ቁልፍ ልዩነት - YAC vs BAC ቬክተሮች
ቬክተሮች በሞለኪውላር ክሎኒንግ ውስጥ ጥቅም ላይ ይውላሉ። ቬክተር እንደ ዲኤንኤ ሞለኪውል ሆኖ የውጭ ጀነቲካዊ ቁሶችን ወደ ሌላ ሕዋስ ለመውሰድ እንደ ተሸከርካሪ ሆኖ ሊገለጽ ይችላል። የውጭ ዲኤንኤ የያዘው ቬክተር ዲ ኤን ኤ (recombinant DNA) በመባል ይታወቃል እና በአስተናጋጁ አካል ውስጥ የመድገም እና የመግለጽ ችሎታ ሊኖረው ይገባል። እርሾ አርቲፊሻል ክሮሞሶም (YAC) እና ባክቴሪያ አርቲፊሻል ክሮሞሶም (ቢኤሲ) በክሎኒንግ ውስጥ የሚሳተፉ ሁለት አይነት ቬክተሮች ናቸው። በ YAC እና BAC መካከል ያለው ቁልፍ ልዩነት YAC ልዩ የሆነ የእርሾ ክሮሞሶም ክልልን በመጠቀም በሰው ሰራሽ መንገድ የተገነባ የቬክተር ስርዓት ሲሆን ትላልቅ የጄኔቲክ ቁሶችን ወደ እርሾ ህዋሶች ማስገባት ሲቻል BAC ደግሞ የተወሰነ የኢን ክልልን በመጠቀም በሰው ሰራሽ የተገነባ የቬክተር ስርዓት ነው።ኮሊ ክሮሞሶም ትላልቅ የዲኤንኤ ክፍሎችን ወደ ኢ. ኮሊ ሴሎች ለማስገባት።
YAC ቬክተሮች ምንድን ናቸው?
YAC (እርሾ አርቴፊሻል ክሮሞሶም) በሰው ሰራሽ መንገድ የተገነባ ክሮሞሶም ሲሆን ብዙ የውጭ ዲኤንኤ ተሸክሞ በእርሾ ህዋሶች ውስጥ የመድገም ችሎታ አለው። እሱ ሴንትሮሜር፣ ቴሎሜሬስ እንዲሁም ራሱን ችሎ ለመራባት እና ለማረጋጋት አስፈላጊ የሆኑ ቅደም ተከተሎችን የሚባዛ አለው። YAC ውጤታማ የክሎኒንግ ቬክተር ለማድረግ የተመረጠ ምልክት ማድረጊያ ወይም ማርከሮችን እና ገደቦችን መያዝ አለበት። ከ 1000 ኪ.ባ እስከ 2000 ኪ.ቢ ያለው ትልቅ ቅደም ተከተል በ YAC ውስጥ ሊገባ እና ወደ እርሾ ሊተላለፍ ይችላል. የYAC የለውጥ ቅልጥፍና በጣም ዝቅተኛ ነው።
ምስል 01፡ YAC Vector
BAC ቬክተሮች ምንድን ናቸው?
ባክቴሪያ አርቴፊሻል ክሮሞሶም (ቢኤሲ) በሰው ሰራሽ መንገድ ለሞለኪውላር ክሎኒንግ የተሰራ ክሮሞሶም ነው።እሱ የተወሰኑ የኢ.ኮሊ ኤፍ ፕላዝማድ ክልሎች አሉት እና ክብ እና እጅግ በጣም የተጠቀለለ ነው። BAC የዲኤንኤ ቁርጥራጮችን ወደ ባክቴሪያዎች በተለይም ወደ ኢ. እስከ 300 ኪ.ቢ. መጠን ያላቸውን የዲኤንኤ ቁርጥራጮች ሊሸከም ይችላል። ከ YAC ጋር ሲነጻጸር፣ BAC ክሎኒንግ ማስገቢያዎች በመጠኖች ያነሱ ናቸው። BACs በ 1992 ተዘጋጅተዋል እና አሁንም በመረጋጋት እና በግንባታ ቀላልነት ምክንያት ታዋቂ ነው. BACs ክትባቶችን ለማዳበርም ጠቃሚ ናቸው።
ምስል 02፡ BAC ቬክተር በሞለኪውላር ክሎኒንግ
በYAC እና BAC Vectors መካከል ያለው ልዩነት ምንድን ነው?
YAC vs BAC Vectors |
|
| YAC በዘረመል ምህንድስና የተፈጠረ ክሮሞሶም ሲሆን ለክሎኒንግ ዓላማ የእርሾ ዲኤንኤ ጥቅም ላይ ይውላል። | BAC በዘረመል የተሻሻለ የዲኤንኤ ሞለኪውል E.coli DNA ለክሎኒንግ ዓላማ ይጠቀማል። |
| ጾታ | |
| YACዎች ትላልቅ የጂኖሚክ ዲ ኤን ኤ ቁርጥራጮችን ወደ እርሾ ለመጠቅለል የተነደፉ ናቸው። | ቢኤሲዎች ትላልቅ የጂኖሚክ ቁርጥራጮችን ወደ Escherichia coli ለመጠቅለል ተዘጋጅተዋል። |
| ርዝመት አስገባ | |
| YACዎች የሜጋባሴ መጠን ያላቸውን ጂኖሚክ ማስገቢያዎች ሊይዙ ይችላሉ።(1000 ኪባ – 2000 ኪባ)። | BACዎች ከ200–300 ኪባ ወይም ከዚያ በታች የሆኑ ማስገቢያዎችን መያዝ ይችላሉ። |
| ግንባታ | |
| YAC ዲኤንኤ ሳይነካው ለማጣራት አስቸጋሪ ነው እና YAC vector systemን ለመፍጠር ከፍተኛ ትኩረትን ይፈልጋል። | BAC ሳይበላሽ ለማጽዳት ቀላል እና በቀላሉ ሊገነባ ይችላል። |
| ኪሜሪዝም | |
| YACዎች ብዙ ጊዜ ቺሜሪክ ናቸው። | BACዎች እምብዛም ቺሜሪክ ናቸው። |
| መረጋጋት | |
| YAC ያልተረጋጋ ነው። | BAC የተረጋጋ ነው። |
| ማሻሻያዎች | |
| የእርሾን እንደገና ማጣመር በጣም የሚቻል ነው እና ሁልጊዜ ንቁ ሆኖ ይቆያል። ስለዚህ በ YAC ውስጥ ስረዛዎችን እና ሌሎች ዳግም ዝግጅቶችን ማመንጨት ይችላል። | ኢ። coli recombination ተከልክሏል እና አስፈላጊ ሆኖ ሲገኝ ይበራል። ስለዚህ፣ በ BACs ውስጥ ያሉትን የማይፈለጉ ድጋሚ ዝግጅቶችን ይቀንሳል። |
| ጥገና | |
| የዳግም ተቀናቃኝ YACዎችን ማቀናበር አብዛኛው ጊዜ YAC ወደ ኢ.ኮላይ ለቀጣይ ማጭበርበር እንዲተላለፍ ይፈልጋል። ስለዚህ፣ አድካሚ ሂደት ነው። | BAC ማሻሻያ በቀጥታ በE.coli ውስጥ ይከሰታል። ስለዚህ የዲኤንኤ ሽግግር አያስፈልግም. ስለዚህ ሂደቱ አድካሚ አይደለም። |
ማጠቃለያ - YAC vs BAC Vectors
YAC ትላልቅ የዲ ኤን ኤ ቁርጥራጮችን ወደ አስተናጋጅ አካል በመዝጋት በክሎኒንግ ሂደቶች ውስጥ አስፈላጊ የምርምር መሳሪያ ሆኗል። ሆኖም፣ YACs እንደ የግንባታ ችግሮች፣ ቺሜሪዝም፣ አለመረጋጋት፣ ወዘተ የመሳሰሉ በርካታ ጉዳቶች አሏቸው።ስለዚህም እነዚህን ችግሮች ለመቅረፍ ሳይንቲስቶች የ BAC ቬክተሮችን ፈጥረዋል። BAC የተገነባው የተወሰኑ የኢ.ኮሊ ክሮሞሶም ክልሎችን በመጠቀም ነው። የተረጋጋ ቬክተር ነው እና በቀላሉ ሊገነባ ይችላል. ሆኖም፣ BAC የሚይዘው የዲኤንኤ ርዝመት ከ YAC እስከ 20 እጥፍ ያነሰ ነው። ይህ በ YAC እና BAC የቬክተር ስርዓቶች መካከል ያለው ልዩነት ነው. በአሁኑ ጊዜ፣ BAC በቤተ ሙከራ ውስጥ ከYAC የበለጠ ይመረጣል።
