| ምደባ | |
| Stacking gel በመፍትሔው (መለያ) ጄል ላይ ተቀምጧል። | የሚለየው ጄል ለጄል ኤሌክትሮፊዮሬሲስ ጥቅም ላይ በሚውለው መያዣ ግርጌ ላይ ይደረጋል። |
| ማጎሪያ | |
| የመደራረብ ጄል ትኩረት ከፍተኛ ነው። | የጄል መለያው ትኩረት ዝቅተኛ ነው። |
| የፖሊacrylamide ይዘት | |
| Stacking gel 7% ፖሊacrylamide ይይዛል። | ጀል መለያየት 10% ፖሊacrylamide ይይዛል። |
| pH | |
| የተደራራቢ ጄል ፒኤች 6.8 ነው። | የመለያ ጄል ፒኤች 8.8 ነው። |
| Pore መጠን | |
| ትልቅ የቀዳዳ መጠኖች በተደራራቢ ጄል ውስጥ ይገኛሉ። | ትናንሽ የቀዳዳ መጠኖች ጄል በመለየት ላይ ይገኛሉ። |
| መፍትሄ | |
| Stacking gel የተሻለ መፍትሄ ይሰጣል። | ጄል መለየት ደካማ ጥራት ይሰጣል። |
ማጠቃለያ - ቁልል ጄል vs መለያየት ጄል
Stacking gel እና separating gel የተባሉት ሁለት አይነት ፖሊacrylamide gels በተሰጠው ናሙና ውስጥ የተሻለ የፕሮቲን ሞለኪውሎችን ለመለያየት ያገለግላሉ።በጄል መደራረብ እና በመለያየት ጄል መካከል ያለው ልዩነት የስታኪንግ ጄል ፒኤች 6.8 ሲሆን የመለያው ጄል ፒኤች 8.8 ነው።
