በቤንዞናሴ እና ዲናሴ መካከል ያለው ልዩነት

2024 ደራሲ ደራሲ: Alex Aldridge | [email protected]. ለመጨረሻ ጊዜ የተሻሻለው: 2023-12-17 13:31

ቁልፍ ልዩነት - ቤንዞናሴ vs ዲናሴ

የኑክሊክ አሲዶች መበስበስ ለብዙ ሞለኪውላር ባዮሎጂ ቴክኒኮች ጠቃሚ ነው። የማይፈለጉ የዲ ኤን ኤ እና አር ኤን ኤ ቁርጥራጮችን ለማስወገድ በዲኤንኤ ቴክኖሎጂ ውስጥ በሰፊው ጥቅም ላይ ይውላል። ኑክሊክ አሲድ የሚያበላሹ ኢንዛይሞች ኑክሌይስ ተብለው ይጠራሉ, እና በሚፈለገው ተግባር ላይ ተመስርተው የተለያዩ አይነት ሊሆኑ ይችላሉ. ዲ ኤን ኤን የሚያበላሹ ኒውክሊየስ ዲ ኤን ኤዎች በመባል ይታወቃሉ ፣ አር ኤን ኤን የሚያበላሹት ደግሞ አር ናስ በመባል ይታወቃሉ። እነዚህ ኢንዛይሞች በአብዛኛው ጥቅም ላይ የሚውሉት ንፁህ ዲ ኤን ኤ፣ አር ኤን ኤ ወይም ፕሮቲኖችን ለመለየት በብልቃጥ ውስጥ በሚገኙ ሞለኪውላዊ ሙከራዎች ውስጥ ነው። ቤንዞናዝ ዲ ኤን ኤ እና አር ኤን ኤ የሚያዋርዱ ኒውክላይሴሶች ሲሆኑ ዲ ኤን ኤ ደግሞ ዲ ኤን ኤ ብቻ ነው።ይህ በቤንዞናሴ እና ዲናሴ መካከል ያለው ቁልፍ ልዩነት ነው።

ቤንዞናሴ ምንድን ነው?

Benzonase ከሴራቲያ ማርሴሴንስ በጄኔቲክ ምህንድስና የተፈጠረ ኢንዶኑክሊዝ ነው። ይህ ኢንዛይም የሚመረተው በኢ.ኮሊ አስተናጋጆች ውስጥ በኢንዱስትሪ ደረጃ ነው። ቤንዞናዝ ባለ ሁለት ገመድ ዲ ኤን ኤ ፣ መስመራዊ ዲ ኤን ኤ ፣ ክብ ዲ ኤን ኤ እና ነጠላ-ክር ያለው አር ኤን ኤ መሰንጠቅ ይችላል። ስለዚህ Benzonase ለንግድ አስፈላጊ ነው. ቤንዞናዝ ኢንዛይም 245 ተመሳሳይ አሚኖ አሲዶች፣ ~30 ኪዳ ንዑስ ክፍሎች ያሉት ሁለት አስፈላጊ የዲሰልፋይድ ቦንዶች ያለው ፕሮቲን ዲመር ነው። ቤንዞናዝ በ 5' መጨረሻ ላይ ኑክሊክ አሲዶችን ይሰፋል እና ነፃ 5'ends ያላቸውን ቁርጥራጮች ያስከትላል። ቤንዞናዝ ኑክሊክ አሲዶችን በማንኛውም ቅደም ተከተል ሊሰብር ይችላል ነገርግን በጂሲ የበለጸጉ ክልሎችን ይመርጣል።

Benzonase በ -20 ^{0C ላይ ተከማችቷል። ለኤንዛይም እንቅስቃሴ በጣም ጥሩው ፒኤች 8.0 - 9.2 ሆኖ ተገኝቷል. የቤንዞናዝ አፕሊኬሽኖች የናሙና ዝግጅትን ለፕሮቲን 2D ጄል ኤሌክትሮፊዮራይዝስ ያካትታሉ ቤንዞናዝ የታሰሩ ኑክሊክ አሲዶችን ያስወግዳል እና የኑክሊክ አሲድ ብክለትን ከዳግም ፕሮቲን ዝግጅቶች ያስወግዳል።እንዲሁም የፕሮቲን ውህዶችን viscosity ለመቀነስ እና በሴል ድብልቅ ውስጥ የሴሎች መሰባበርን ለመከላከል ይጠቅማል።}

DNase ምንድን ነው?

DNase ኑክሌዝ ነው ሃይድሮሊቲክ ኢንዛይም ባለ ሁለት ገመድ ዲ ኤን ኤ ለመንጠቅ ብቻ የሚችል። ሁለት ዋና ዋና የዲ ኤን ኤ ዓይነቶች አሉ፡ ዲናሴ I እና ዲናሴ II። ዲናሴ I ፖሊኑክሊዮታይድ 5' ነፃ ጫፎችን ለማምረት ባለ ሁለት ገመድ ዲ ኤን ኤ በመክፈሉ ይሳተፋል። DNase II ባለ ሁለት ገመድ ዲ ኤን ኤ በመክተፍ ፖሊኑክሊዮታይድ ክሮች ከ3′ ነፃ ጫፎች ወይም ከመጠን በላይ ማንጠልጠያ ለማምረት ይሳተፋል።

DNase I

DNase I በ7.0 - 8.0 መካከል ባለው ከፍተኛ ፒኤች ላይ ይሰራል። የኢንዛይም እንቅስቃሴው በብዙ ionክ ተባባሪዎች ላይ የሚመረኮዝ ሲሆን እነሱም Ca²⁺፣ Mg²⁺ ወይም Mn^2+የMg2+ ^{እና Mn}2+ ^{እንቅስቃሴ የDNase I ተግባርን ይወስናል Mg} በሚኖርበት ጊዜ 2+^{፣ DNase I እያንዳንዱን የ dsDNA ፈትል ለብቻው ይሰጣታል። ይህ በዘፈቀደ መንገድ ይከናወናል. በአንጻሩ፣ Mn}2+፣ ^{ኢንዛይሙ ሁለቱንም የዲኤንኤ ገመዶች በግምት ተመሳሳይ ቦታ ይሰነጥቃል።ይህ መሰንጠቅ ሁለት ዓይነት የዲ ኤን ኤ ቁርጥራጮችን ያመጣል; አንድ አይነት ጠፍጣፋ ጫፍ እና ሌላ አይነት አንድ ወይም ሁለት ኑክሊዮታይድ በላይ ማንጠልጠያ ያለው።}

ምስል 02፡ ዲናሴ

DNase II

DNase II በምርጥ ፒኤች ከ4.5-5.0 እና ዳይቫልንት ሜታል ionዎች ለእንቅስቃሴው ይፈለጋል፣ ከዲናሴ I ጋር ተመሳሳይ ነው።

1. በርካታ ነጠላ ክር መግቻዎች በዲኤንኤ የጀርባ አጥንት ውስጥ ገብተዋል።
2. አሲድ የሚሟሟ ኑክሊዮታይዶች እና oligonucleotides ይመረታሉ።
3. የቀጥታ ያልሆነ hyperchromic shift በመጨረሻው ደረጃ ላይ ይከሰታል።

የዲናስ ኢንዛይም ዋና አጋቾች የብረታ ብረት ኬላተሮች፣ የሽግግር ብረቶች እና እንደ ሶዲየም ዶዴሲል ሰልፌት እና β - ሜርካፕቶታኖል ያሉ ኬሚካሎች ያካትታሉ።

ዋናዎቹ የDNase አፕሊኬሽኖች ከዲኤንኤ ነፃ የሆኑ የአር ኤን ኤ ተዋጽኦዎችን እና የፕሮቲን ውህዶችን ማዘጋጀት እና በብልቃጥ ግልባጭ ሙከራዎች ወቅት አብነት ዲኤንኤ ማስወገድን ያካትታሉ።

በቤንዞናሴ እና ዲናሴ መካከል ያለው ተመሳሳይነት ምንድን ነው?

• ሁለቱም ሀይድሮቲክ ኢንዛይሞች ናቸው።
• ሁለቱም አስኳሎች ናቸው።
• ሁለቱም የሚሳተፉት የኑክሊክ አሲዶች ፎስፎዲስተር ቦንዶችን በማፍረስ ነው።
• ሁለቱም የኢንዛይም እንቅስቃሴን ለመጠበቅ ከፍተኛውን ፒኤች እና የማከማቻ ሙቀት ይፈልጋሉ።
• የኢንዛይም አጋቾች ማጭበርበሪያ ወኪሎች፣የሽግግር ብረቶች እና ሳሙና ኬሚካሎች ያካትታሉ።
• መተግበሪያዎች በዋነኝነት የሚያተኩሩት ከዲኤንኤ፣ አር ኤን ኤ እና ፕሮቲኖች ከፍተኛ ንፅህና በማግኘት ላይ ነው።
• ሁለቱም ኢንዛይሞች በጄኔቲክ ምህንድስና ሊመረቱ ይችላሉ።

በቤንዞናሴ እና ዲናሴ መካከል ያለው ልዩነት ምንድን ነው?

Benzonase vs DNase
Benzonase ባለ ሁለት ገመድ ዲ ኤን ኤ፣ ሊኒያር ዲ ኤን ኤ፣ ክብ ዲ ኤን ኤ እና አር ኤን ኤ ለመንጠቅ የሚችል ኢንዛይም ነው።	DNase ባለ ሁለት ገመድ ዲ ኤን ኤ መቆራረጥ የሚችል ኢንዛይም ነው።
የኢንዛይም ሰብስትሬት
ሁለቱም ዲኤንኤ እና አር ኤን ኤ ለቤንዞናዝ መገኛ ናቸው።	ዲኤንኤ የDNase መገኛ ነው።
መዋቅር
የቤንዞናዝ ከፍተኛው ፒኤች ክልል 7.0 -8.0 ነው።	ምርጥ የDNase I የፒኤች ክልል 7.0 - 8.0 እና ዲናሴ II 4.5 - 5.0 ነው።

ማጠቃለያ – Benzonase vs DNase

Nuclease ኢንዛይሞች በሞለኪውላር ባዮሎጂ እና በጄኔቲክ ምህንድስና ረገድ በተለያዩ የሙከራ ሂደቶች በስፋት ጥቅም ላይ ይውላሉ።ቤንዞናዝ እና ዲ ኤንኤሴ ሁለት ዓይነት ኒውክሊየስ ናቸው። ቤንዞናዝ ሁለቱንም ዲኤንኤ እና አር ኤን በማዋረድ ይሳተፋል፣ ዲ ኤን ኤ ደግሞ ባለ ሁለት ገመድ ዲ ኤን ኤ በመቁረጥ ውስጥ ይሳተፋል። ይህ በቤንዞናሴ እና በዲናሴ መካከል ያለው መሠረታዊ ልዩነት ነው። በአሁኑ ጊዜ እነዚህ ሁለቱም የኒውክሊየስ ዓይነቶች የሚመረቱት በዲኤንኤ ቴክኖሎጂ አማካኝነት ከፍተኛ ጥራት ያላቸው ኢንዛይሞችን በማምረት ለከፍተኛ ምርት የተመቻቹ ናቸው።

የBenzonase vs DNase ፒዲኤፍ ስሪት አውርድ

የዚህን ጽሁፍ ፒዲኤፍ ስሪት አውርደው እንደ ጥቅስ ማስታወሻ ከመስመር ውጭ ዓላማ መጠቀም ይችላሉ። እባኮትን የፒዲኤፍ ስሪት እዚህ ያውርዱ በቤንዞናሴ እና በዲናሴ መካከል ያለው ልዩነት