በKlenow ቁርጥራጭ እና በDNA polymerase 1 መካከል ያለው ቁልፍ ልዩነት የ Klenow ቁርጥራጭ የዲ ኤን ኤ ፖሊመሬሴ 1 ትልቅ ክፍል ሲሆን ከ 5′ እስከ 3′ exonuclease እንቅስቃሴ የሌለው ሲሆን ዲ ኤን ኤ ፖሊሜሬዝ ደግሞ ሦስቱንም የያዘ የኢ.ኮላይ ኢንዛይም ነው። ከ5′ እስከ 3′ exonuclease እንቅስቃሴን ጨምሮ ጎራዎች።
ዲ ኤን ኤ ፖሊመሬሴ በሕያዋን ፍጥረታት ውስጥ በዲኤንኤ መባዛት ውስጥ ከተካተቱት ቁልፍ ኢንዛይሞች አንዱ ነው። በ eukaryotes እና prokaryotes ውስጥ በመጠን እና ቅርፅ ላይ የተመሰረቱ የተለያዩ የዲ ኤን ኤ ፖሊመሬሴ ኢንዛይም ዓይነቶች አሉ። ዲ ኤን ኤ ፖሊመሬሴ 1 ፣ 2 እና 3 የሚገኙት በፕሮካርዮቲክ አካላት ውስጥ ብቻ ነው ፣ እና በዲ ኤን ኤ መባዛት ውስጥ የተለያዩ ሚናዎችን ይጫወታሉ።ዲ ኤን ኤ ፖሊመሬሴ 1 ከ5′ እስከ 3′ ፖሊሜሬሴ፣ ከ3′ እስከ 5′ exonuclease እንቅስቃሴ እና ከ5′ እስከ 3′ exonuclease እንቅስቃሴ ያላቸው ሶስት ጎራዎች አሉት። ክሌኖው ቁርጥራጭ የዲ ኤን ኤ ፖሊሜሬዝ ፕሮቲዮቲክ ምርት ነው 1. ከ 5 እስከ 3′ ፖሊሜሬሴ እና ከ3′ እስከ 5′ exonuclease እንቅስቃሴዎች ያልተነካ ዲ ኤን ኤ ፖሊመሬሴስ 1 አለው፣ ነገር ግን ከ5′ እስከ 3′ exonuclease እንቅስቃሴ የለውም።
ክሌኖው ቁርጥራጭ ምንድን ነው?
Klenow ቁርጥራጭ የዲኤንኤ ፖሊመሬዝ ትልቅ ክፍል ነው 1. ከDNA polymerase 1 በተለየ ከ5′ እስከ 3′ exonuclease እንቅስቃሴ ከ5′ እስከ 3′ ወደፊት exonuclease domain ስለሌለው በክሌኖ ፍርግም ውስጥ አይታይም። የ Klenow ፍርስራሾች የሚመነጩት የዲ ኤን ኤ ፖሊመሬሴ 1 ን በማዋሃድ ፕሮቲን-መፈጨት ኤንዛይም የሆነው ሱቲሊሲን ከተባለ ፕሮቲን ጋር ነው። በአንዳንድ አፕሊኬሽኖች የKlenow ቁርጥራጭ ከ3′ እስከ 5′ exonuclease እንቅስቃሴ የማይፈለግ ይሆናል። የ Klenow ቁርጥራጭን የሚመሰክረው ጂን ውስጥ ሚውቴሽን በማስተዋወቅ ሊወገድ ይችላል. የተገኘው ኢንዛይም ከ5′ እስከ 3′ ፖሊሜሬሴስ እንቅስቃሴ ብቻ ያለው exo-Klenow ቁርጥራጭ በመባል ይታወቃል።በሞርፎሎጂ ፣ ክሌኖቭ ቁርጥራጭ የሰው ቀኝ እጅን ይመስላል። N-terminal 3′-5′ exonuclease domain እና C-terminal polymerase domain በ30 A አካባቢ ይለያል።
ስእል 01፡ Klenow Fragment እና DNA Polymerase 1
Klenow ቁርጥራጭ በሞለኪውላር ባዮሎጂካል ቴክኒኮች ውስጥ ጠቃሚ መሳሪያ ነው። የ Klenow ቁርጥራጮች ብዙ ጥቅም አላቸው. ጠፍጣፋ ቁርጥራጮችን ለማምረት በብሉ-መጨረሻ ክሎኒንግ ውስጥ እጅግ በጣም አስፈላጊ ናቸው። የKlenow ቁርጥራጮች 3′ በላይ ማንጠልጠያዎችን ማስወገድ ወይም 5′ በላይ ማንጠልጠያዎችን በመሙላት ጠፍጣፋ ጫፎችን መፍጠር ይችላሉ። ከዚህም በላይ የ Klenow ቁርጥራጭ ድርብ-ክር ያለው ዲ ኤን ኤ ከአንድ ክሮች ውስጥ ለማዋሃድ ጥቅም ላይ ይውላል. በተጨማሪም ከ5'to 3′ ዲኤንኤ ጥገኛ የሆነ የዲኤንኤ ፖሊመሬሴ እንቅስቃሴን በመጠቀም በራዲዮአክቲቭ ምልክት የተደረገባቸውን መመርመሪያዎች ለማዘጋጀት ይጠቅማሉ።
DNA Polymerase 1 ምንድን ነው?
DNA polymerase 1 (ፖል 1) በፕሮካርዮት ውስጥ የሚገኝ ኢንዛይም ሲሆን ለባክቴሪያ ዲኤንኤ መባዛት አስፈላጊ ነው። በ 1956 በአርተር ኮርንበርግ የተገኘ የመጀመሪያው የዲ ኤን ኤ ፖሊሜሬዝ ዓይነት ነው. ፖል 1 በኢ. በጂን ፖልኤ የተቀመጠ እና 928 አሚኖ አሲዶችን ያቀፈ ነው። ሶስት ጎራዎችን ያካትታል. ሦስቱም ጎራዎች የተለዩ ተግባራትን ያሟላሉ። ሁለት ጎራዎች ከ5′ እስከ 3′ exonuclease እንቅስቃሴ እና ከ3′ እስከ 5′ exonuclease እንቅስቃሴን ያካሂዳሉ። በፖል 1 የተያዘው በዚህ እንቅስቃሴ ምክንያት እንደ ዲኤንኤ መጠገኛ ኢንዛይም ሳይሆን እንደ ዲኤንኤ የሚባዛ ኢንዛይም ታዋቂ ነው። ሶስተኛው ጎራ አብነት ዲ ኤን ኤን ከመውጣቱ በፊት እና የኦካዛኪን ቁርጥራጮች አንድ ላይ በማገናኘት አዲስ ዲ ኤን ኤ በመሙላት እና አር ኤን ኤ ፕሪመርሮችን በማንሳት ብዙ ፖሊሜራይዜሽን (ከ5′ እስከ 3′) የማጣራት ችሎታ አለው።
ምስል 02፡ ዲኤንኤ ፖሊመሬሴ
Pol 1 ከኢ ኮሊ ተለይቶ በሞለኪውላር አፕሊኬሽኖች ውስጥ በሰፊው ጥቅም ላይ ውሏል። ሆኖም ታክ ፖሊመሬሴ ከተገኘ በኋላ ኢ ኮሊ ፖል 1ን በ PCR ቴክኖሎጂ ተክቶታል። ታክ ፖሊሜሬሴ የፖል 1 ንብረት የሆነ ቴርሞስታብል ዲ ኤን ኤ ፖሊመሬሴ ነው።
በKlenow Fragment እና DNA Polymerase 1 መካከል ያለው ተመሳሳይነት ምንድን ነው?
- Klenow ቁርጥራጭ ትልቅ የDNA polymerase 1. ነው
- ከ5'ለ3′ የዲኤንኤ ጥገኛ የዲኤንኤ ፖሊመሬሴ እንቅስቃሴ እና 3'to 5′ exonuclease እንቅስቃሴ የማጣራት ሂደት አላቸው።
- ለብዙ ዓላማዎች ጥቅም ላይ ይውላሉ።
በKlenow Fragment እና DNA Polymerase 1 መካከል ያለው ልዩነት ምንድን ነው?
በክሌኖው ቁርጥራጭ እና በDNA polymerase 1 መካከል ያለው ቁልፍ ልዩነት የ Klenow ቁርጥራጭ ከ5′ እስከ 3′ exonuclease እንቅስቃሴ ሲጎድል ዲ ኤን ኤ ፖሊመሬሴ 1 ከ5′ እስከ 3′ exonuclease እንቅስቃሴ አለው። ስለዚህ፣ Klenow ቁርጥራጭ ሁለት ጎራዎች ያሉት ሲሆን ዲ ኤን ኤ ፖሊመሬሴ 1 ደግሞ ሶስቱም ጎራዎች አሉት።
ከታች ኢንፎግራፊክ በKlenow fragment እና DNA polymerase 1. መካከል ያለውን ልዩነት የበለጠ ያሳያል።
ማጠቃለያ – Klenow Fragment vs DNA Polymerase 1
ዲ ኤን ኤ ፖሊመሬሴ 1 የኢ.ኮሊ ኢንዛይም ሲሆን ከ5′ እስከ 3′ ፖሊሜራይዜሽን ዶሜይን፣ ከ3′ እስከ 5′ exonuclease domain እና 5′ to 3′ exonuclease domain። የ Klenow ቁርጥራጭ የዲ ኤን ኤ ፖሊሜሬዝ ትልቅ ክፍል ነው። አንድ የDNA polymerase 1 ጎራ የለውም፣ እሱም ከ5′ እስከ 3′ exonuclease domain ነው። በKlenow ቁርጥራጭ እና በDNA polymerase 1 መካከል ያለው ቁልፍ ልዩነት የ Klenow ቁርጥራጮች ከ5′ እስከ 3′ exonuclease domain የላቸውም፣ ዲ ኤን ኤ ፖሊመሬሴ 1 ደግሞ ከ5′ እስከ 3′ exonuclease domain አለው።
