በአንትሮን እና ዲኤንኤስኤ ዘዴ መካከል ያለው ቁልፍ ልዩነት አንትሮን ምርመራ ሁሉንም አይነት ካርቦሃይድሬትስ ለመለየት የሚደረግ አጠቃላይ ምርመራ ሲሆን ዲኤንኤስኤ ዘዴ ደግሞ ስኳርን የመቀነስ መጠናዊ ዘዴ ነው።
ስኳርን መቀነስ ሌላውን ውህድ ለመቀነስ የሚያስችል የስኳር አይነት ነው። ስለዚህ, እንደ ቅነሳ ወኪል ሆኖ ሊያገለግል ይችላል. ሌላውን ውህድ በሚቀንሱበት ጊዜ ስኳርን በመቀነስ ኦክሳይድን (oxidation) ይከተላል. በመዋቅራዊ ደረጃ, ስኳርን በመቀነስ ነፃ የአልዲኢድ ወይም የኬቶን ቡድን አላቸው. ሁሉም monosaccharides ስኳርን እየቀነሱ ነው. አንዳንድ disaccharides, አንዳንድ oligosaccharides እና አንዳንድ polysaccharides ደግሞ ስኳር እየቀነሱ ናቸው. ግሉኮስ፣ ጋላክቶስ እና ፍሩክቶስ የስኳር መጠንን በመቀነስ ይታወቃሉ።የስኳር መጠን መቀነስ መኖሩን ለማወቅ ብዙ ሙከራዎች አሉ. 3, 5-dinitrosalicylic acid (DNSA method) የቁጥር ዘዴ ሲሆን አንትሮን ፈተና ደግሞ ሁለት አይነት ሙከራዎች ናቸው።
አንትሮን ዘዴ ምንድን ነው?
አንትሮን ዘዴ የካርቦሃይድሬትስ አጠቃላይ ምርመራ ነው። አንትሮን ትሪሳይክሊክ ጥሩ መዓዛ ያለው ketone ነው። አንትሮን ሬጀንት በተከመረ ሰልፈሪክ አሲድ ውስጥ ዋናው ሬጀንት ነው። አንድ ጊዜ አንትሮን ሬጀንትን ወደ ናሙናው ውስጥ ከተጨመረ በኋላ በናሙናው ውስጥ ያሉት ካርቦሃይድሬቶች ውሀ ይደርቃሉ ፉርፈርል ይደርሳሉ እና ከዚያም በአንትሮን ይዋሃዳሉ አረንጓዴ ቀለም ስብስብ። ይህ አረንጓዴ ቀለም ያለው ኮምፕሌክስ በናሙና ውስጥ ያለውን ካርቦሃይድሬት ለማወቅ በ620 nm በቀለም ሊለካ ይችላል።
ሥዕል 01፡ አንትሮን
DNSA ዘዴ ምንድን ነው?
DNSA ዘዴ በናሙና ውስጥ ስኳርን የመቀነስ መጠናዊ ዘዴ ነው።እንደ እውነቱ ከሆነ, የስኳር መጠንን የመቀነስ ነፃ የካርቦን ቡድን (C=O) መኖሩን ይለካል. በዲኤንኤስኤ ዘዴ፣ የሙከራ ሬጀንት 3, 5-dinitrosalicylic acid ነው። 3, 5-dinitrosalicylic acid 3-አሚኖ-5-ናይትሮሳሊሲሊክ አሲድ (ቀይ-ቡናማ ቀለም ያለው ኮምፕሌክስ) በመፍጠር ስኳርን በመቀነስ ምላሽ ይሰጣል። 3-amino-5-nitrosalicylic acid በናሙና ውስጥ ያለውን የስኳር ቅነሳ መጠን ለመገመት በ spectrophotometry 540 nm ሊለካ ይችላል።
ምስል 02፡3፣ 5-ዲኒትሮሳሊሲሊክ አሲድ
በናሙና ውስጥ ያለውን አጠቃላይ የሚቀንስ ስኳር ለመገመት የታወቀ የስኳር ቅነሳ ተከታታይ መደበኛ መፍትሄዎች ያስፈልጋል። ይህ ዘዴ የስኳር መጠንን ለመቀነስ በባዮኬሚስትሪ ውስጥ በስፋት ጥቅም ላይ ይውላል. በ1959 ሚለር አስተዋወቀ።
በ Anthrone እና DNSA ዘዴ መካከል ያለው ተመሳሳይነት ምንድን ነው?
- ሁለቱም አንትሮን እና ዲኤንኤስኤ ዘዴዎች የስኳር ቅነሳን መለየት ይችላሉ።
- እነዚህ ዘዴዎች በባዮኬሚስትሪ በስፋት ጥቅም ላይ ይውላሉ።
በ Anthrone እና DNSA ዘዴ መካከል ያለው ልዩነት ምንድን ነው?
አንትሮን ዘዴ ሁሉንም አይነት ካርቦሃይድሬትስ በናሙና ውስጥ የሚለይ አጠቃላይ ምርመራ ሲሆን ዲኤንኤስኤ ዘዴ ደግሞ አጠቃላይ የስኳር መጠንን በናሙና ውስጥ የሚቀንስ ዘዴ ነው። ስለዚህ, ይህ በአንትሮን እና ዲኤንኤስኤ ዘዴ መካከል ያለው ቁልፍ ልዩነት ነው. አንትሮን ሬጀንት በአንትሮን ዘዴ ውስጥ ዋናው ሬጀንት ሲሆን ዲ ኤን ኤስ ደግሞ በዲ ኤን ኤስ ኤ ዘዴ ውስጥ ዋናው ሬጀንት ነው። ከዚህም በላይ የአንትሮን ዘዴ ሰማያዊ-አረንጓዴ ቀለም ያለው ኮምፕሌክስ ሲያመርት የዲኤንኤስኤ ዘዴ ደግሞ ቀይ-ቡናማ ቀለም ያለው ስብስብ ይፈጥራል. በአጠቃላይ የአንቶርን ዘዴ ጥራት ያለው ዘዴ ሲሆን የዲኤንኤስኤ ዘዴ ደግሞ መጠናዊ ዘዴ ነው።
የሚከተለው ኢንፎግራፊክ በአንትሮን እና ዲኤንኤስኤ ዘዴ መካከል ያለውን ልዩነት በበለጠ ዝርዝር ያሳያል።
ማጠቃለያ - Anthrone vs DNSA ዘዴ
አንትሮን ዘዴ በናሙና ውስጥ የካርቦሃይድሬትስ መኖሩን ለማወቅ አጠቃላይ ምርመራ ነው። ካርቦሃይድሬትስ በሚኖርበት ጊዜ አንትሮን ሬጀንት በ 620 nm በኮሎሪሜትሪ የሚለካ አረንጓዴ ቀለም ያለው ስብስብ ይሰጣል. ዲኤንኤስኤ (3, 5-dinitrosalicylic acid) ዘዴ የስኳር መጠንን የመቀነስ መለኪያ ነው. ዲኤንኤስኤ ስኳርን በመቀነስ ምላሽ ይሰጣል እና ወደ 3-አሚኖ-5-ናይትሮሳሊሲሊክ አሲድ (ቀይ-ቡናማ ቀለም ያለው ውስብስብ) ይቀንሳል ይህም በ spectrophotometer በ 540 nm. ስለዚህም ይህ በአንትሮን እና ዲኤንኤስኤ ዘዴ መካከል ያለውን ልዩነት ያጠቃልላል።