በPour plate እና Spread plate መካከል ያለው ቁልፍ ልዩነት የናሙና መጠኑ የታወቀ መጠን በአጋር ሚድያ በተንጣለለ ሳህን ላይ መሰራጨቱ ሲሆን በፈሰሰ ሳህን ውስጥ የታወቀ የናሙና መጠን ከ ጋር ይደባለቃል። agar ከዚያም ወደ ሳህን ውስጥ ፈሰሰ. የእነዚህን ሁለት ቴክኒኮች ትክክለኛነት ሲያወዳድር፣ አፍስሱ ሳህን ከተሰራጨው ሳህን የበለጠ ትክክለኛነት አለው።
መደበኛ የሰሌዳ ቆጠራ ዘዴ በናሙና ውስጥ የሚኖሩ (የሚበቅሉ/የሚለሙ/አዋጭ) ረቂቅ ተሕዋስያንን ቁጥር የሚቆጥር እድገትን መሰረት ያደረገ አካሄድ ነው። ህይወት ያላቸው ረቂቅ ተሕዋስያንን ቁጥር ለመተንተን በብዙ የማይክሮባዮሎጂ መስኮች ውስጥ ጥቅም ላይ የዋለ ኃይለኛ ዘዴ ነው.እንደ ምግብ እና የወተት ተዋጽኦ፣ የህክምና፣ የአካባቢ፣ የውሃ እና የግብርና፣ የማይክሮባዮል ጀነቲክስ፣ ሞለኪውላር ማይክሮባዮሎጂ፣ የእድገት ሚዲያ ልማት እና ባዮቴክኖሎጂ (ባዮሬክተር ቴክኖሎጂ፣ መፍላት፣ ቆሻሻ/የቆሻሻ ውሃ አያያዝ ወዘተ) ያሉ መስኮች ይህንን ዘዴ ይጠቀማሉ። በተጨማሪም፣ መደበኛ የሰሌዳ ቆጠራን ለማከናወን ሁለት ዋና መንገዶች አሉ፡ እነሱም፣ Spread plate technique እና Pour plate technique። ናቸው።
Pour Plate ምንድን ነው?
Pour plate ቴክኒክ በናሙና ውስጥ የሚገኙ አንዳንድ አዋጭ ህዋሶችን ለመቁጠር የማይክሮቢያዊ ዘዴ ነው። የፈሰሰው ሳህን ዘዴ ልዩ የሆነው የናሙና መጠኑ የታወቀ መጠን በመጀመሪያ ከአጋር ጋር ተቀላቅሎ ወደ ሳህኑ ውስጥ እንዲፈስ ማድረግ ነው።
ስእል 01፡ ፕሌትስ
ሌሎች እርምጃዎች በሚቀጥለው ክፍል ላይ ከተብራራው የስርጭት ቴክኒክ ጋር ተመሳሳይ ናቸው።ከናሙናው ጋር የተቀላቀለው agar ካፈሰሰ በኋላ የሚቀጥለው እርምጃ እንዲጠናከር እና እንዲዳብር ማድረግ ነው. ከክትባቱ በኋላ የመጨረሻውን CFU ለ 1 g ወይም 1 ml ለማስላት የአዋጭ ቅኝ ግዛቶችን ቁጥር መቁጠር አስፈላጊ ነው።
የተዘረጋ ሳህን ምንድን ነው?
የስርጭት ሳህን በናሙና ውስጥ አዋጭ የሆኑ ህዋሶችን የመቁጠር ዘዴ ነው። ለዚህ ዘዴ ቢያንስ አንድ ሊቆጠሩ የሚችሉ የቅኝ ግዛቶች ቁጥር እንዲፈጠር ለማድረግ ለናሙናው ተከታታይ ማቅለጫ አስፈላጊ ነው. እዚህ ያለው ሂደት የአልኮሆል ነበልባል እና ቀዝቀዝ ያለ የመስታወት ማሰራጫ በሆነው የአጋር ንጣፍ ላይ የተወሰነውን የመሟሟት መጠን በፓይፕ በማድረግ በፍጥነት እና በእኩል መጠን በአጋር ወለል ላይ በመስታወት ማሰራጨት ነው። ድግግሞሾቹን ማከናወን አስተማማኝ አማካይ ዋጋ ለማግኘት አስፈላጊ ነው. ቀጣዩ እርምጃ እነዚህን ሳህኖች ለአጭር ጊዜ ማድረቅ እና ከዚያም ተገልብጦ በማቀፊያ ውስጥ ማስቀመጥ ተስማሚ በሆነ የሙቀት መጠን ለእድገት እና ለተወሰነ ጊዜ የመታቀፊያ ጊዜ ነው።
ምስል 02፡ የተዘረጋ ሳህን
ከክትባት በኋላ ሳህኖቹን መመርመር እድገቱን ያሳያል። በአንድ ወይም ከዚያ በላይ ማቅለሚያዎች, በክትባት ውስጥ የሚገኙት የሴሎች ቁጥሮች (ለምሳሌ, 100 ወይም 200μl) በአጋር ወለል ላይ ከ 30 እስከ 300 የማይነጣጠሉ ቅኝ ግዛቶች ይሰጣሉ. ከ 30 ያነሱ የቅኝ ግዛቶች ቆጠራዎች በስታቲስቲክስ አስተማማኝ አይደሉም። ከ300 በላይ የሆኑ ቆጠራዎች ለመቁጠር አስቸጋሪ እና ለስህተት የተጋለጡ ናቸው።
በPour Plate እና Spread Plate መካከል ያለው ተመሳሳይነት ምንድን ነው?
- Spread plate and drop plate በናሙና ውስጥ የሚገኙ አዋጭ ህዋሶችን ለማግኘት ሁለት ቴክኒኮች ናቸው።
- ሁለቱም ቀጥተኛ የማስተላለፊያ ዘዴዎች ናቸው።
- የናሙና ስህተቶች በሁለቱም ዘዴዎች ሊከሰቱ ይችላሉ።
- የእድገት ሁኔታዎች ገደቦች የሁለቱም ዘዴዎች ውጤት ላይ ተጽዕኖ ያሳድራሉ።
- የቴክኒካል ስህተቶች እንዲሁ የሁለቱንም ዘዴዎች የመጨረሻ ውጤት ሊያስተጓጉሉ ይችላሉ።
- አዋጭ ቢሆንም ሁለቱ ዘዴዎች ባሕላዊ ያልሆኑ ባክቴሪያዎችን ለማምረት ጥቅም ላይ አይውሉም።
በፕሌት ሳህን እና በተንጣለለ ሳህን መካከል ያለው ልዩነት ምንድነው?
Pour plate በናሙና ውስጥ በርካታ አዋጭ ህዋሶችን ለመቁጠር የማይክሮቢያዊ ዘዴ ነው። በመገናኛ ብዙሃን ላይ የሚበቅሉትን ተህዋሲያን ለመቁጠር ሌላው ዘዴ የተዘረጋ ሳህን ቴክኒክ ነው። በማፍሰስ ፕላስቲን ቴክኒክ ውስጥ, ሂደቱ ናሙናውን በማፍሰስ ሳህኑ ላይ ባለው ጠንካራ መካከለኛ ገጽ ላይ መጨመር ነው. ነገር ግን በስፕሬድ ፕላስቲን ቴክኒክ ሂደቱ ናሙናውን ከተቀለጠ አጋር ጋር በማዋሃድ ወደ ሳህኑ ውስጥ ማፍሰስ ነው።
የእነዚህን ሁለት ቴክኒኮች ትክክለኛነት በተመለከተ የፈሰሰ ሳህን ከተሰራጨው ሳህን የበለጠ ትክክለኛነት አለው። ከዚህም በላይ ከተፈሰሰው ሳህን በተለየ የመስታወት ማሰራጫ ናሙናውን በተንጣለለ ሳህን ላይ በእኩል መጠን ለማሰራጨት ይጠቅማል። በተጨማሪም ፣ አፍስሱ ሳህን በመጠቀም ፣ ኤሮብስ ፣ አናሮብስ እና ፋኩልታቲቭ አናሮቦችን መዘርዘር ይቻላል። ነገር ግን, የተዘረጋውን ሳህን በመጠቀም ኤሮቢዎችን ብቻ መዘርዘር ይቻላል.በተጨማሪም የተጠናከረ የአጋር ሳህኖች ስርጭትን ለመሥራት አስፈላጊ ሲሆኑ ፈሳሽ ቀልጦ የአጋር ሚዲያ ደግሞ ለማፍሰስ ዘዴ አስፈላጊ ነው።
ማጠቃለያ - Plate vs Spread Plate
Pour plate እና Spread plate በማይክሮባዮሎጂ ሁለት ቴክኒኮች ናቸው ማይክሮቢያል ሴሎችን በናሙና ውስጥ ለመቁጠር የሚያመቻቹ። ሁለቱም ዘዴዎች በእድገት ላይ የተመሰረቱ ናቸው, ስለዚህ አዋጭ የሆኑትን ሴሎች ይለካሉ. በሚፈስስበት ጊዜ የታወቀ የናሙና መጠን ቀልጦ ከተሰራው አጋር ጋር ይደባለቃል እና ወደ ሳህኑ ውስጥ ይፈስሳል። በተንጣለለ ጠፍጣፋ ጊዜ, የታወቀ መጠን በጠንካራው የአጋር ሽፋን ላይ ይሰራጫል. በማፍሰስ ሳህን እና በተዘረጋ ሳህን መካከል ያለው ልዩነት ይህ ነው።
