በpBR322 እና pUC19 መካከል ያለው ልዩነት ምንድነው?

2024 ደራሲ ደራሲ: Alex Aldridge | [email protected]. ለመጨረሻ ጊዜ የተሻሻለው: 2023-12-17 13:31

በ pBR322 እና pUC19 መካከል ያለው ቁልፍ ልዩነት pBR322 ፕላዝማይድ ቬክተር ሲሆን ርዝመቱ 4361 ቤዝ ጥንዶች ሲሆን pUC19 ደግሞ ፕላዝማይድ ቬክተር ሲሆን ርዝመቱ 2686 ቤዝ ጥንድ ጥንድ ነው።

አንድ ክሎኒንግ ቬክተር በሰውነት ውስጥ በተረጋጋ ሁኔታ ሊቆይ የሚችል ትንሽ የዲ ኤን ኤ ቁራጭ ነው። እንዲሁም ለክሎኒንግ ዓላማዎች የውጭ ዲኤንኤ ቁርጥራጭ የሚያስገባ ትንሽ የዲ ኤን ኤ ቁራጭ ነው። አንድ ቬክተር የውጭ የዲኤንኤ ቁርጥራጭን ወደ ቬክተር ውስጥ ለማስገባት ምቹ የሆኑ ጠቃሚ ባህሪያትን ይዟል, ለምሳሌ እንደ ገደብ ቦታዎች, ሊመረጥ የሚችል ምልክት ማድረጊያ, ዘጋቢ ጂን እና የገለፃ አካል. ክሎኒንግ በመጀመሪያ የተከናወነው በ E.ኮላይ. ለኢ.ኮላይ ክሎኒንግ ቬክተሮች ፕላዝማይድ፣ ባክቴሪዮፋጅስ፣ ኮስሚድ እና ባክቴሪያ አርቲፊሻል ክሮሞሶም (ቢኤሲ) ያካትታሉ። በብዛት ጥቅም ላይ የሚውሉት ቬክተሮች በጄኔቲክ ኢንጂነሪንግ ፕላዝማይድ ናቸው. pBR322 እና pUC19 ሁለት አይነት የፕላዝማድ ቬክተሮች ናቸው።

pBR322 ምንድነው?

pBR322 ፕላዝማይድ ቬክተር ነው። ለኤ. ይህ ቬክተር በ1977 በካሊፎርኒያ ሳን ፍራንሲስኮ ዩኒቨርሲቲ በኸርበርት ቦየር ላብራቶሪ ውስጥ ተፈጠረ። ርዝመቱ 4361 ቤዝ ጥንድ የሆነ ክብ ድርብ-ክር ያለው ዲኤንኤ ነው።

ምስል 01፡ pBR322

ይህ ፕላዝማይድ ቬክተር ልዩ ባህሪያት አሉት። በተለምዶ፣ ሁለት የአንቲባዮቲክ ተከላካይ ጂኖች አሉት፡ ጂን bla የአሚሲሊን መከላከያ (Amp^R) ፕሮቲን እና ጂን tetA የ tetracycline መቋቋምን (Tet^R) ፕሮቲን.ከዚህም በላይ የ pMB1 መባዛት መነሻን ይዟል. ይህ የፕላስሚድ ቬክተር የፕላዝሚድ ቅጂ ቁጥርን የሚገድብ የሮፕ ጂን አለው። በተጨማሪም ይህ ቬክተር ከ 40 በላይ ለሆኑ ኢንዛይሞች መገደብ ልዩ ገደቦች አሉት። ከአርባ ገደቡ ውስጥ አስራ አንዱ በTet^R ጂን ውስጥ ይገኛሉ። በTet^R ጂን አራማጅ ውስጥ ለ HindIII እና ClaI ገዳቢ ኢንዛይሞች ሁለት ገደቦች አሉ። በተጨማሪም፣ በAmp^R ጂን ውስጥ ስድስት በጣም አስፈላጊ የእገዳ ጣቢያዎች አሉ። pBR322 ዝቅተኛ ቅጂ ቁጥር ክሎኒንግ ቬክተር ነው። በአንድ የባክቴሪያ ሴል በግምት 20 የፕላዝሚድ ቅጂዎችን ይሰጣል። የቬክተሩ ሞለኪውላዊ ክብደት 2.83×10^{6 ዳልቶኖች።}

pUC19 ምንድን ነው?

pUC19 ፕላዝማይድ ቬክተር ሲሆን ርዝመቱ 2686 ቤዝ ጥንድ ነው። በጆአኪም ሜሲንግ እና በስራ ባልደረቦች ከተፈጠሩት ተከታታይ የፕላስሚድ ቬክተሮች አንዱ ነው. በዚህ የፕላዝሚድ ተከታታይ የመጀመሪያ ስራ በካሊፎርኒያ ዩኒቨርሲቲ ተካሂዷል. ክብ ድርብ ገመድ ያለው ዲኤንኤ ነው።

ምስል 02፡ pUC19

ይህ ፕላዝማይድ ቬክተር ጠቃሚ ባህሪያትንም ይዟል። የ β ግላክቶሲዳሴ (lacz) ጂን N ተርሚናል ቁራጭ አለው። እንዲሁም ባለብዙ ክሎኒንግ ሳይት (ኤምሲኤስ) ክልል አለው። ይህ ክልል ወደ ኮዶን 6 እና 7 የላክዝ ጂን ተከፍሏል። የኤም.ሲ.ኤስ ክልል ብዙ ገደቦችን endonucleases ገደቦችን ያቀርባል። ከ β ግላክቶሲዳሴ ጂን በተጨማሪ pUC19 ለአምፒሲሊን መከላከያ ጂን (Amp^R) ኮድ ይሰጣል። ከዚህም በላይ የማባዛት አመጣጥ ከፕላዝሚድ pMB1 የተገኘ ነው. pUC19 መጠኑ አነስተኛ ቢሆንም፣ ከፍተኛ ቅጂ ቁጥር አለው (በባክቴሪያ ሴል 500-700 ቅጂዎች)። የዚህ ፕላዝማድ ቬክተር ሞለኪውላዊ ክብደት 1.75×10^{6 ዳልቶኖች።}

በpBR322 እና pUC19 መካከል ያሉ ተመሳሳይነቶች ምንድን ናቸው?

• pBR322 እና pUC19 ሁለት አይነት የፕላዝማድ ቬክተር ናቸው።
• የኮላይ ታዋቂ ክሎኒንግ ቬክተሮች ናቸው።
• ሁለቱም የፕላዝማድ ቬክተሮች የፕላዝማድ pMB1 የመባዛት መነሻ ተመሳሳይ ነው።
• እነዚህ ቬክተሮች የበርካታ ገደቦች አሏቸው።
• ሁለቱም ፕላዝማይድ ቬክተሮች የአምፒሲሊን መከላከያ ጂን እንደ ሊመረጥ የሚችል ምልክት አላቸው።

በpBR322 እና pUC19 መካከል ያለው ልዩነት ምንድን ነው?

pBR322 ፕላዝማይድ ቬክተር ሲሆን ርዝመቱ 4361 ቤዝ ጥንዶች ሲሆን pUC19 ደግሞ ፕላዝማይድ ቬክተር ሲሆን ርዝመቱ 2686 ቤዝ ጥንድ ነው። ስለዚህ፣ ይህ በpBR322 እና pUC19 መካከል ያለው ቁልፍ ልዩነት ነው። በተጨማሪም pBR322 ዝቅተኛ ቅጂ ቁጥር ፕላዝማድ ቬክተር ሲሆን pUC19 ደግሞ ከፍተኛ ቅጂ ቁጥር ፕላዝማድ ቬክተር ነው።

ከታች ያለው ኢንፎግራፊክ በpBR322 እና pUC19 መካከል ያለውን ልዩነት በጎን ለጎን ለማነፃፀር በሰንጠረዥ ያቀርባል።

ማጠቃለያ - pBR322 vs pUC19

ለኢ.ኮሊ በብዛት ጥቅም ላይ የሚውሉት ክሎኒንግ ቬክተሮች በዘረመል የተፈጠሩ ፕላዝማይድ ናቸው።pBR322 እና pUC19 ሁለት አይነት የፕላዝማድ ቬክተሮች ናቸው። pBR322 ፕላዝማይድ ቬክተር ሲሆን ርዝመቱ 4361 ቤዝ ጥንዶች ሲሆን pUC19 ደግሞ 2686 ቤዝ ጥንዶች ርዝመት ያለው ፕላዝማይድ ቬክተር ነው። ስለዚህ፣ ይህ በpBR322 እና pUC19 መካከል ያለው ቁልፍ ልዩነት ነው።