በBL21 እና DH5 Alpha መካከል ያለው ቁልፍ ልዩነት BL21 የፕሮቲን እጥረት ያለበት የጄኔቲክ ምህንድስና ብቃት ያለው የኢ.ኮሊ ሴል በዋናነት ለፕሮቲን አገላለጽ የሚያገለግል ሲሆን DH5 Alpha በዘረመል ምህንድስና ብቃት ያለው የኢ. ለፕላዝማድ ለውጥ።
ኢ። ኮላይ ለድጋሚ ፕሮቲን ለማምረት ከሚመረጡት ታዋቂ ፍጥረታት አንዱ ነው። በአመታት ውስጥ በጣም ታዋቂው የመግለጫ መድረክ ሆኗል. እንደ ሴል ፋብሪካም ያገለግላል። BL21 እና DH5 Alpha በአሁኑ ጊዜ ለፕሮቲን አገላለጽ እና ለፕላዝማድ ለውጥ የሚያገለግሉ ሁለት የዘረመል ምህንድስና ኢ.ኮሊ ሴሎች ናቸው።
BL21 ምንድነው?
BL21 የፕሮቲን እጥረት ያለበት የጄኔቲክ ምህንድስና ብቃት ያለው ኢ.ኮሊ ሴል በዋናነት ለፕሮቲን አገላለጽ ያገለግላል። ኢ. ኮሊ BL21 ከቢ ዝርያ የተገኘ የባክቴሪያ ሴል ነው። የሎን ፕሮቲን እና የ ompT ውጫዊ ሽፋን ፕሮቲን ጉድለቶች አሉት። በተለምዶ ለተገለጹት ፕሮቲኖች መረጋጋት ስለሚያመጣ ለዳግም ፕሮቲን አገላለጽ ጥቅም ላይ ይውላል። BL21 ለፕሮቲን አገላለጽ ከ pCold I-IV DNA እና pCold TF DNA ጋር ጠቃሚ ነው። ነገር ግን ይህ ብቃት ያለው የኢ.ኮሊ ሴል ለፕሮቲን አገላለጽ ስርዓት የታሰበ አይደለም T7 አራማጅ እንደ ፒኢቲ ሲስተም። ከዚህ በስተጀርባ ያለው ምክንያት BL21 T7 RNA polymerase አይገልጽም. በተጨማሪም፣ ፕላዝማሚድ recA ሚውቴሽን ስለሌለው ለግንባታም ሆነ ለማዘጋጀት አይመከርም።
ምስል 01፡ BL21
BL21 ለመጀመሪያ ጊዜ የተገለፀው በStudier በ1986 ከተለያዩ የB መስመር ማሻሻያዎች በኋላ ነው። BL21 ህዋሶች ብዙ የውጭ ፕሮቲኖችን የሚያበላሹ የሎን ፕሮቲን እጥረት አለባቸው። ከዚህም በላይ ለውጫዊ ሽፋን ፕሮቲን (OmpT) ኮድ የሚያወጣ ሌላ ጂን ጠፍቷል። የእነዚህ ፕሮቲኖች እጥረት በ E.coli BL21 ሴሎች ውስጥ የውጭ ፕሮቲን በተሳካ ሁኔታ እንዲመረት ያደርጋል። በተጨማሪም በነዚህ ህዋሶች ውስጥ ያለው hsdSB ሚውቴሽን የውጭ ዲኤንኤ ሜቲላይዜሽን እና በBL21 ሴሎች ውስጥ መቆራረጥን ይከላከላል።
Dh5 Alpha ምንድን ነው?
DH5 አልፋ በጄኔቲክ ምህንድስና ብቃት ያለው የኢ.ኮሊ ሴል ከ recA1 ሚውቴሽን ጋር በዋናነት ለፕላዝማድ ለውጥ የሚያገለግል ነው። የዲኤች 5 አልፋ ኢ. ኮሊ ሴሎች የለውጡን ውጤታማነት ከፍ ለማድረግ በአሜሪካዊው ባዮሎጂስት ዳግላስ ሃናሃን በጄኔቲክ ምህንድስና የተሰሩ ናቸው። የዲኤች5 አልፋ ሕዋስ ሶስት የተለያዩ ሚውቴሽን አለው፡recA1፣ endA1 እና lacZΔM15። recA1 glycine 160 ን በ recA polypeptide ውስጥ ያለውን አስፓርቲክ አሲድ ቀሪዎችን የሚተካ ነጠላ ነጥብ ሚውቴሽን ነው።ይህ ሚውቴሽን የ recombinases እንቅስቃሴን ያሰናክላል እና ግብረ ሰዶማዊ ዳግም ውህደትን ያስወግዳል። endA1 ሚውቴሽን የገባውን ፕላዝማይድ እንዳይቀንስ የሚያደርገውን ኢንትሮሴሉላር ኢንዶኑክሊዝ እንዳይሰራ ያደርገዋል።
ምስል 02፡ DH5 አልፋ
ከተጨማሪ፣ lacZΔM15 ሚውቴሽን የተለወጡ ህዋሶችን ሰማያዊ-ነጭን ለማጣራት ያስችላል። እነዚህ ሴሎች ብቃት ያላቸው ሴሎች ናቸው. ብዙውን ጊዜ የሚፈለገውን ፕላዝሚድ ለማስገባት በካልሲየም ክሎራይድ ለውጥ ይጠቀማሉ. የዲኤች 5 አልፋ ሴል ከሃናሃን ዘዴ ጋር ለፕላዝማይድ ለውጥ በጣም ቀልጣፋ ሴል እንደሆነ በቅርብ ጥናት ተረጋግጧል።
በBL21 እና DH5 Alpha መካከል ያሉ ተመሳሳይነቶች ምንድን ናቸው?
- BL21 እና DH5 Alpha በጄኔቲክ ኢንጂነሪንግ ሁለት ኢ.coli ናቸው።
- ሁለቱም ብቁ ሕዋሳት ናቸው።
- የተለያዩ ሚውቴሽን ያካተቱ ናቸው።
- ሁለቱም ተፈጥሯዊ መኖሪያ የላቸውም።
- እነዚህ ለላቦራቶሪ ዓላማዎች እንደ አገላለጽ ጥናቶች እና ክሎኒንግ ሂደቶች ያገለግላሉ።
በBL21 እና DH5 Alpha መካከል ያለው ልዩነት ምንድን ነው?
BL21 የፕሮቲን እጥረት ያለበት የዘረመል ምህንድስና ብቃት ያለው የኢ.ኮሊ ሴል በዋናነት ለፕሮቲን አገላለፅ ያገለግላል። በሌላ በኩል፣ DH5 Alpha በጄኔቲክ ምህንድስና ብቃት ያለው የኢ.ኮሊ ሴል ሲሆን በዋነኛነት ለፕላዝማድ ለውጥ የሚያገለግል recA1 ሚውቴሽን ነው። ስለዚህ፣ ይህ በBL21 እና DH5 Alpha መካከል ያለው ቁልፍ ልዩነት ነው። በተጨማሪም፣ BL21 ኢ. ኮሊ ሴል recA1 ሚውቴሽን የለውም፣ DH5 Alpha E.coli ሴል ደግሞ recA1 ሚውቴሽን አለው።
የሚከተለው ኢንፎግራፊክ በBL21 እና DH5 Alpha መካከል ያለውን ልዩነት በሰንጠረዥ ይዘረዝራል።
ማጠቃለያ – BL21 vs DH5 Alpha
በሽታ አምጪ ያልሆኑ የኢ.ኮላይ ዓይነቶች በዘረመል በሳይንቲስቶች የተገነቡ ለላቦራቶሪ አገላለጽ ጥናቶች እና ክሎኒንግ ዓላማዎች ናቸው።BL21 እና DH5 Alpha በዘረመል ምህንድስና የተሻሻሉ የኢ.ኮሊ ሴሎች ናቸው። BL21 በዋናነት ለፕሮቲን አገላለጽ ጥናቶች ጥቅም ላይ ይውላል. በሌላ በኩል፣ DH5 Alpha በዋነኝነት የሚያገለግለው ለፕላዝማድ ለውጥ ዓላማዎች ነው። ስለዚህ፣ ይህ በBL21 እና DH5 Alpha መካከል ያለው ልዩነት ማጠቃለያ ነው።
