በጄል እና በወረቀት ኤሌክትሮፎረሲስ መካከል ያለው ቁልፍ ልዩነት በጄል ኤሌክትሮፊዮራይዝ ውስጥ ያለው የመለያያ መካከለኛ አጋሮዝ ጄል ሲሆን በወረቀት ኤሌክትሮፊዮሬሲስ ውስጥ ያለው የመለያያ መካከለኛ ግን የወረቀት ንጣፍ በመጠባበቂያ መፍትሄ ውስጥ የተጠመቀ ነው።
Electrophoresis በናሙና ውስጥ የሚገኙትን የኬሚካል ዝርያዎች የኤሌክትሪክ ባህሪያት በመጠቀም ናሙናን ለመተንተን የሚጠቅም የትንታኔ ዘዴ ነው። እዚህ ላይ, በተተነተነው መካከለኛ ውስጥ የተበታተነውን የሶሉቱን እንቅስቃሴ መመልከት እንችላለን. ስለዚህ, የኬሚካል ዝርያዎችን ከመካከለኛው አንጻር ያለውን እንቅስቃሴ መወሰን እንችላለን. Gel electrophoresis እና paper electrophoresis በኬሚስትሪ ውስጥ ሁለት ጠቃሚ ቴክኒኮች ናቸው።
Gel Electrophoresis ምንድን ነው?
Gel electrophoresis እንደ መጠኑ እና ክፍያ መጠን የማክሮ ሞለኪውሎችን የመለየት እና የመተንተን ዘዴ ተብሎ ሊገለጽ ይችላል። በዚህ አውድ ውስጥ ያሉት ማክሮ ሞለኪውሎች ዲኤንኤን፣ አር ኤን ኤን፣ ፕሮቲኖችን እና ቁርጥራጮቻቸውን ሊያመለክቱ ይችላሉ። ይህ ዘዴ ፕሮቲኖችን በክፍያ ወይም በመጠን ለመለየት በክሊኒካዊ ኬሚስትሪ ውስጥ ጠቃሚ ነው። በተጨማሪም በባዮኬሚስትሪ እና በሞለኪውላር ባዮሎጂ ውስጥ የዲኤንኤ እና አር ኤን ኤ ስብርባሪዎችን መጠን ለመገመት የዲ ኤን ኤ እና አር ኤን ኤ ስብርባሪዎችን በርዝመታቸው ለመለየት በባዮኬሚስትሪ ውስጥ አስፈላጊ ነው. በተጨማሪም ፕሮቲኖችን በክፍያ ለመለየት ልንጠቀምበት እንችላለን።
ምስል 01፡ Gel Electrophoresis Instrumentation
በአጋሮዝ ወይም ሌሎች ንጥረ ነገሮች ማትሪክስ በመጠቀም አሉታዊ ቻርጅ የተደረገባቸውን ሞለኪውሎች ለማንቀሳቀስ የኤሌክትሪክ መስክ በመተግበር የኑክሊክ አሲድ ሞለኪውሎችን ልንለያይ እንችላለን።በዚህ ሂደት አጫጭር ሞለኪውሎች በፍጥነት ሊንቀሳቀሱ የሚችሉ ሲሆን ረዣዥም ሞለኪውሎች ቀስ ብለው ይንቀሳቀሳሉ። ምክንያቱም አጫጭር ሞለኪውሎች በጄል ቀዳዳዎች ውስጥ በቀላሉ ሊንቀሳቀሱ ስለሚችሉ ነው። በቀዳዳዎች በኩል ያለውን የስብርባሪዎች እንቅስቃሴ “ማጣራት” ብለን እንጠራዋለን። ከዚህም በላይ አብዛኛውን ጊዜ ፕሮቲኖችን እንደ መጠናቸው ከዚህ ዘዴ መለየት አንችልም ምክንያቱም ፕሮቲኖች በጣም ትልቅ ከመሆናቸውም በላይ ከጄል ቀዳዳዎች ውስጥ ለማጣራት አይችሉም. ነገር ግን፣ ይህን ሂደት ናኖፓርተሎችን ለመለየት ልንጠቀምበት እንችላለን።
የወረቀት ኤሌክትሮፎረሲስ ምንድን ነው?
የወረቀት ኤሌክትሮፊዮራይዝስ በጠባቂ መፍትሄ የተጠመቀ የማጣሪያ ወረቀት ጉዞዎችን በመጠቀም መለያየት ተብሎ ሊገለጽ ይችላል። በአጠቃላይ ዲዲቲልባርቢቱሪክ አሲድ እና ባርቢቱሪክ አሲድ በአልካሊ ውስጥ የሚሟሟትን እንደ ቋት መፍትሄ እንጠቀማለን። የዚህ ቋት መፍትሄ pH ዋጋ pH 8.6 ነው. ከዚህም በላይ ትንሽ መጠን ያለው የሴረም ወረቀት በወረቀቱ ላይ ልናስቀምጠው እንችላለን, እና ቀጥተኛ ጅረት ለበርካታ ሰዓታት ውስጥ ይተላለፋል.
የወረቀት ኤሌክትሮፊዮራይዝስ አሚኖ አሲዶችን እና ትናንሽ ፕሮቲኖችን ጨምሮ ትናንሽ ቻርጅ የተደረገባቸው ሞለኪውሎችን ለመለየት ጠቃሚ ነው።እዚህ ላይ የተጣራ ወረቀትን ከጠባቂው ጋር እርጥብ ማድረግ እና የንጣፉን ጫፎች ኤሌክትሮዶችን በያዙ ቋት ማጠራቀሚያዎች ውስጥ ማስገባት አለብን. ይህንን ዘዴ የተጠቀመው የመጀመሪያው ሰው በ1937 ኮኒግ ነው። በግኝቶቹ ላይ ለዞን ኤሌክትሮፊዮሬሲስ በወረቀት የታሸገ ቋት አስተዋወቀ እና የUV ፈልጎ ማግኘትንም ጠቁሟል።
በጄል እና በወረቀት ኤሌክትሮፊዮሬሲስ መካከል ያለው ልዩነት ምንድን ነው?
Electrophoresis በናሙና ውስጥ የሚገኙትን የኬሚካል ዝርያዎች የኤሌክትሪክ ባህሪያት በመጠቀም ናሙናን ለመተንተን የሚጠቅም የትንታኔ ዘዴ ነው። ጄል ኤሌክትሮፊዮሬሲስ እና የወረቀት ኤሌክትሮፊዮራይዝስ ሁለት አስፈላጊ የኤሌክትሮፊዮሬሲስ ዘዴዎች ናቸው. በጄል እና በወረቀት ኤሌክትሮፎረሲስ መካከል ያለው ቁልፍ ልዩነት በጄል ኤሌክትሮፊዮራይዝስ ውስጥ ያለው የመለያያ መካከለኛ አጋሮዝ ጄል ሲሆን ፣ በወረቀት ኤሌክትሮፊዮራይዝ ውስጥ ያለው የመለያያ መካከለኛ ግን በመጠባበቂያ መፍትሄ ውስጥ የተጠመቀ የወረቀት ንጣፍ ነው።
ከታች ያለው በጎን ለጎን ለማነፃፀር በጄል እና በወረቀት ኤሌክትሮፎረሲስ መካከል ያለው ልዩነት ማጠቃለያ ነው።
ማጠቃለያ - Gel vs Paper Electrophoresis
Gel electrophoresis እንደ መጠናቸው እና ቻርጅ መጠን የማክሮ ሞለኪውሎችን የመለየት እና የመመርመር ዘዴ ሲሆን የወረቀት ኤሌክትሮፊዮሬሲስ ደግሞ በጠባቂ መፍትሄ የተጠመቁ የማጣሪያ ወረቀት ጉዞዎችን በመጠቀም መለያየት ነው። በጄል እና በወረቀት ኤሌክትሮፎረሲስ መካከል ያለው ቁልፍ ልዩነት በጄል ኤሌክትሮፊዮራይዝስ ውስጥ ያለው የመለያያ መካከለኛ አጋሮዝ ጄል ሲሆን ፣ በወረቀት ኤሌክትሮፊዮራይዝ ውስጥ ያለው የመለያያ መካከለኛ ግን በመጠባበቂያ መፍትሄ ውስጥ የተጠመቀ የወረቀት ንጣፍ ነው።
