በ crRNA tracrRNA እና gRNA መካከል ያለው ቁልፍ ልዩነት CRRNA ከሁለቱ የ CRISPR አር ኤን ኤ አንዱ ሲሆን ይህም ከዒላማው የዲኤንኤ ቅደም ተከተል ጋር የሚጣመር ሲሆን ትራክ አር ኤን ኤ ደግሞ ሁለተኛው የ CRISPR አር ኤን ኤ ሲሆን የሚያገለግለው እንደ የ Cas nuclease እና gRNA ከሁለቱ ዋና ዋና ክፍሎች አንዱ ነው CRISPR-Cas9 የባክቴሪያ እና አርኬኤ ስርዓት ኢላማ ዲ ኤን ኤ ለይቶ የሚያውቅ እና የካስ ፕሮቲኖችን በዒላማ ዲ ኤን ኤ ውስጥ ባለ ሁለት ክር መቆራረጥን እንዲያደርጉ ይመራል።
CRISPR የተዘበራረቀ መደበኛ የተጠላለፉ አጫጭር ፓሊንድሮሚክ ድግግሞሾችን ያመለክታል። በባክቴሪያ እና በአርኬያ ውስጥ ካሉት የበሽታ መከላከያ ስርዓቶች አንዱ ነው. ተህዋሲያን እና አርኬያ እራሳቸውን ከቫይረስ በሽታ አምጪ ተህዋሲያን ለመከላከል ይህንን ስርዓት ይጠቀማሉ.ስኬታማ የጄኔቲክ ማሻሻያዎችን የሚያካትት በጣም አስደናቂ ከሆኑ ዘዴዎች አንዱ ነው. ይህ ዘዴ (CRISPR-Cas9) በባዮቴክኖሎጂ ውስጥ እንደ ልብ ወለድ የጂን-ማስተካከያ መሳሪያ ሆኖ ያገለግላል። በባዮቴክኖሎጂ ላይ በተለይም በጄኔቲክ ምህንድስና መስክ አዳዲስ እድገቶችን አምጥቷል።
የCRISPR-Cas9 ስርዓት ሁለት ዋና ዋና ክፍሎች አሉ። እነሱ መመሪያ አር ኤን ኤ (gRNA) እና ከ CRISPR ጋር የተቆራኙ (ካስ) ኒዩክሊዮስ ናቸው። መመሪያ አር ኤን ኤ የተወሰነ የአር ኤን ኤ ቅደም ተከተል ሲሆን ይህም የካስ ፕሮቲኖችን ኢላማውን ዲ ኤን ኤ እንዲሰነጠቅ የሚመራ ነው። መመሪያ አር ኤን ኤ ሁለት ዓይነት አር ኤን ኤ ይይዛል። እነሱ ጥርት አር ኤን ኤ (CRRNA) እና tracrRNA ናቸው። ከ CRISPR ጋር የተቆራኙ (Cas) ኒዩክላሴዎች በዒላማ ዲ ኤን ኤ ውስጥ ባለ ሁለት ክር መቆራረጥን የሚያደርጉ ልዩ ያልሆኑ ኢንዶኑክሊሴዎች ናቸው። በዒላማው ዲ ኤን ኤ ውስጥ ባለ ሁለት ክር መግቻዎችን በማድረግ ባክቴሪያ እና አርኬያ የቫይራል ዲ ኤን ኤ እንዳይነቃቁ ውስጣዊ መጠገኛ መንገዶቻቸውን ይመራሉ ።
CRRNA ምንድን ነው?
crRNA ወይም Crispr አር ኤን ኤ ከሁለቱ የመመሪያ አር ኤን ኤ አንዱ ነው። በመዋቅራዊ ደረጃ, 17-20 ኑክሊዮታይድ ቅደም ተከተል ነው. የ crRNA በጣም ዋጋ ያለው ባህሪ ለታለመው ዲ ኤን ኤ ማሟያ ነው.ስለዚህ, crRNA ከቫይራል ዲ ኤን ኤ ቅደም ተከተል ጋር ይዛመዳል. የ CRISPR-Cas 9 ስርዓት ልዩነት በ crRNA ላይ የተመሰረተ ነው. በባክቴሪያ ውስጥ፣ crRNA ከ tracrRNA ቅደም ተከተል ጋር ተቀላቅሏል፣ እሱም ሁለተኛው የ CRISPR አር ኤን ኤ ነው። የ crRNA ምርት የሚቀሰቀሰው ባክቴሪያዎች ለቫይረስ እንደገና በመጋለጣቸው ነው። ሲጋለጥ, ለ crRNA ኮድ የሚያቀርበውን ዘረ-መል (ጅን) ቅጂ ይከናወናል. ከዚያ የመከላከያ ዘዴው ከቫይረሱ ጋር ይጀምራል።
ምስል 01፡ CRISPR-Cas9 ስርዓት
tracrRNA ምንድነው?
Trans-activating crRNA ወይም tracrRNA የ guideRNA ወይም CRISPR አር ኤን ኤ ሁለተኛ ክፍል ነው። እንደ መከታተያ አር ኤን ኤ ይባላል። tracrRNA ለ endonuclease Cas 9 ፕሮቲን እንደ ማያያዣ ስካፎል ሆኖ ያገለግላል። በሌላ አነጋገር፣ tracrRNA Cas9 ን ወደ ኢላማው ዲ ኤን ኤ ለመምራት እንደ መያዣ ሆኖ ይሰራል።በመዋቅር፣ ትራክ አር ኤን ኤ 42 ኑክሊዮታይዶች አሉት። ከ crRNA ጋር ተደምሮ አለ።
gRNA ምንድን ነው?
መመሪያ አር ኤን ኤ ወይም gRNA ከ CRISPR-Cas9 የበሽታ መቋቋም ስርዓት ሁለት ዋና ዋና ክፍሎች አንዱ ነው። በሁለት አካላት የተዋቀረ የተወሰነ የአር ኤን ኤ ቅደም ተከተል ነው: crRNA እና tracrRNA. gRNA የታለመውን ዲ ኤን ኤ ይገነዘባል እና በካስ ፕሮቲኖች በዒላማ ዲ ኤን ኤ ውስጥ ባለ ሁለት ፈትል ክፍተቶችን እንዲያደርጉ ይመራል። ይህንን ለማድረግ፣ crRNA ተጨማሪ የዒላማ ዲ ኤን ኤ ሲይዝ፣ ትራክ አር ኤን ኤ ደግሞ እንደ እጀታ ሆነው የሚሰሩትን የካስ ፕሮቲኖችን ይመራል።
ምስል 02፡ gRNA
ትክክለኛውን gRNA መንደፍ በCRISPR-Cas9 ጂን-ማስተካከያ መሳሪያ ውስጥ ወሳኝ እርምጃ ነው። ስለዚህ የ CRISPR ስርዓት ስኬት እና የአርትዖት ውጤታማነት በትክክለኛው የ gRNA ቅደም ተከተል ላይ የተመሰረተ ነው. gRNA ከተለወጠው ፕላዝማይድ በሴሎች ውስጥ ሊገለጽ ይችላል።ክሎኒድ ፕላስሚዶች ወደ ሴሎች ሲገቡ, አስተናጋጅ ሴሎች gRNA ያመነጫሉ. በብዛት የሚመነጨው gRNA 100 ቤዝ ጥንዶችን ያካትታል።
በ crRNA tracrRNA እና gRNA መካከል ያለው ተመሳሳይነት ምንድን ነው?
- crRNA፣ tracrRNA እና gRNA በባክቴሪያ እና አርኬያ ውስጥ የሚገኙ አር ኤን ኤ ቅደም ተከተሎች ናቸው።
- ሁሉም የCRISPR ስርዓት ናቸው።
- gRNA የተሰራው ከ crRNA እና tracrRNA ነው።
- የባክቴሪዮፋጅ ዲ ኤን ኤውን በማወቅ እና ኢንዶኑክሊየስን ወደ ኢላማው ዲኤንኤ በመምራት ላይ ይሳተፋሉ።
- ስለዚህ፣ ሦስቱም የአር ኤን ኤ ዓይነቶች የ Cas9 ኑክሊዮስ የውጭ ጀነቲካዊ ቁሶችን ለመውረር ባለ ሁለት መስመር ክፍተቶችን በመምራት ላይ ይሳተፋሉ።
- የCRISPR ሙከራ ስኬት በሦስቱም የ RNA ዓይነቶች ይወሰናል።
በ crRNA tracrRNA እና gRNA መካከል ያለው ልዩነት ምንድን ነው?
crRNA የGRNA የ CRISPR አካል ሲሆን ለታለመው ዲ ኤን ኤ ማሟያ ሲሆን ትራክ አር ኤን ኤ ደግሞ የgRNA ሁለተኛ ክፍል ሲሆን ይህም ለካስ ኑክሌዝ ማሰሪያ ሆኖ ያገለግላል።gRNA የ crRNA እና tracrRNA ጥምረት ነው፣ እና እሱ ከሁለቱ የCRISPR-Cas9 አካላት አንዱ ነው፣ እሱም ዒላማ ዲ ኤን ኤ ለይቶ የሚያውቅ እና ኑክሊዮሶች በዒላማ ዲ ኤን ኤ ውስጥ ባለ ሁለት ፈትል ክፍተቶች እንዲሰሩ ይመራል። ስለዚህ በ crRNA tracrRNA እና gRNA መካከል ያለው ቁልፍ ልዩነት ይህ ነው።
የሚከተለው ሠንጠረዥ በ crRNA tracrRNA እና gRNA መካከል ያለውን ልዩነት ያጠቃልላል።
ማጠቃለያ - crRNA vs tracrRNA vs gRNA
CRISPR-Cas9 ስርዓት የባክቴሪያ እና አርካይያ በሽታ የመከላከል ስርዓት ነው። ይህ ስርዓት በባዮቴክኖሎጂ ውስጥ እንደ ጂን-ማስተካከያ መሳሪያ ሆኖ ያገለግላል። CRISPR ሁለት ዓይነት አር ኤን ኤዎችን ያቀፈ ሲሆን እነሱም CRISPR አር ኤን ኤ (ክራር ኤን ኤ) እና ትራክራር ኤን ኤ (ትራክራር ኤን ኤ) የሚሠራ ነው። በአጠቃላይ መመሪያ አር ኤን ኤ ወይም gRNA በመባል ይታወቃሉ። ይህ አር ኤን ኤ የወራሪ በሽታ አምጪ ተህዋስያንን ኢላማ ቅደም ተከተሎችን ይገነዘባል እና endonucleases በዒላማው ዲ ኤን ኤ ውስጥ ባለ ሁለት ፈትል ክፍተቶችን እንዲያደርጉ ይመራል። በባዕድ ጀነቲካዊ ቁሶች ውስጥ ባለ ሁለት ፈትል እረፍቶች ከተደረጉ በኋላ ፣ ውስጣዊ የመጠገን ዘዴ (ሆሞሎሎጂያዊ የመጨረሻ መቀላቀል ፣ NHEJ) ሚውቴሽን በማስተዋወቅ የውጭውን ዲ ኤን ኤ ያነቃቃል።ስለዚህም ይህ በ crRNA tracrRNA እና gRNA መካከል ያለውን ልዩነት ያጠቃልላል።
