የቁልፍ ልዩነት - ቀጥታ እና ቀጥተኛ ያልሆነ ELISA
ከኤንዛይም ጋር የተገናኘ immunoassay (ELISA)፣ እንዲሁም ኢንዛይም ኢሚውኖአሳይ በመባልም የሚታወቀው፣ በደም ውስጥ ያሉ ፀረ እንግዳ አካላትን የሚለይ የሴሮሎጂ ምርመራ ነው። በሽተኛው ለአንድ የተወሰነ የቫይረስ አይነት ወይም ሌላ ተላላፊ ወኪል (አንቲጂን) መጋለጡን እና ሰውነት ኢንፌክሽኑን የሚከላከሉ ፀረ እንግዳ አካላት እንዳመረተ ለማወቅ እንደ የምርመራ መሳሪያ ያገለግላል። ELISA ያለፈውን እና የአሁኑን ኢንፌክሽኖችን መለየት ይችላል። ስለዚህ, ELISA ብዙውን ጊዜ በሽታዎችን በጥልቀት ከመመርመሩ በፊት በዶክተሮች እንደ ቅድመ-ምርመራ ጥቅም ላይ ይውላል. ይህ ምርመራ ከበሽተኛው የደም ናሙና በመውሰድ በቤተ ሙከራ ውስጥ ሊከናወን ይችላል.ሁለት ዓይነት የ ELISA ፈተናዎች አሉ፡ ቀጥታ ELISA እና ቀጥተኛ ያልሆነ ELISA። በቀጥታ እና በተዘዋዋሪ ELISA መካከል ያለው ቁልፍ ልዩነት በተዘዋዋሪ ELISA የበለጠ ስሜታዊነት ያለው እና ሁለተኛ ደረጃ ፀረ እንግዳ አካላት መጨመር ሲፈልግ ቀጥታ ELISA ግን ብዙም ስሜታዊነት የሌለው እና ዋና ፀረ እንግዳ አካላትን ብቻ ይጠቀማል።
ቀጥታ ELISA ምንድን ነው?
ኤሊሳ በደም ውስጥ ያሉ አንቲጂኖች ወይም ፀረ እንግዳ አካላት መኖራቸውን ለመለየት የሚደረግ የበሽታ መመርመሪያ ምርመራ ነው። እንደ ፕላስቲን ምርመራ ይደረጋል. በቀላሉ ከሚገመቱ ኢንዛይሞች ጋር የተገናኙ ፀረ እንግዳ አካላትን ይጠቀማል። በሴረም ናሙና ውስጥ ያለው አንቲጂኖች ከኢንዛይሞች ጋር ከተያያዙ ፀረ እንግዳ አካላት ጋር ይያያዛሉ። በመጨረሻው ደረጃ, ከኤንዛይም ጋር ምላሽ ለመስጠት አንድ የተወሰነ ንጥረ ነገር ተጨምሯል. ኢንዛይሙ ንብረቱን ወደ ቀለም ወይም ምልክት ወደሚያመርት ምርት ይለውጠዋል። በኬሚካላዊው ክፍል ውስጥ ያለው የቀለም ለውጥ በሴረም ናሙና ውስጥ የተወሰነ ፀረ እንግዳ አካላት መኖሩን ያሳያል. ቀጥተኛ የ ELISA ምርመራ ከኤንዛይም ጋር የተገናኘ ዋና ፀረ እንግዳ አካላትን ብቻ ይጠቀማል። ከ አንቲጂን ጋር በማያያዝ, በፍጥነት ቀለሙን ይለውጣል, ይህም በደም ውስጥ ያለው ተላላፊ በሽታ መኖሩን ያሳያል.ነገር ግን ኤፒቶፕስ አንቲጂኖችን በማሰር ብቻ የተገደበ ስለሆነ የምልክቶቹ ጥንካሬ በቀጥታ ELISA ደካማ ነው። ስለዚህ ቀጥታ ELISA ከተዘዋዋሪ ELISA ጋር ሲወዳደር ያነሰ ስሜታዊነት አለው።
ስእል 01፡ ቀጥታ የELISA ሙከራ
ቀጥታ ያልሆነ ELISA ምንድነው?
ELISA ሁለት አይነት ፀረ እንግዳ አካላትን በመጠቀም ሊከናወን ይችላል እነሱም; የመጀመሪያ ደረጃ ፀረ እንግዳ አካላት እና ሁለተኛ ደረጃ ፀረ እንግዳ አካላት. በተዘዋዋሪ የ ELISA መሳሪያ ለተሻለ ማወቂያ ምልክቶችን ለማጉላት ሁለቱንም አይነት ፀረ እንግዳ አካላት ይጠቀማል። ቀጥተኛ ያልሆነ የELISA ቴክኒክ እንደሚከተለው ይከናወናል።
- ሳህኖች በአንቲጂኖች ተፈጥረዋል እና ልዩ ያልሆነ ትስስርን ለመዝጋት ይታጠባሉ።
- ከዚያ ዋና ፀረ እንግዳ አካላት ተጨመሩ እና ይታጠባሉ።
- ከኢንዛይም ጋር የተገናኘ ሁለተኛ ደረጃ ፀረ እንግዳ አካላት ተጨምረዋል እና ይታጠባሉ።
- አንድ substrate ታክሎ ከ ኢንዛይሞች ጋር ምላሽ እንዲሰጥ ተፈቅዶለታል።
- ምልክቶች ተገኝተዋል፣ እና በናሙናው ውስጥ ያለው ልዩ አንቲጂን መኖር ወይም አለመኖሩ ተለይቷል።
በተዘዋዋሪ የELISA ምርመራ፣ በርካታ ሁለተኛ ደረጃ ፀረ እንግዳ አካላት ከአንድ ዋና ፀረ እንግዳ አካላት ጋር ሊተሳሰሩ ይችላሉ። ሁለተኛ ደረጃ ፀረ እንግዳ አካላት በቀላሉ ከሚገመቱ ኢንዛይሞች ጋር የተገናኙ ናቸው። ስለዚህ, አንድ ማሰሪያ ከአንድ በላይ መስተጋብር ምክንያት ጠንካራ ምልክት ሊያደርግ ይችላል. ስለዚህ፣ ቀጥተኛ ያልሆነ ELISA ከቀጥታ ELISA የበለጠ ስሜታዊ ነው። ነገር ግን፣ በተዘዋዋሪ ELISA በሁለተኛ ደረጃ ፀረ እንግዳ አካላት ምላሽ ምክንያት ልዩ ያልሆኑ ምልክቶችን ሊያደርግ ይችላል።
ስእል 02፡ ቀጥተኛ ያልሆነ የELISA ሙከራ
በቀጥታ እና በተዘዋዋሪ ELISA መካከል ያለው ልዩነት ምንድን ነው?
በቀጥታ vs ቀጥተኛ ያልሆነ ELISA |
|
| ቀጥታ ELISA ከተዘዋዋሪ ELISA ጋር ሲወዳደር ያነሰ ስሜታዊነት አለው። | ተዘዋዋሪ ELISA የበለጠ ስሜታዊ ነው። |
| የተወሰደበት | |
| የቀጥታ ELISA ሙከራ ፈጣን ሂደት ነው። | ቀጥታ ያልሆነ ELISA ጊዜ የሚፈጅ ነው። |
| የፀረ እንግዳ አካላት አጠቃቀም | |
| አንድ አይነት ፀረ እንግዳ አካላት (ዋና ፀረ እንግዳ አካላት) ብቻ በቀጥታ ELISA ውስጥ ጥቅም ላይ ይውላሉ። | ዋና እና ሁለተኛ ፀረ እንግዳ አካላት ለተዘዋዋሪ ELISA ጥቅም ላይ ይውላሉ። |
| ከኢንዛይሞች ጋር | |
| ዋና ፀረ እንግዳ አካላት ከኢንዛይሞች ጋር የተገናኙ ናቸው። | ሁለተኛ ፀረ እንግዳ አካላት ከኢንዛይሞች ጋር የተገናኙ ናቸው። |
| የሁለተኛ ፀረ እንግዳ አካላት ተሻጋሪ ምላሽ | |
| ቀጥታ ELISA የሁለተኛ ፀረ እንግዳ አካላትን ተሻጋሪ ምላሽ ያስወግዳል። | በተዘዋዋሪ ELISA በዳግማዊ ፀረ እንግዳ አካላት ተሻጋሪ ምላሽ ተጎድቷል። |
| ምልክቶች | |
| ምልክቶች ከተዘዋዋሪ ELISA ጋር ሲወዳደሩ ደካማ ናቸው። | ምልክቶች በተዘዋዋሪ ELISA ተጨምረዋል። ስለዚህ፣ ለማወቅ ቀላል ነው። |
ማጠቃለያ - ቀጥታ እና ቀጥተኛ ያልሆነ ELISA
ኤሊሳ በታካሚ የደም ናሙና ውስጥ ፀረ እንግዳ አካላት ወይም አንቲጂን እንዳለ ለመለየት በዋናነት በ immunology ውስጥ ጥቅም ላይ የሚውል ባዮኬሚካል ዘዴ ነው። በቀጥታ ወይም በተዘዋዋሪ ELISA በመባል በሚታወቁ ሁለት ሂደቶች ሊከናወን ይችላል. ቀጥተኛ ELISA ምርመራ አንቲጂንን ለመለየት የመጀመሪያ ደረጃ ፀረ እንግዳ አካላትን ብቻ ይጠቀማል በተዘዋዋሪ ELISA ሁለቱንም የመጀመሪያ እና ሁለተኛ ፀረ እንግዳ አካላት ይጠቀማል።በቀጥታ ELISA ውስጥ ዋና ፀረ እንግዳ አካላት ተለጥፈዋል በተዘዋዋሪ ELISA ሁለተኛ ፀረ እንግዳ አካላት ግን ተለጥፈዋል። ይህ በቀጥታ እና በተዘዋዋሪ ELISA መካከል ያለው ልዩነት ነው።
