ቁልፍ ልዩነት – RPMI vs DMEM
አብዛኛዎቹ የምርምር ጥናቶች የእንስሳትን ሕዋስ ማልማትን ያካትታሉ ስለዚህም እነዚህ ጥናቶች በልዩ የእድገት ሁኔታዎች ውስጥ የእንስሳት ሕዋስ መስመሮችን መጠበቅ ያስፈልጋቸዋል. የእንስሳት ሴል ማልማት በፋርማኮሎጂካል ጥናቶች ውስጥ የመድሃኒት ሜታቦሊዝምን, በበሽታ መመርመሪያዎች እና በካንሰር ምርምር ውስጥ በስፋት ይከናወናል. የሕዋስ ባህል ሚዲያ የእንስሳት ሴል ባህል አስፈላጊ ገጽታ ነው። የዱልቤኮ የተሻሻለ ኢግል መካከለኛ (ዲኤምኤም) እና የሮስዌል ፓርክ መታሰቢያ ተቋም መካከለኛ (RPMI) በእንስሳት ሴል ባህል ውስጥ ጥቅም ላይ የሚውሉ ሁለት የባህል ሚዲያዎች ናቸው። RPMI በእገዳ ባህል ውስጥ አጥቢ ህዋሶችን ለማሰልጠን በሰፊው ጥቅም ላይ የሚውል ሚዲያ ነው። DMEM የተሻሻለ የአሚኖ አሲድ እና የቫይታሚን ክምችት እስከ አራት እጥፍ ያለው የ basal media አይነት ነው።DMEM በተጣበቁ ባህሎች ውስጥ ሴሎችን ለማዳበር ጥቅም ላይ ይውላል. በሁለቱ ሚዲያዎች መካከል ያለው ቁልፍ ልዩነት የመገናኛ ብዙሃን የባህል ዓይነት ነው። RPMI በእገዳ ባህሎች ላይ ጥቅም ላይ ይውላል፣ ዲኤምኤም ግን ተጣባቂ ሴሎችን ለማሰልጠን ጥቅም ላይ ይውላል።
RPMI ምንድነው?
RPMI ወይም Roswell Park Memorial Institute Medium RPMI 1640 ተብሎም ይጠራል።የመገናኛ ብዙሃን ስም የተገኘው ሚዲያው በተገኘበት ተቋም ነው። ይህ ሚዲያ በተለምዶ በእንስሳት ሴል ባህል ውስጥ በተለይም ለአጥቢ እንስሳት ህዋሶች እድገት ያገለግላል። በመጀመሪያ የተገነቡት የሰውን ሊምፎይተስ ለማደግ ነው።
የሚከተሉት ንጥረ ነገሮች በRPMI ውስጥ ተካትተዋል።
- ግሉኮስ
- pH አመልካች (phenol red)\
- ጨው (ሶዲየም ክሎራይድ፣ ሶዲየም ባይካርቦኔት፣ ዲሶዲየም ፎስፌት፣ ፖታሲየም ክሎራይድ፣ ማግኒዥየም ሰልፌት እና ካልሲየም ናይትሬት)
- አሚኖ አሲዶች
- ቪታሚኖች (አይ-ኢኖሲቶል፣ ቾሊን ክሎራይድ፣ ፓራ-አሚኖቤንዞይክ አሲድ፣ ፎሊክ አሲድ፣ ኒኮቲናሚድ፣ ፒሪዶክሲን ሃይድሮክሎራይድ፣ ታያሚን ሃይድሮክሎራይድ፣ ካልሲየም ፓንታቶቴት፣ ባዮቲን እና ሪቦፍላቪን፣ ሳይያኖኮባላሚን)
የ RPMI ልዩ ባህሪ በመሃከለኛ ውስጥ ያለው የፎስፌት መጠን መጨመር ነው። RPMI በ 5% የካርቦን ዳይኦክሳይድ ከባቢ አየር ውስጥ ጥቅም ላይ ይውላል. ይህ ለሴሎች እድገት ከፍተኛውን እና ምቹ ሁኔታዎችን ያቀርባል. የሚዲያው ፒኤች በ 8.0 በቢካርቦኔት ማቋቋሚያ ስርዓት ይጠበቃል።
ሥዕል 01፡ የሕዋስ ባህል በፔትሪ ዲሽ ላይ
የ RPMI አፕሊኬሽኖች በህዋስ ባህል ውስጥ
- የሰው ቲ እና ቢ ሊምፎይተስ፣ የአጥንት ቅልጥምንም ህዋሶች እና ጅብሪዶማ።
- የሰው ኒዮፕላስቲክ ሴሎችን ለማጥናት ይጠቅማል።
DMEM ምንድን ነው?
Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DMEM) ለንግድ የተዘጋጀ የተሻሻለ መካከለኛ ነው። የመካከለኛው ዱቄት የመጀመሪያ ገጽታ ቢጫ ነው. በዲኤምኤም ውስጥ የቫይታሚን ትኩረትን እስከ አራት እጥፍ በመጨመር በመሃከለኛ ውስጥ ያለውን የንጥረ ነገር ይዘት ይጨምራል።
DMEM እንደ ferric nitrate፣ sodium pyruvate እና አንዳንድ ያልሆኑ አስፈላጊ አሚኖ አሲዶች እንደ ሴሪን እና ግሊሲን ያሉ ተጨማሪ ጨዎችን በመጨመር ተሻሽሏል። በመገናኛ ብዙሃን ውስጥ ያለው የግሉኮስ አሠራርም ተለውጧል. የመጀመሪያው አጻጻፍ በ 1000 mg / l ግሉኮስ የተዋቀረ ነው, በዲኤምኤም ውስጥ ግን ትኩረቱ እስከ 4500 mg / l ይጨምራል. ዲኤምኤምም የተሟላ መካከለኛ ስላልሆነ የሴረም ሜዲካል ማሟያ ያስፈልገዋል። ብዙውን ጊዜ ዲኤምኤም በ Fetal Bovine Serum (FBS) ይሟላል። FBS ለባህሉ ሂደት የሚያስፈልጉትን ፕሮቲኖች እና የእድገት ሁኔታዎችን ያቀርባል።
የመካከለኛው ፒኤች ሶዲየም ባይካርቦኔት ሲጨመር ይለያያል። ሶዲየም ባይካርቦኔትን ከመጨመራቸው በፊት የመካከለኛው ፒኤች መጠን 6.80 - 7.40 ነው, ነገር ግን ሶዲየም ባይካርቦኔት ከጨመረ በኋላ ፒኤች በ 7.60 - 8.20 ውስጥ ይገኛል. የመካከለኛው ማከማቻ ሙቀት 2 - 8 0C. ነው
ሥዕል 02፡DMEM
የDMEM መተግበሪያዎች
- የፖሊዮማ ቫይረስ በመዳፊት ሽል ሴሎች ውስጥ ያለውን ፕላክ የመፍጠር ችሎታ ለማጥናት።
- በእውቂያ መከልከል ጥናቶች።
- በምርምር እና ትንተና የዶሮ ሕዋስ ባህሎች።
በአርፒኤምአይ እና ዲኤምኤም መካከል ያሉ ተመሳሳይነቶች ምንድን ናቸው?
- ሁለቱም RPMI እና DMEM በእንስሳት ሕዋስ ባህል ውስጥ ጥቅም ላይ ይውላሉ።
- ሁለቱም RPMI እና DMEM ሚዲያ ፈሳሽ ቀመሮች ናቸው።
- ሁለቱም የ RPMI እና DMEM ሚዲያ ለእድገት አስፈላጊ የሆኑትን አስፈላጊ አሚኖ አሲዶች፣ ቫይታሚኖች እና ኦርጋኒክ ያልሆኑ ጨዎችን ይይዛሉ።
- ሁለቱም RPMI እና DMEM ሚዲያ ያልተሟሉ ናቸው። ስለዚህ ሴረም መታከል አለበት።
- ሁለቱም RPMI እና DMEM ሚዲያ ግሉኮስን እንደ ካርቦን ምንጩ ይጠቀማሉ።
- ሁለቱም RPMI እና DMEM ሚዲያ ከፍ ያለ ፒኤች አላቸው።
በአርፒኤምአይ እና ዲኤምኤም መካከል ያለው ልዩነት ምንድን ነው?
RPMI vs DMEM |
|
| RPMI አጥቢ ህዋሶችን በተንጠለጠለበት ባህል ውስጥ ለማሰልጠን በሰፊው ጥቅም ላይ የሚውል ሚዲያ ነው። | DMEM የተሻሻለ የአሚኖ አሲድ እና የቫይታሚን ውህዶች ያለው የተሻሻለ ባሳል መካከለኛ አይነት ነው። |
| የተጨማሪ ፎስፌትስ መኖር | |
| በRPMI ውስጥ ይገኛል። | በዲኤምኤም ውስጥ የለም። |
| ይጠቀሙ ይጠቀሙ | |
|
በተከታታይ ባህሎች ውስጥ ያሉትን ህዋሶች ለማሰልጠን ይጠቅማል። ጥቅም ላይ ይውላል፣
|
| የባህል አይነቶች | |
| RPMI ለማገድ ባህሎች ጥቅም ላይ ይውላል። | DMEM ህዋሶችን ለያዙ ባህሎች ጥቅም ላይ ይውላል። |
ማጠቃለያ - RPMI vs DMEM
ሁለቱም RPMI እና DMEM በእንስሳት ሴል ባህል ውስጥ በተለይም በብልቃጥ ውስጥ ሊምፎይተስን ጨምሮ የእንስሳት ሴል መስመሮችን ለባህል በሰፊው ያገለግላሉ። DMEM የተሻሻለ የንጥረ ነገር ክምችት ያለበት የተሻሻለ መሰረታዊ መካከለኛ ነው። በRoswell Park Memorial Institute የተሰራው አርፒኤምአይ እና በእንስሳት ሴል ባህል ውስጥ በተለይም ለአጥቢ እንስሳት ሊምፎይቶች የሚያገለግል መካከለኛ ነው።ሁለቱም ሚዲያዎች ለንግድ ይገኛሉ። ይህ በ RPMI እና DMEM መካከል ያለው ልዩነት ነው።
