በ HPLC እና UPLC መካከል ያለው ቁልፍ ልዩነት ኤችፒኤልሲ መጠናቸው 5 ማይክሮሜትሮች አካባቢ ያላቸውን ቅንጣቶች ለመተንተን የሚፈቅድ ሲሆን UPLC ደግሞ በ2 ማይክሮሜትሮች አካባቢ በጣም ትናንሽ ቅንጣቶችን ይፈቅዳል።
HPLC እና UPLC ሁለቱም ፈሳሽ Chromatographic ቴክኒኮች የውህድ ክፍሎችን ለመለየት ጠቃሚ ናቸው። በ HPLC እና UPLC መካከል ያለውን ልዩነት ለማወቅ በመጀመሪያ HPLC ምን እንደሆነ ማወቅ አለብን። ምክንያቱም UPLC ልዩ የ HPLC ስሪት ስለሆነ እና HPLC ምን እንደሆነ ካወቅን በቀላሉ ልንረዳው እንችላለን።
HPLC ምንድን ነው?
HPLC የሚለው ቃል ከፍተኛ አፈጻጸም ያለው ፈሳሽ ክሮማቶግራፊን ያመለክታል።የግቢውን የተለያዩ አካላት ለመለየት የምንጠቀምበት ዘዴ ነው። እንዲሁም፣ ድብልቅ ነገሮችን ለመለየት፣ ለመለካት እና ለመለየት በብዛት ጥቅም ላይ የዋለው ቴክኒክ ነው። በተጨማሪም, ይህ ዘዴ በአምዱ ውስጥ ፈሳሾችን ለመግፋት ከፍተኛ ግፊት ይጠቀማል. በተጨማሪም፣ የHPLC ዋና አፕሊኬሽኖች የአንድ ውህድ አካላትን ለመተንተን በባዮኬሚስትሪ ውስጥ ናቸው። አሚኖ አሲዶች፣ ኑክሊክ አሲዶች፣ ፕሮቲኖች፣ ሃይድሮካርቦኖች፣ ፀረ ተባይ መድኃኒቶች፣ ካርቦሃይድሬትስ፣ አንቲባዮቲክስ፣ ስቴሮይድ እና ሌሎች ስፍር ቁጥር የሌላቸው ኦርጋኒክ ንጥረ ነገሮችን ለመለየት እና ለመለየት ጥሩ መንገድ ነው።
ስእል 01፡ የHPLC ስርዓት በቤተ ሙከራ ውስጥ
በአጭሩ የ HPLC ቴክኒክ አሰራር ዘዴ እንደሚከተለው ነው። በመጀመሪያ ፣ ናሙናውን በፓምፕ በመጠቀም በትንሽ መጠን ወደ የሞባይል ደረጃ ጅረት ማስተዋወቅ አለብን።የፓምፕ ግፊት በ 40 MPa ውስጥ መቀመጥ አለበት. ከዚያ፣ ይህ የሞባይል ደረጃ ዥረት በHPLC አምድ ውስጥ ይንሰራፋል። እንዲሁም በናሙናው ውስጥ ያሉት ክፍሎች በአምዱ ውስጥ ያልፋሉ. ይሁን እንጂ የእንቅስቃሴ ፍጥነታቸው አንዳቸው ከሌላው የተለዩ ናቸው. ይህ ልዩነት የሚከሰተው በናሙና ክፍሎች እና በአምዱ ውስጥ ባለው ማስታወቂያ መካከል ባለው መስተጋብር ልዩነት ምክንያት ነው። ይህ adsorbent በአምዱ ውስጥ ስለሚኖር (የማይንቀሳቀስ) ስለሆነ ቋሚ ደረጃ ብለን እንጠራዋለን። በሁለተኛ ደረጃ, በአምዱ መጨረሻ ላይ, ከአምዱ የሚወጣውን ናሙና መሰብሰብ እንችላለን. እዚያም በናሙናው ውስጥ ላለው እያንዳንዱ አካል የማቆያ ጊዜዎችን ልዩነት ማወቅ እንችላለን።
UPLC ምንድን ነው?
UPLC የሚለው ቃል እጅግ ከፍተኛ አፈጻጸም ያለው ፈሳሽ ክሮማቶግራፊን ያመለክታል። የ HPLC ልዩነት ነው, ነገር ግን የአሰራር ዘዴው ተመሳሳይ ነው. ነገር ግን ከHPLC በተቃራኒ ይህ ዘዴ እንደ 2 ማይክሮሜትሮች ያሉ ጥቃቅን ቅንጣቶችን ለመተንተን ያስችላል።
ሥዕል 02፡ የUPLC መሣሪያ
ከተጨማሪም ፈጣን ትንታኔ ይሰጣል። በዚህ ዘዴ, ናሙናውን ወደ አምድ ውስጥ ለማስገባት 100 MPa የፓምፕ ግፊት እንጠቀማለን. ስለዚህ, ይህ ከፍተኛ ግፊት ሙሉውን ናሙና በአምዱ ውስጥ እንደገባ ያረጋግጣል. ስለዚህም ይህ ከ HPLC ጋር ሲወዳደር በጣም ቀልጣፋ ነው።
በHPLC እና UPLC መካከል ያለው ልዩነት ምንድን ነው?
HPLC የሚለው ቃል ከፍተኛ አፈጻጸም ያለው ፈሳሽ Chromatography ሲሆን UPLC የሚለው ቃል ደግሞ እጅግ ከፍተኛ አፈጻጸም ፈሳሽ ክሮማቶግራፊን ያመለክታል። ስለዚህ, የ UPLC ቴክኒክ የ HPLC የተሰራ ስሪት ነው. ስለዚህ ለሁለቱም ቴክኒኮች የአሠራር ዘዴ ተመሳሳይ ነው. ይሁን እንጂ UPLC ከ HPLC ጋር ሲነፃፀር የበለጠ ውጤታማ ነው, ምክንያቱም ከፍተኛ የፓምፕ ግፊት ስለሚጠቀም; ለ HPLC የፓምፕ ግፊት 40 MPA ሲሆን ለ UPLC 100 MPa ነው. ስለዚህ, ይህ በ HPLC እና UPLC መካከል ያለው ልዩነት ነው.ከሁሉም በላይ በHPLC እና በUPLC መካከል ያለው ቁልፍ ልዩነት ኤች.ፒ.ሲ.ሲ መጠናቸው 5 ማይክሮሜትሮች አካባቢ ያላቸውን ቅንጣቶች ለመተንተን የሚፈቅድ ሲሆን UPLC ደግሞ በ2 ማይክሮሜትሮች አካባቢ በጣም ትናንሽ ቅንጣቶችን ይፈቅዳል።
ማጠቃለያ - HPLC vs UPLC
UPLC የHPLC አይነት ነው። ስለዚህ የአሠራር ዘዴዎች ተመሳሳይ ናቸው. ነገር ግን፣ ከ HPLC ጋር ሲነጻጸር አንዳንድ የተሻሻሉ ባህሪያትን በUPLC ውስጥ ማግኘት እንችላለን። ስለዚህ, በ HPLC እና UPLC መካከል የተወሰነ ልዩነት አለ. ነገር ግን በHPLC እና በUPLC መካከል ያለው ቁልፍ ልዩነት ኤችፒኤልሲ መጠናቸው 5 ማይክሮሜትሮች አካባቢ ያላቸውን ቅንጣቶች ለመተንተን የሚፈቅድ ሲሆን UPLC ደግሞ በ2 ማይክሮሜትሮች አካባቢ በጣም ትናንሽ ቅንጣቶችን ይፈቅዳል።
