ቁልፍ ልዩነት - HPLC vs HPTLC
በHPTLC እና በHPTLC መካከል ያለው ቁልፍ ልዩነት HPLC በናሙና ውስጥ ክፍሎችን በቁጥር መለየት ሲፈቅድ HPTLC ደግሞ በናሙና ውስጥ ክፍሎችን በቁጥር መለየትን አይፈቅድም።
Chromatography አካላዊ መለያየት ዘዴ ሲሆን በድብልቅ ውስጥ ያሉትን ክፍሎች ለመለየት እና ለመለየት ጥቅም ላይ ይውላል። ሁለቱም HPLC እና HPTLC ክሮማቶግራፊ ቴክኒኮች ናቸው። HPLC ከፍተኛ አፈጻጸም ያለው ፈሳሽ ክሮማቶግራፊ ነው። HPTLC ከፍተኛ አፈጻጸም ቀጭን ንብርብር ክሮማቶግራፊ ነው።
HPLC ምንድን ነው?
HPLC ከፍተኛ አፈጻጸም ያለው ፈሳሽ ክሮማቶግራፊ ነው። በድብልቅ ውስጥ ክፍሎችን ለመለየት, ለመለየት እና ለመለካት የሚያገለግል የትንታኔ ዘዴ ነው.በዚህ ዘዴ, ናሙናው ተስማሚ በሆነ ፈሳሽ ውስጥ ይሟሟል. ከዚያም ናሙና ያለው ፈሳሽ በተሰጠው ግፊት በፓምፕ ውስጥ ይለፋሉ. ፓምፑ በጠንካራ ተጓዳኝ እቃዎች የተሞላ ነው. ከዚያም አንዳንድ ክፍሎች ከሚመጠው ንጥረ ነገር ጋር በጥብቅ ይያያዛሉ, ሌሎች ክፍሎች ግን በቀላሉ ይያያዛሉ. ይህም ክፍሎቹ በፓምፕ ውስጥ የተለያየ ፍሰት መጠን እንዲኖራቸው ያደርጋል. ስለዚህ ክፍሎቹ በቀላሉ ሊለያዩ ይችላሉ።
ስእል 01፡ የHPLC ስርዓት
ፓምፑን የሚሞላው አድሶርበንት (adsorbent) ቁሳቁስ የማይንቀሳቀስ ደረጃ በመባል ይታወቃል። የተሟሟት ናሙና ያለው ፈሳሽ የሞባይል ደረጃ በመባል ይታወቃል. በዚህ ዘዴ ውስጥ ጥቅም ላይ የሚውለው ፓምፕ አምድ ይባላል. ዓምዱ በሚያስተዋውቁ ነገሮች የተሞላ ነው, በአብዛኛው, የሲሊካ ቅንጣቶች. የእነዚህ ቅንጣቶች መጠን ከ2-50 μm ሊሆን ይችላል. የመለየት ሂደቱ በሞባይል ደረጃ እና በስርአቱ የሙቀት መጠን ስብጥር ላይ ተጽዕኖ ያሳድራል.በቋሚ ደረጃ እና በናሙናው ውስጥ ባለው ክፍል መካከል ያለው መስተጋብር ሃይድሮፎቢክ መስተጋብር፣ ዳይፖል-ዲፖል መስተጋብር፣ ion ቦንድንግ፣ ወዘተ ሊሆን ይችላል።
የ HPLC የስራ ጫና ከባህላዊ ፈሳሽ ክሮማቶግራፊ በእጅጉ የላቀ ነው። ከ 50-350 ባር አካባቢ ይተኛል. በፈሳሽ ክሮማቶግራፊ እና በ HPLC መካከል ያለው ልዩነት በፈሳሽ ክሮማቶግራፊ ውስጥ ናሙናው በስበት ኃይል ውስጥ በአምዱ ውስጥ ይወድቃል ፣ በ HPLC ውስጥ ፣ ናሙናው በአምዱ በኩል ይጫናል ። ከባህላዊው ፈሳሽ ክሮሞግራፊ ጋር ሲወዳደር የዓምዱ መጠን እና የመምጠጥ ቅንጣቶች በጣም ትንሽ ናቸው. ሆኖም፣ በHPLC ቴክኒክ የተሰጠው ጥራት የላቀ ነው።
HPTLC ምንድን ነው?
HPTLC ከፍተኛ አፈጻጸም ቀጭን ንብርብር ክሮማቶግራፊ ነው። እሱ የላቀ እና አውቶማቲክ ባህላዊ TLC ነው። ይህ ዘዴ በአጭር ጊዜ ውስጥ ውጤታማ መፍትሄ ይሰጣል. በዚህ የመተንተን ዘዴ, ናሙና እና ማመሳከሪያው በተመሳሳይ ጊዜ ሊተነተን ይችላል, ይህም ናሙናውን ከማጣቀሻው ጋር ለማነፃፀር ያስችላል.ከሌሎች ክሮማቶግራፊ ቴክኒኮች የተሻሻለ የትንታኔ ትክክለኛነት ይሰጣል። ለመተንተን የሚወስደው ጊዜ ያነሰ ነው. ቴክኒኩ አነስተኛ ዋጋ ያለው ቴክኒክ ነው።
ስእል 02፡HPTLC በመጠቀም የምግብ ማቅለሚያዎች ትንተና
የ HPTLC ዘዴ ቀላል ሂደት ነው, እና የናሙና ዝግጅት ደረጃም እንዲሁ ይጠፋል (በባህላዊ TLC, የናሙና ዝግጅት ደረጃ ከመለያየቱ በፊት ይካተታል. ይህ ደረጃ ማጽዳት እና ማበልጸግ ያካትታል). ምንም እንኳን ሌሎች ክሮማቶግራፊ ቴክኒኮች እንደ ጋዝ ማጽዳት፣ ማጣሪያ እና የመሳሰሉት ቅድመ-ህክምናዎች የሚያስፈልጋቸው ቢሆንም ሟሟ ምንም አይነት ቅድመ-ህክምና ሳይደረግ በቀጥታ ጥቅም ላይ ሊውል ይችላል።
በHPTLC ውስጥ ጥቅም ላይ የሚውለው ማስታወቂያ ቁሳቁስ በጣም አነስተኛ መጠን ያለው ሲሊካ ነው። በባህላዊ TLC፣ የሲሊካ ቅንጣት 5-20 μm ሲሆን በHPTLC ግን 4-8 ማይክሮን ነው። ናሙናው አፕሊኬተርን በመጠቀም በ HPTLC ሳህን ላይ ይተገበራል.አንድ ወጥ እና ደህንነቱ የተጠበቀ መተግበሪያ ይሰጣል። ከዚያም ሳህኖቹ የሞባይል ደረጃ ባለው ክፍል ውስጥ ይቀመጣሉ. ክፍሉ በሞባይል ደረጃ በእንፋሎት የተሞላ መሆን አለበት። ከኤች.ፒ.ቲ.ኤል.ሲ ሂደት በኋላ, የተንቀሳቀሱ ቦታዎች ሊገኙ ይችላሉ. በጠፍጣፋው ላይ ያሉትን ነጠብጣቦች ሲለዩ የHPTLC ቴክኒክ ተስማሚ የዩቪ ክልል ወይም የአዮዲን ክፍል ይጠቀማል።
በHPLC እና HPTLC መካከል ያለው ልዩነት ምንድን ነው?
HPLC vs HPTLC |
|
| HPLC ከፍተኛ አፈጻጸም ያለው ፈሳሽ ክሮማቶግራፊ ነው። | HPTLC ከፍተኛ አፈጻጸም ቀጭን ንብርብር ክሮማቶግራፊ ነው። |
| ቴክኒክ | |
| በHLC ውስጥ፣ ሟሟ ያለው የሞባይል ደረጃ በቋሚ ደረጃ በተሞላ አምድ ውስጥ ያልፋል። | በHPTLC ውስጥ፣ ናሙናው በTLC ሳህን ላይ ታይቷል እና የሞባይል ደረጃን በያዘ ክፍል ውስጥ ይቀመጣል። ከዚያም ናሙናው ከተንቀሳቃሽ ስልክ ደረጃ ጋር ወደ ሳህኑ ወደ ላይ እንዲሸጋገር ይፈቀድለታል። |
| መለኪያ | |
| በHPLC ውስጥ፣ በአምዱ በኩል ባለው የንጥረ ነገሮች ፍሰት መጠን መካከል ያለው ልዩነት በናሙና ውስጥ ያሉትን ክፍሎችን ለመለየት ጥቅም ላይ ይውላል። | በHPTLC ውስጥ፣ በናሙና ውስጥ በእያንዳንዱ አካል በሚጓዙት ርቀቶች መካከል ያለው ልዩነት በናሙና ውስጥ ያሉትን ክፍሎችን ለመለየት ጥቅም ላይ ይውላል። |
| የቁጥር መለያየት | |
| HPLC በናሙና ውስጥ ክፍሎችን በቁጥር መለየት ያስችላል። | HPTLC በናሙና ውስጥ ክፍሎችን በቁጥር መለያየትን አይፈቅድም። |
ማጠቃለያ - HPLC vs HPTLC
HPLC እና HPTLC ሁለት ክሮማቶግራፊ ቴክኒኮች ናቸው። በHPTLC እና በHPTLC መካከል ያለው ቁልፍ ልዩነት ኤች.ፒ.ኤል.ሲ በናሙና ውስጥ ክፍሎችን በቁጥር መለየት ሲፈቅድ HPTLC ግን በናሙና ውስጥ ያሉትን ክፍሎች በመጠን መለየትን አይፈቅድም።
