ቁልፍ ልዩነት - ኢንዶኑክለስ vs ኤክስኖኑክለስ
በ endonuclease እና exonuclease መካከል ያለውን ልዩነት ከመመልከትዎ በፊት ኒዩክሊየስ በትክክል ምን እንደሆነ ማወቅ ያስፈልጋል። ኑክሊዮስ በኒውክሊክ አሲዶች ውስጥ ባሉ ኑክሊዮታይዶች መካከል የፎስፎዲስተር ቦንዶችን መቆራረጥ የሚችል ኢንዛይም ነው። ኢንዶኑክለስ እና ኤክሶኑክለስ ሁለት የኒውክሊየስ ምድቦች ናቸው። በ endonuclease እና exonuclease መካከል ያለው ቁልፍ ልዩነት ኤንዶኑክሊየስ በኑክሊክ አሲድ ሞለኪውል ውስጥ በኑክሊዮታይድ መካከል ያለውን ትስስር ሲያቋርጥ exonucleases ግን በኑክሊክ አሲድ ሞለኪውል 3' ወይም 5' ጫፎች ላይ ያለውን ትስስር ያቋርጣል።
Nuclease ምንድን ነው?
Nuclease በኒውክሊክ አሲድ ውስጥ በሚገኙ ኑክሊዮታይዶች መካከል የፎስፎዲስተር ቦንዶችን የመበጠስ አቅም ያለው ኢንዛይም ነው። በኑክሊዮታይድ መካከል ያለውን ኬሚካላዊ ትስስር በሃይድሮላይዝ ስለሚያደርግ የሃይድሮላዝ ኢንዛይም ቡድን ነው። ይህ ኢንዛይም በሴሎች ውስጥ ለሚከሰቱ ተፈጥሯዊ የዲኤንኤ መጠገኛ ዘዴዎች እና በባዮቴክኖሎጂ ሂደቶች እንደ ጂን ክሎኒንግ፣ recombinant DNA ቴክኖሎጂ፣ RFLP፣ AFLP፣ ጂን ቅደም ተከተል፣ የጂን ህክምና፣ ጂኖም ካርታ ወዘተ.
ሁለት ዋና ዋና የኒውክሊዮስ ዓይነቶች አሉ፡ ribonuclease እና deoxyribonuclease እነዚህም በአር ኤን ኤ እና ዲኤንኤ ሞኖመሮች መካከል ያለውን ኬሚካላዊ ትስስር የሚያፈርሱ ናቸው። በኒውክሊየስ የሚሠራበት ቦታ መሠረት, እነሱ በተጨማሪ በሁለት ቡድን ይከፈላሉ ማለትም ኤንዶኑክለስ እና ኤክሶኑክለስ. ኢንዶኑክሊዝስ የተወሰኑ ተከታታይ የኒውክሊክ አሲዶችን ክልሎችን ይገነዘባል እና በኒውክሊክ አሲዶች መካከል በሚገኙት ኑክሊዮታይዶች መካከል ያለውን የፎስፎዲስተር ቦንዶችን ይቆርጣሉ። Exonucleases በኑክሊክ አሲዶች ጫፍ ላይ በሚገኙት ኑክሊዮታይዶች መካከል የፎስፎዲስተር ቦንዶችን ይሰነጠቃል።
ስእል 1፡ ኒውክሌዝ እንቅስቃሴ
ኢንዶኑክለስ ምንድን ነው?
Endonuclease ኑክሊክ አሲዶችን ከመሃል የሚገነጣጥል የኒውክሊየስ ዓይነት ነው። የተወሰኑ ኑክሊዮታይድ የኑክሊክ አሲድ ቅደም ተከተሎችን ያውቃል እና በኑክሊዮታይድ መካከል ያለውን ኬሚካላዊ ትስስር ይሰብራል። ልዩ ገደቦችን ስለሚፈልጉ እና ትስስርን ስለሚቆርጡ እና የእገዳ ቁርጥራጮችን ስለሚፈጥሩ እገዳ ኢንዶኑክሊየስ በመባል ይታወቃሉ። ከ 100 በላይ እገዳዎች ኢንዶኑክሊየስ በባክቴሪያ እና አርኬያ ተለይተው ይታወቃሉ እና ለንግድ ዓላማዎች ይገኛሉ።
የመገደብ ኢንዶኑክሊየስ በባዮቴክኖሎጂ በስፋት ጥቅም ላይ ይውላል። በሞለኪውላዊ ክሎኒንግ ውስጥ ወሳኝ ሚና ይጫወታሉ. አብዛኛዎቹ ዲሜሪክ ኢንዛይሞች ከሁለት የፕሮቲን ክፍሎች የተውጣጡ ናቸው. ሁለት የፕሮቲን ንኡስ ክፍሎች ድርብ-ሽቦ ያለው ዲ ኤን ኤ ይጠቀለላሉ እና ሁለቱንም ክሮች ከሁለቱም በኩል ለየብቻ ይቆርጣሉ።በባክቴሪያ ውስጥ ልዩ እውቅና ያላቸው በመቶዎች የሚቆጠሩ የገዳቢ ኢንዶኑክሊየስ ዓይነቶች አሉ። በእገዳው ውስጥ ባለው ከፍተኛ ልዩነት ምክንያት, በተወሰኑ ቅደም ተከተሎች ላይ ብቻ ይጣበቃሉ. ስለዚህም በዲኤንኤ ቴክኖሎጂ ውስጥ በጣም ጠቃሚ የሆኑ ሞለኪውላዊ መሳሪያዎች ተደርገው ይወሰዳሉ። ያለገደብ ኤንዶኑክሊየስ, እንደገና የተዋሃዱ የዲ ኤን ኤ ሞለኪውል ማምረት አይቻልም. የዲኤንኤ ሞለኪውል መፈጠር የአብዛኞቹ ሞለኪውላር ባዮሎጂካል ቴክኖሎጂዎች መሰረታዊ እርምጃ ነው።
በገደብ endonucleases ልዩ ቅደም ተከተል ማወቂያን ለመረዳት ምሳሌን መከተል አንባቢዎችን ይረዳል።
Bam HI በዲኤንኤ ሞለኪውል ውስጥ የሚከተለውን የገዳቢ ቦታ የሚፈልግ ኢንዶኑክሊየስ ገደብ ነው (ጣቢያው በቀይ ፊደላት ይታያል)።
ባም ሃይ ኒዩክሊክ አሲድን ከተከለከለው ቦታ ከሰቀለ በኋላ የሚከተሉትን ሁለት ቁርጥራጮች ያመነጫል።
EcoRI በዲኤንኤ ቴክኖሎጂ ውስጥ በጣም ጠቃሚ የሆነ ሌላ ገደብ ኢንዶኑክሊዝ ነው በተወሰነ ገደብ ማወቂያ ቦታ ላይ የሚሰራ እና በስእል 2 ላይ እንደሚታየው ዲ ኤን ኤውን ይሰነጠቃል።
ምስል 2፡ EcoRI
Exonuclease ምንድን ነው?
Exonuclease የኑክሌዝ ኢንዛይም ሲሆን በኑክሊክ አሲድ ሰንሰለቶች 3' ወይም 5' ጫፍ ላይ በኑክሊዮታይድ መካከል ያለውን የኬሚካል ትስስር የሚቆርጥ ነው። በሰንሰለቱ መጨረሻ ላይ ነጠላ ኑክሊዮታይዶችን ይሰብራል እና የፎስፌት ቡድኖችን ወደ ውሃ በማስተላለፍ ኑክሊዮሲዶችን ይፈጥራል። Exonucleases በአርኬያ፣ በባክቴሪያ እና በ eukaryotes ውስጥ ይገኛሉ።በ ኢ ኮላይ ውስጥ ዲ ኤን ኤ ፖሊመሮች 1፣ 2 እና 3ን ጨምሮ 17 የተለያዩ exonucleases ይገኛሉ።በርካታ የDNA polymerases ከ3' እስከ 5' exonuclease ማረጋገጫ ተግባር ያሳያሉ።
Exonucleases በዲኤንኤ መጠገን፣ጄኔቲክ ዳግም ውህደት፣ሚውቴሽን እንዳይከሰት መከላከል፣ጂኖም ማረጋጊያ ወዘተ.
ስእል 3፡ የE Coli የRecBCD Exonuclease ድርጊት
በኢንዶኑክለስ እና በኤክሰኑክለስ መካከል ያለው ልዩነት ምንድን ነው?
Endonuclease vs Exonuclease |
|
| Endonuclease የኑክሊዮስ ኢንዛይሞች አይነት ሲሆን በኑክሊክ አሲድ ሞለኪውል ውስጥ በኑክሊዮታይድ መካከል ያለውን ትስስር የሚያቋርጥ ነው። | Exonuclease የኑክሊዮስ ኢንዛይሞች አይነት ሲሆን በኑክሊዮታይድ መካከል ያለውን ትስስር በኑክሊክ አሲድ ሞለኪውል 3' ወይም 5' ጫፎች ላይ የሚያቋርጥ ነው። |
| የመጨረሻ-ምርቶች | |
| Endonucleases የ oligonucleotide ገደብ ቁርጥራጮች ያመርታሉ። | ኤክሰኑክሊዮታይዶች ኑክሊዮሳይዶችን ያመርታሉ። |
| ተግባር | |
| የፎስፎዲስተር ቦንዶችን ይሰብራሉ እና ገደቦችን ያመርታሉ። ነገር ግን ኑክሊዮታይድን አንድ በአንድ ያስወግዳሉ። | ከኑክሊክ አሲዶች ጫፍ ላይ ኑክሊዮታይድን አንድ በአንድ ያስወግዳሉ። |
| ምሳሌዎች | |
| ምሳሌዎች Bam HI፣ EcoRI፣ Hind III፣ Hpa I፣ Sma I፣ያካትታሉ። | ምሳሌዎች Exonuclease I፣ Exonuclease III፣ RecBCD (Exonuclease V)፣ RecJ exonuclease፣ Exonuclease VIII/RecE፣ Exonuclease IX፣ Exonuclease T፣ Exonuclease X ወዘተ ያካትታሉ። |
ማጠቃለያ - ኢንዶኑክለስ vs ኤክስኖኑሌዝ
Nucleases በኒውክሊክ አሲድ ኑክሊዮታይድ መካከል ያለውን የፎስፎዲስተር ኬሚካላዊ ትስስር ለመስበር ሀላፊነት አለባቸው። ኒውክሊየስ በኑክሊክ አሲድ ሰንሰለት ውስጥ ወይም ጫፍ ላይ ሊሰራ ይችላል. በድርጊት ጣቢያው መሠረት ሁለት ዋና ዋና የኒውክሊየስ ዓይነቶች በኦርጋኒክ ውስጥ ይገኛሉ. እነሱም ኢንዶኑክለስ እና ኤክሶኑክለስ ናቸው. ኢንዶኑክሊዝስ ኑክሊዮታይድን ከሰንሰለቱ መሃል ሲሰነጠቅ exonucleases ደግሞ ኑክሊዮታይድን ከኒውክሊክ አሲድ ሰንሰለት ጫፍ ላይ ይሰነጠቃል። ኢንዶኑክለስ በኒውክሊክ አሲድ ሰንሰለት ውስጥ ያሉ የተወሰኑ የመሠረት ቅደም ተከተሎችን ስለሚገነዘቡ እና በኑክሊዮታይድ መካከል ያለውን ትስስር ስለሚሰብሩ በዲኤንኤ ቴክኖሎጂ ውስጥ ኢንዶኑክለስ በጣም አስፈላጊ ናቸው።
