ቁልፍ ልዩነት – CFU vs MPN
የቅኝ ግዛት ዩኒት (ሲኤፍዩ) እና እጅግ በጣም ሊሆን የሚችል ቁጥር (MPN) በናሙና ውስጥ ረቂቅ ተሕዋስያንን ለመቁጠር የሚያገለግሉ ሁለት ዘዴዎች ናቸው። ሁለቱም መለኪያዎች በውሃ ናሙናዎች ውስጥ የውሃ ጥራት እና የሰገራ ጠቋሚ ባክቴሪያዎችን ለመለየት ያገለግላሉ። የቅኝ ግዛት ዩኒት በአንድ የተወሰነ ናሙና መጠን ወይም ክብደት አዋጭ የሆኑ የባክቴሪያ ህዋሶችን ወይም የፈንገስ ህዋሶችን ቁጥር ለመቁጠር የሚያገለግል መለኪያ ነው። የዚህ ግቤት መደበኛ አሃድ CFU/ml ወይም CFU/g ነው። በጣም ሊሆን የሚችል ቁጥር በፈሳሽ ናሙና ውስጥ ያሉትን አዋጭ የባክቴሪያ ህዋሶች ብዛት ለመለካት የሚያገለግል ሌላ አሃድ ነው። በ CFU እና MPN መካከል ያለው ቁልፍ ልዩነት CFU የሚሰላው በጠንካራ የአጋር ሳህን ላይ ከሚበቅሉት የባክቴሪያ እና የፈንገስ ቅኝ ግዛቶች ሲሆን MPN ደግሞ በፈሳሽ መካከለኛ ውስጥ ከሚበቅሉ አዋጭ ባክቴሪያዎች ይሰላል።
CFU ምንድን ነው?
የቅኝ ግዛት ዩኒት (CFU) በአንድ ናሙና ውስጥ የሚገኙ አዋጭ የሆኑ የባክቴሪያ ወይም የፈንገስ ህዋሶችን ቁጥር የሚለካ መለኪያ ነው። የቅኝ ግዛት ክፍሎችን የሚቆጥርበት ዘዴ እንደ መደበኛ የሰሌዳ ቆጠራ ይባላል። በአጋር ሳህኖች ላይ የሚታዩት አዋጭ ቅኝ ግዛቶች በ 1 ሚሊር (የቅኝ ግዛት ዩኒት በ ሚሊ ሊትር) የፈሳሽ ናሙና ወይም CFU በ 1 g (ቅኝ ግዛት በአንድ ግራም) ናሙና ይገለጻሉ።
በናሙና ውስጥ CFU ለመለካት ሁለት የተለመዱ ዘዴዎች አሉ። እነሱ የተዘረጋው የሰሌዳ ዘዴ እና የወጭቱን ዘዴ አፈሳለሁ ናቸው. እነዚህ ሁለት ዘዴዎች ተከታታይ ዳይሉሽን በተባለው ዘዴ ይደገፋሉ. በተከታታይ የተቀበሩ ናሙናዎች በአጋር ወለል ላይ ሊቆጠሩ የሚችሉ ቅኝ ግዛቶችን ለማግኘት ያስችላሉ። የታወቀ የናሙና መጠን በአጋር ሳህን ላይ ሊሰራጭ ወይም ከአጋር ጋር ተደባልቆ ወደ ሳህን ላይ ሊፈስ ይችላል። ከዚያም ጠፍጣፋው ተተክሏል እና የሚነሱ ቅኝ ግዛቶች ይቆጠራሉ. የቅኝ ግዛቶች ብዛት ከመጀመሪያው ናሙና ውስጥ ካሉ ረቂቅ ተሕዋስያን ብዛት ጋር ይዛመዳል።በጣም ብዙ ቅኝ ግዛቶችን ወይም በጣም ጥቂት ቅኝ ግዛቶችን የሚያሳዩት ሳህኖች ከመቁጠር የተገለሉ ናቸው ምክንያቱም ውጤቶቹ በእነዚያ ሰሌዳዎች ላይ በስታቲስቲክስ ትክክለኛ ላይሆኑ ይችላሉ። በስታቲስቲክስ መሰረት, በጣም ጥሩው ክልል በአጋር ሳህን ላይ 30 - 300 ቅኝ ግዛቶች ነው. ስለዚህ ለትክክለኛው ስሌት ትክክለኛዎቹ ሳህኖች መመረጥ አለባቸው. ተከታታይ ማሟያ የሚከናወነው ከላይ ላለው ተግባር ነው።
በአንድ ጊዜ የሚጠቅሙ ቅኝ ግዛቶችን በሰሌዳዎች ላይ ከቆጠሩ፣CFU/ml በሚከተለው ቀመር ሊሰላ ይችላል።
CFU በአንድ ሚሊር ኦሪጅናል ናሙና=የቅኝ ግዛቶች ብዛት በሰሌዳ X dilution factor
Dilution factor=(1/ የጠፍጣፋው መሟሟት)
ለምሳሌ በ10-4 ዳይሉሽን ላይ 149 ቅኝ ግዛቶችን ብታገኙ ከዋናው ናሙና በ1 ሚሊር ውስጥ ያለው የባክቴሪያ ብዛት እንደሚከተለው ሊሰላ ይችላል።:
CFU/ml=(149) x (1/10-4)
=149 × 104 ወይም 1490000
=1. 49 x 106
ምስል 01፡ የቅኝ ግዛት ዩኒት
MPN ምንድን ነው?
በጣም የሚቻለው ቁጥር ለCFU/ml አማራጭ መለኪያ ነው። MPN በፈሳሽ ናሙና ውስጥ ያሉትን አዋጭ ሴሎችም ይገምታል። በፈሳሽ ባህል ውስጥ የሚበቅሉ ፍጥረታትን ይቆጥራል እና በዋነኝነት የባክቴሪያሎጂ ዘዴ ነው። ይህ ዘዴ በተለይ ዝቅተኛ የባክቴሪያ ሴሎችን ለያዙ ናሙናዎች ጠቃሚ ነው; ለምሳሌ ወተት, የመጠጥ ውሃ ወዘተ MPN ዋጋ ለ 100 ሚሊ ሊትር መጠን ይገለጻል. MPN በፕሮባቢሊቲ ቲዎሪ ላይ በተመሰረተ ስታቲስቲካዊ ዘዴ ላይ ይመሰረታል። በ 100 ሚሊር ናሙና የ MPN ዋጋዎችን ለማግኘት የተነደፉ የስታቲስቲክስ ሰንጠረዦች አሉ. እነዚህ ሠንጠረዦች ውጤቶቹን በ95% የመተማመን ገደቦች ያሳያሉ።
MPN እሴት የሚሰላው በርካታ ቲዩብ የመፍላት ዘዴ የሚባል ቴክኒክ ከሰራ በኋላ ነው። ተስማሚ የባህል ሚዲያን የያዙ ሶስት ቱቦዎች በሶስት የተለያዩ ጥራዞች ለምሳሌ 10 ml፣ 1 ml እና 0 ይከተታሉ።1 ml እና ለእድገቱ የተከተፈ. ከክትባቱ ጊዜ በኋላ, ቱቦዎች ለዕድገቱ መኖር ወይም አለመኖር + (አዎንታዊ) ወይም - (አሉታዊ) ይመዘገባሉ. የአዎንታዊ እና አሉታዊ ውጤቶች ንድፍ ከኤምፒኤን የስታቲስቲክስ ፕሮባቢሊቲዎች ሰንጠረዥ ጋር ተነጻጽሯል ረቂቅ ተሕዋስያንን ቁጥር ለመገመት. ከዚያም የ MPN ዋጋ ለ 100 ሚሊ ሊትር ናሙና ይሰጣል. MPN በውሃ ናሙናዎች ውስጥ የሚገኙ ኮሊፎርም ባክቴሪያዎችን ለመለየት በሰፊው ጥቅም ላይ ይውላል።
ምስል 02፡ MPN ሠንጠረዥ
በCFU እና MPN መካከል ያለው ልዩነት ምንድን ነው?
CFU vs MPN |
|
| CFU በተሰጠው ናሙና ውስጥ አዋጭ የሆኑ የባክቴሪያ ወይም የፈንገስ ቅኝ ግዛቶችን ቁጥር ለመግለፅ ጥቅም ላይ የሚውል መለኪያ ነው። | MPN ለ CFU አማራጭ መለኪያ ሲሆን በፈሳሽ ናሙና ውስጥ ያሉትን አዋጭ የባክቴሪያ ህዋሶች ብዛት ይለካል። |
| አሃድ | |
| CFU/ml ወይም CFU/g | MPN/100 ml |
| ስሌት | |
| CFU የሚሰላው በአጋር ሰሌዳዎች ላይ የበቀሉትን ቅኝ ግዛቶች በመቁጠር ነው። | MPN የሚሰላው የቱቦዎቹን አወንታዊ እና አሉታዊ ቅጦች ከMPN ስታቲስቲካዊ ሠንጠረዥ ጋር በማነፃፀር ነው። |
| ተከታታይ ዲሉሽን ቴክኒክ | |
| ተከታታይ ዳይሉሽን ናሙናዎቹን በአጋር ሳህኖች ላይ ከማስቀመጥዎ በፊት ይከናወናል። | ተከታታይ ዳይሉሽን በተለምዶ MPN ሲሰላ አይደለም |
| ዘዴዎች | |
| Spread plate method and pour plate method ሁለት አይነት ዘዴዎች CFU ለማግኘት ይከናወናሉ። | የበርካታ ቱቦ መፍላት የMPN እሴት ለማግኘት የሚፈፀመው ዘዴ ነው። |
ማጠቃለያ - CFU vs MPN
የማይክሮባላዊ እድገትን መለካት በብዙ ምክንያቶች ያስፈልጋል። በምግብ ማቀነባበሪያ ተክሎች ውስጥ በምግብ ውስጥ የሚገኙትን ረቂቅ ተሕዋስያን ደረጃ እና አይነት መለካት ያስፈልጋል. በምግብ ኢንዱስትሪዎች እና በመድሃኒት ውስጥ, የማምከን ህክምናዎች በትክክል መተግበሩን ማረጋገጥ አስፈላጊ ነው. በቆሻሻ ማከሚያ ፋብሪካዎች ውስጥ የማይክሮባላዊ ቆጠራን በመደበኛነት መውሰድ ያስፈልጋል. በሞለኪውላር ባዮሎጂ ውስጥ የአሰራር ሂደቱን ሲያሻሽሉ በጠፍጣፋዎች ላይ ያሉትን የቅኝ ግዛቶች ብዛት መለካት ያስፈልጋል. ስለዚህ, የተለያዩ የመቁጠር እና የእድገት መለኪያ ዘዴዎች ይገኛሉ. CFU እና MPN ሁለቱ እንደዚህ ያሉ ዘዴዎች በተለያዩ መስኮች በስፋት እየተተገበሩ ናቸው። CFU በተሰጠው ናሙና ውስጥ የሚገኙትን የባክቴሪያ እና የፈንገስ ቅኝ ግዛቶች ቁጥር መለኪያ ነው. መደበኛ የሰሌዳ ቆጠራ ዘዴ ወይም አዋጭ የሰሌዳ ቆጠራ ዘዴ በመጠቀም ይሰላል. MPN በፈሳሽ ናሙና መጠን ውስጥ የሚገኙትን የባክቴሪያ ሴሎች ብዛት የሚገልጽ ሌላ መለኪያ ነው።በበርካታ ቱቦዎች የመፍላት ዘዴ እና የ MPN ሠንጠረዥ በመጠቀም ይሰላል. ይህ በCFU እና MPN መካከል ያለው ልዩነት ነው።
የፒዲኤፍ ስሪት አውርድ CFU vs MPN
የዚህን መጣጥፍ የፒዲኤፍ ስሪት አውርደው ከመስመር ውጭ ዓላማዎች እንደ ጥቅስ ማስታወሻዎች መጠቀም ይችላሉ። እባክዎ የፒዲኤፍ እትምን እዚህ ያውርዱ በCFU እና MPN መካከል ያለው ልዩነት።
