የቁልፍ ልዩነት - Capillary Electrophoresis vs Gel Electrophoresis
Electrophoresis ባዮሞለኪውሎችን በንጥል ቻርጅ፣በቅንጣት መጠን እና በቅንጦት ቅርፅ ላይ በመመስረት ለመለየት የሚያገለግል ቴክኒክ ነው። ኤሌክትሮ ፎረቲክ ተንቀሳቃሽነት በመባል የሚታወቀው የሞለኪዩል ፍልሰት የሚወሰነው ጥቅም ላይ በሚውለው ፖሊመር/ጄል ዓይነት፣ የቀዳዳው መጠን፣ የቮልቴጅ መጠን፣ የሩጫ ጊዜ እና የገጽታ ወደ የድምጽ ሬሾ ነው። ጥቅም ላይ በሚውለው የባዮሞለኪውል ዓይነት ላይ የተመሰረቱ የተለያዩ የኤሌክትሮፊዮሬሲስ ቴክኒኮች አሉ። የመጀመርያው የኤሌክትሮፊዮሬሲስ ዓይነት የወረቀት ኤሌክትሮፊዮርስስ ሲሆን ናይትሮሴሉሎስ ወረቀት ባዮሞለኪውሎችን ለመለየት እንደ መካከለኛ ጥቅም ላይ ይውላል።ባዮሞለኪውሎችን ለመለየት የተለያዩ ቀዳዳ ያላቸው ጄልዎች ጥቅም ላይ የሚውሉበት የጄል ኤሌክትሮፊዮሬሲስ መርህ ከጊዜ በኋላ ተፈጠረ። የጄል ኤሌክትሮፊዮራይዝስ ቴክኒክ የቴክኒኩን ትክክለኛነት ለማሻሻል የበለጠ ተሻሽሏል, እና እንደዚህ አይነት ማሻሻያ ካፕላሪ ኤሌክትሮፊዮሬሲስ ነው. በካፒላሪ ኤሌክትሮፊዮሬሲስ እና በጄል ኤሌክትሮፊዮራይዝ መካከል ያለው ቁልፍ ልዩነት ጄል ኤሌክትሮፊዮራይዝ የሚከናወነው በቋሚ ወይም አግድም አውሮፕላን ውስጥ መደበኛ የሆነ ቀዳዳ ያለው ፖሊመር ጄል ሲሆን ካፒላሪ ኤሌክትሮፊዮሬሲስ ደግሞ በካፒላሪ ቱቦ ውስጥ በፖሊመር ፈሳሽ ወይም ጄል ውስጥ ይከናወናል።
Gel Electrophoresis ምንድን ነው?
ጄል ኤሌክትሮፊዮራይዝስ በዋናነት ኑክሊክ አሲዶችን፣ ፕሮቲኖችን ወይም አሚኖ አሲዶችን በክብደቱ፣ በመጠን እና በቅርጹ ለመለየት የሚያገለግል ዘዴ ነው። ይህ ዘዴ አካላዊ ጄል ይጠቀማል, እሱም ፖሊመር ንጥረ ነገር ነው, እንደ መለያየት መካከለኛ. በብዛት ጥቅም ላይ የሚውሉት ጂልስ አጋሮሴ (ለኑክሊክ አሲድ መለያየት) እና ፖሊacrylamide (ለፕሮቲን መለያየት) ናቸው። የጄል ኤሌክትሮፊክስ አፓርተማ ጄል ለማዘጋጀት የጄል ማስቀመጫ ትሪ, ጉድጓዶችን ለማዘጋጀት ማበጠሪያዎችን, ቋት ታንክ, ኤሌክትሮዶች - ፖዘቲቭ (አኖድ) እና አሉታዊ (ካቶድ) እና የቮልቴጅ አቅርቦት አሃድ ይዟል.እንደ ዲ ኤን ኤ ወይም አር ኤን ኤ ያሉ ሞለኪውሎች በአሉታዊ መልኩ የሚሞሉ ከካቶድ ወደ አኖድ ይንቀሳቀሳሉ እና አዎንታዊ ኃይል ያላቸው ሞለኪውሎች በተቃራኒው ይንቀሳቀሳሉ። የጄል ዝግጅት እንደ አስፈላጊነቱ ይከናወናል. ከፍተኛ ጥራት ያለው ወይም የሞለኪውሎች መለያየት ካስፈለገ አነስተኛ መጠን ያለው ቀዳዳ ያለው ከፍተኛ ትኩረት ያለው ጄል መዘጋጀት አለበት። በጄል ማትሪክስ ላይ የተነጣጠሉ ሞለኪውሎች ከቆሸሸ ዘዴ በኋላ ይታያሉ. የተለዩት ሞለኪውሎች በጄል ማትሪክስ ላይ እንደ ባንድ ሆነው ይታያሉ።
ሥዕል 01፡ ጄል ኤሌክትሮፎረሲስ
Gel electrophoresis በሞለኪውላዊ ምርመራዎች እንደ ዲኤንኤ የጣት አሻራ ወይም የተለየ የዲኤንኤ/አር ኤን ኤ ቁርጥራጭ ወይም ፕሮቲን መኖሩን ለማወቅ ይጠቅማል። ጄል ኤሌክትሮፊዮሬስ እንዲሁ የሚወጣውን የባዮሞለኪውል ናሙና ንፅህና ይወስናል።ጄል ኤሌክትሮፊዮራይዝስ እንደ የመጀመሪያ ደረጃ ወደ ውስጥ ለመግባት እና ለማዳቀል እና ከተከታታይ በኋላ እንደ ማረጋገጫ ትንተና ይከናወናል።
ካፒላሪ ኤሌክትሮፊዮሬሲስ ምንድን ነው?
Capillary electrophoresis የጄል ኤሌክትሮ ፎረሲስ ማሻሻያ ሲሆን በክፍያ ፣ በሞለኪዩል መጠን ላይ በመመስረት ተመሳሳይ የመለያ መርህን ይጠቀማል ፣ ግን በካፒላሪ ቱቦ ውስጥ የሚከናወነው በጄል ንጥረ ነገር ወይም በፈሳሽ ፖሊመር ነው። ካፊላሪዎች ከተዋሃዱ ሲሊካዎች ይዘጋጃሉ, እና እያንዳንዱ የካፒታል ቱቦ ውስጣዊ ዲያሜትር ከ50-100μm እና ከ25-100 ሴ.ሜ ርዝመት አለው. ናሙናዎች ፖሊመር ንጥረ ነገር በያዘው የካፒታል ቱቦ ውስጥ ይጣላሉ እና ከተለመደው ጄል ኤሌክትሮፊዮራይዝስ በጣም በፍጥነት ይለያያሉ. የካፒታል ስርዓቱ በጥሩ ሁኔታ የተጠበቀ ነው ኢንሱሌተር ጃኬት ይህም ናሙናውን ከማንኛውም ብክለት ይከላከላል. ካፊላሪስ በፈሳሽ ፖሊመሮች እንደ ሃይድሮክሳይታይል ሴሉሎስ ወይም ከፍተኛ ጥራት ባለው ጄል እንደ ፖሊacrylamide ሊሞሉ ይችላሉ. Capillary electrophoresis የበለጠ መፍትሄ ይሰጣል; ስለዚህ መለያየት የበለጠ ትክክለኛ ነው።Capillary electrophoresis በ spectrophotometric ትንተና አማካኝነት አውቶሜትድ አነፍናፊ ስርዓት ይጠቀማል። ይህ የሆነበት ምክንያት ከፍ ባለ የገጽታ ስፋት እና የድምጽ ሬሾ ነው።
ምስል 02፡ Capillary Electrophoresis
Capillary electrophoresis በፎረንሲክስ ውስጥ ከፍተኛ ትክክለኛነት በሚያስፈልግበት እና ብዙ ወጪ የሚጠይቅ ቴክኒክ በመሆኑ ጥቅም ላይ የማይውል ነው።
በካፒላሪ ኤሌክትሮፊዮሬሲስ እና በጌል ኤሌክትሮፊዮሬሲስ መካከል ያለው ተመሳሳይነት ምንድን ነው?
- የሞለኪውሎች መለያየት በሁለቱም ቴክኒኮች በሞለኪዩል ክፍያ እና መጠን ላይ የተመሰረተ ነው።
- ሁለቱም ቴክኒኮች ሁለቱንም ኑክሊክ አሲዶች እና ፕሮቲኖችን ለመለየት ጥቅም ላይ ሊውሉ ይችላሉ።
- የሁለቱም ቴክኒኮች ናሙና መጠን አንድ ነው።
- ሁለቱም ቴክኒኮች መለያየትን ለማመቻቸት ቋት ይጠቀማሉ።
በካፒላሪ ኤሌክትሮፊዮሬሲስ እና በጌል ኤሌክትሮፊዮሬሲስ መካከል ያለው ልዩነት ምንድን ነው?
Capillary Electrophoresis vs Gel Electrophoresis |
|
| Capillary electrophoresis በካፒላሪ ቱቦ ላይ ያለውን ፈሳሽ ወይም ጄል ፖሊመር ሚዲያን በመጠቀም ባዮሞለኪውሎችን የሚለይ ዘዴ ነው። | Gel electrophoresis ባዮሞለኪውሎችን በአቀባዊ ወይም አግድም አይሮፕላን ላይ በፖሊመር ጄል ሚድያ የሚለይ ዘዴ ነው። |
| መለያ | |
| በካፒታል ኤሌክትሮፊዮራይዝስ ውስጥ መለያየት የሚከናወነው በካፒላሪ ቱቦ ውስጥ ነው። | በጄል ኤሌክትሮፊዮርስስ ውስጥ መለያየት የሚከናወነው በአቀባዊ ወይም አግድም አውሮፕላን ነው። |
| የመለያ መካከለኛ | |
| ፈሳሽ ፖሊመሮች እንደ hydroxyethylcellulose በካፒላሪ ኤሌክትሮፊዮርስስ ውስጥ ጥቅም ላይ ይውላሉ። | Gels፣ ወይ አጋሮዝ ወይም ፖሊacrylamide፣ በጄል ኤሌክትሮፎረረስ ውስጥ እንደ መካከለኛ ጥቅም ላይ ይውላሉ። |
| የመስቀል ትስስር | |
| ከፍተኛ ጥራት ከካፒታል ኤሌክትሮፊዮርስስ ሊገኝ ይችላል። | የመፍትሄው ጥራት በጄል ኤሌክትሮፊዮሬሲስ ዝቅተኛ ነው። |
| የገጽታ አካባቢ ወደ ድምጽ ሬሾ | |
| የገጽታ እና የድምጽ ሬሾ በካፒላሪ ኤሌክትሮፊዮርስስ ከፍተኛ ነው። | የገጽታ እና የድምጽ ምጥጥን በጄል ኤሌክትሮፎረሲስ ዝቅተኛ ነው። |
| የመፈለጊያ ቴክኒክ | |
| መመርመሪያው በስፔክትሮፎቶሜትሪክ አውቶሜትድ መመርመሪያዎች በካፒላሪ ኤሌክትሮፊዮሬሲስ ነው። | በUV transilluminator በኩል መቀባት እና መከታተል የሚከናወነው በጄል ኤሌክትሮፊዮሬሲስ ውስጥ የመለየት ቴክኒኮች ናቸው። |
ማጠቃለያ - Capillary Electrophoresis vs Gel Electrophoresis
ሞለኪውላር ዲያግኖስቲክስ በሳይንስ አለም ውስጥ ትልቅ ሚና ይጫወታል። ዲ ኤን ኤ፣ አር ኤን ኤ እና ፕሮቲኖችን መለየት እና ማጽዳት በምርመራው ሂደት ውስጥ ወሳኝ እርምጃዎች ናቸው። ኤሌክትሮፊዮሬሲስ በሁለቱም ጄል ኤሌክትሮፊዮርስስ እና በጣም የላቀ ካፊላሪ ጄል ኤሌክትሮፊዮሬሲስ ውስጥ ያሉትን ባዮሞለኪውሎች የሚለይ እና የሚለይ ቴክኒክ ነው። ጄል ኤሌክትሮፊዮራይዝስ በአቀባዊ ወይም አግድም አውሮፕላን ውስጥ የሚሠራው መደበኛ ቀዳዳ መጠን ያለው ፖሊመር ጄል ሲሆን ካፒላሪ ኤሌክትሮፊዮሬሲስ ደግሞ በካፒላሪ ቱቦ ውስጥ በፖሊመር ፈሳሽ ወይም ጄል ይከናወናል። ይህ በካፒላሪ ኤሌክትሮፊዮሬሲስ እና በጄል ኤሌክትሮፊዮራይዝስ መካከል ያለው ልዩነት ነው. የኤሌክትሮፊዮሬሲስ ቴክኒክ ሲጠናቀቅ ባዮሞለኪውሎች ከፍተኛ ደረጃ መረጃን በማዳቀል ወይም እንደ የጣት አሻራ ባሉ ቴክኒኮችን ለማግኘት የበለጠ ይካሄዳሉ።
የፒዲኤፍ ስሪት አውርድ Capillary Electrophoresis vs Gel Electrophoresis
የዚህን ጽሁፍ ፒዲኤፍ ስሪት አውርደው እንደ ጥቅስ ማስታወሻ ከመስመር ውጭ ዓላማ መጠቀም ይችላሉ። እባኮትን የፒዲኤፍ እትም እዚህ ያውርዱ በጌል ኤሌክትሮፊዮሬሲስ እና በካፒላሪ ኤሌክትሮፊዮሬሲስ መካከል ያለው ልዩነት።
