ቁልፍ ልዩነት - Immunofluorescence vs Immunohistochemistry
የሞለኪውላር ባዮሎጂካል ዘዴዎችን የሚጠቀመው የበሽታ መመርመሪያ የክሊኒካል ላብራቶሪ ቴክኖሎጂ ብቅ ያለ ቦታ ሆኗል። ዲ ኤን ኤ ፣ አር ኤን ኤ ወይም በሰውነት ውስጥ የተገለጹ ፕሮቲኖችን በመተንተን በሽታን ለመለየት እና የበሽታውን መንስኤ ለመረዳት ሁሉንም ምርመራዎች እና ዘዴዎች ያጠቃልላል። በሞለኪውላር ምርመራ ፈጣን እድገት ተላላፊ እና ተላላፊ ባልሆኑ በሽታዎች ላይ መሰረታዊ ምርምርን አስችሏል። እነዚህ በበሽታ ውስጥ በተሳተፉ ወሳኝ ጂኖች ወይም ፕሮቲኖች ውስጥ በቅደም ተከተል ወይም በመግለፅ ደረጃዎች ላይ ለውጦችን ለመወሰን ያገለግላሉ። Immunofluorescence (IF) እና Immunohistochemistry (IHC) በካንሰር ባዮሎጂ ውስጥ ሁለቱ በስፋት ጥቅም ላይ የዋሉ ቴክኒኮች ናቸው።IF የፍሎረሰንስ መፈለጊያ ዘዴ ሞኖክሎናል እና ፖሊክሎናል ፀረ እንግዳ አካላትን ለመተንተን የሚያገለግልበት IHC አይነት ሲሆን IHC ግን ሞኖክሎናል እና ፖሊክሎናል ፀረ እንግዳ አካላትን ለመለየት ኬሚካላዊ ዘዴዎችን ይጠቀማል። ይህ በIF እና IHC መካከል ያለው ቁልፍ ልዩነት ነው።
Immunofluorescence (IF) ምንድን ነው?
Immunofluorescence በምርመራው ውስጥ ጥቅም ላይ የዋሉ ፀረ እንግዳ አካላትን ለመለየት ዓላማው የፍሎረሰንት ማቅለሚያዎችን ወይም የፍሎረሰንት ፕሮቲኖችን በመጠቀም መለያ የተደረገበት የመለየት ዘዴ ነው። ምልክት የተደረገባቸው ሁለተኛ ደረጃ ፀረ እንግዳ አካላት የማይፈለጉ የጀርባ ምልክቶችን ሊያስከትሉ ይችላሉ; ስለዚህ የIF ቴክኒክ በተገኘበት ወቅት የማይፈለጉ ምልክቶችን ለማስወገድ በአሁኑ ጊዜ ዋናውን ፀረ እንግዳ አካላትን በመለጠፍ ላይ የተመሰረተ ነው። በዚህ ዘዴ, በአንደኛ ደረጃ እና በሁለተኛ ደረጃ ፀረ እንግዳ አካላት መካከል ልዩ ያልሆነ ትስስር ይከላከላል, እና ምንም አይነት ሁለተኛ ደረጃ የመታቀፉ ሂደት ስለሌለ በጣም ፈጣን ነው. የውሂብ ጥራትም ተሻሽሏል።
ሥዕል 01፡ ድርብ የimmunofluorescence ቀለም ለBrdU፣ NeuN እና GFAP
Fluorochromes ወይም ፍሎረሰንት ማቅለሚያዎች ጨረሮችን ሊወስዱ የሚችሉ ውህዶች ናቸው፣ በተለይም አልትራ ቫዮሌት ጨረሮችን የሚያስደስት ነው። ቅንጣቶቹ ከተደሰቱበት ሁኔታ ወደ መሬት ሁኔታ ሲደርሱ፣ ጨረሮች ያመነጫሉ ይህም በፈላጊ ተይዞ የተገኘ ስፔክትረም ይሆናል። የፍሎረሰንት መለያው ለተለየ ምላሽ ተስማሚ እና የተረጋጋ መሆኑ ትልቅ ጠቀሜታ አለው እና ትክክለኛ ውጤቶችን ለማግኘት ከፀረ እንግዳ አካላት ጋር በትክክል መያያዝ አለበት። በብዛት ጥቅም ላይ ከሚውሉት fluorochromes አንዱ fluorescein isothiocyanate (FITC) ሲሆን አረንጓዴ ቀለም ያለው፣ የመምጠጥ እና የልቀት ከፍተኛ የሞገድ ርዝመት 490 nm እና 520 nm በቅደም ተከተል። በIF ውስጥ ጥቅም ላይ የሚውለው ሌላ ወኪል Rhodamine ፣ ቀይ ቀለም ያለው እና የተለየ የመሳብ እና የልቀት ከፍተኛ የሞገድ ርዝመት 553 nm እና 627 nm ነው።
Immunohistochemistry (IHC) ምንድን ነው?
IHC በዒላማው ሕዋስ ውስጥ ያለውን አንቲጂንን ለመለየት እና መኖሩን ለማረጋገጥ የሚተገበር የሞለኪውላር መፈተሻ ዘዴ ነው። የታለመው ሕዋስ ተላላፊ ቅንጣት፣ ማይክሮቢያል በሽታ አምጪ ተህዋሲያን ወይም አደገኛ ዕጢ ሴል ሊሆን ይችላል። IHC ሞኖክሎናል እና ፖሊክሎናል ፀረ እንግዳ አካላትን በመጠቀም በዒላማው ሴሎች ሴል ላይ የሚገኙትን አንቲጂኖች መኖራቸውን ለማወቅ ያስችላል። ቴክኒኩ የተመሰረተው አንቲጂን-አንቲቦይድ ትስስር ላይ ነው. የአንድ የተወሰነ አንቲጂን መኖር ወይም አለመኖሩን ለመለየት የምርመራ ምልክት ከእነዚህ ፀረ እንግዳ አካላት ጋር ይጣመራል። እነዚህ ጠቋሚዎች እንደ ኢንዛይሞች፣ የፍሎረሰንት ምልክት የተደረገባቸው ፀረ እንግዳ አካላት ወይም የሬዲዮ ምልክት የተደረገባቸው ፀረ እንግዳ አካላት ያሉ ኬሚካላዊ ምልክቶች ሊሆኑ ይችላሉ።
ሥዕል 02፡ የመዳፊት-አንጎል ቁራጭ በImmunohistochemistry
በጣም የታወቀው የIHC አፕሊኬሽን በካንሰር ሴል ባዮሎጂ አደገኛ ዕጢዎች መኖራቸውን ለመለየት ነው፡ነገር ግን ተላላፊ በሽታዎችን ለመለየትም ያገለግላል።
በImmunofluorescence እና Immunohistochemistry መካከል ያለው ተመሳሳይነት ምንድን ነው?
- Immunofluorescence እና Immunohistochemistry በብልቃጥ ሁኔታዎች ውስጥ ይከናወናሉ።
- ሁለቱም ቴክኒኮች በአንቲጂን-አንቲቦል ላይ የተመሰረቱ ናቸው።
- ሁለቱም በጣም ፈጣን ቴክኒኮች ናቸው።
- የቴክኒኮቹ ውጤቶች ሊባዙ የሚችሉ ናቸው።
- ሁለቱም የተሻሻለ የውሂብ ጥራት አላቸው።
- እነዚህ ቴክኒኮች ለካንሰር እና ለተላላፊ በሽታዎች ምርመራ ጥቅም ላይ ይውላሉ።
በImmunofluorescence እና Immunohistochemistry መካከል ያለው ልዩነት ምንድን ነው?
Immunofluorescence vs Immunohistochemistry |
|
| IF በምርመራው ውስጥ ጥቅም ላይ የዋሉ ፀረ እንግዳ አካላት ለመለየት የፍሎረሰንት ማቅለሚያዎችን ወይም የፍሎረሰንት ፕሮቲኖችን በመጠቀም መለያ የተደረገበት የመለየት ዘዴ ነው። | IHC በምርመራው ውስጥ ጥቅም ላይ የሚውሉት ፀረ እንግዳ አካላት ለመለየት ኬሚካል ወይም ራዲዮአክቲቭ ኤለመንቶችን በመጠቀም ምልክት የተደረገበት የመለየት ዘዴ ነው። |
| ትክክለኛነት | |
| ትክክለኛነቱ በIF ቴክኒክ ከIHC ጋር ሲወዳደር ከፍ ያለ ነው። | ትክክለኝነት በIHC ዝቅተኛ ነው። |
| ልዩነት | |
| ከሆነ የበለጠ የተለየ ነው። | IHC ብዙም የተለየ ነው። |
ማጠቃለያ - Immunofluorescence vs Immunohistochemistry
ሞለኪውላር ስልቶች በህክምናው ዘርፍ ብዙ ለውጦችን አምጥተዋል፣ ይህም የላቀ የሞለኪውላር መፈተሻ ዘዴዎችን በመፍጠር በምርመራው ዘርፍ አብዮቶችን አምጥቷል።እነዚህ ፈጠራዎች በሽታውን በፍጥነት እና በትክክል በመለየት እና በማረጋገጥ የመድሃኒት አስተዳደር እና ምርትን በተሳካ ሁኔታ ለማካሄድ አስችለዋል. እነዚህ ቴክኒኮች የመድኃኒቶችን ዒላማዎች ለማግኘት እና በመድኃኒት ሜታቦሊዝም ወቅት የመድኃኒቱን የመድኃኒትነት ባህሪያት ለማረጋገጥ በፋርማኮሎጂ ውስጥም ያገለግላሉ። IF እና IHC በአንቲጂን እና ፀረ እንግዳ አካላት ትስስር ጽንሰ-ሀሳብ ላይ የተመሰረቱ ሁለት የምርመራ ዘዴዎች ናቸው, ምንም እንኳን በሁለቱም ቴክኒኮች ውስጥ የመለየት ዘዴ ቢለያይም. IF አንቲጂንን ለመለየት የፍሎረሰንስ መርህን ይጠቀማል እና IHC አንቲጂንን ለመለየት የኬሚካል ውህደት ጽንሰ-ሀሳብን ይጠቀማል። ይህ በIF እና IHC መካከል ያለው ልዩነት ነው።
የImmunofluorescence vs Immunohistochemistry የፒዲኤፍ ስሪት አውርድ
የዚህን ጽሁፍ ፒዲኤፍ ስሪት አውርደው እንደ ጥቅስ ማስታወሻ ከመስመር ውጭ ዓላማ መጠቀም ይችላሉ። እባኮትን የፒዲኤፍ ስሪት እዚህ ያውርዱ በImmunofluorescence እና Immunohistochemistry መካከል ያለው ልዩነት።
