ትራንስፎርሜሽን vs ሽግግር
Transformation and Transfection ሁለት ቀላል ቴክኒኮች ናቸው የውጭ ጂንን ወደ ሆስት ሴል ለማስተዋወቅ። ነገር ግን እነዚህ ቴክኒኮች በአስተናጋጅ ወይም በቬክተር ሲስተሞች አይነት ይወሰናሉ።
የህዋስ ለውጥ ምንድነው?
ትራንስፎርሜሽን ጂኖችን ወደ እርሾ እና ባክቴሪያ ህዋሶች ለማስተዋወቅ የሚጠቅም ዘዴ ነው። ይህ ዘዴ ብዙውን ጊዜ በጂኖች ውስጥ የሚተላለፉ ለውጦችን ያስከትላል, እናም የጂን አገላለጽ ዘላቂ ነው. የባክቴሪያ ለውጥ ለመጀመሪያ ጊዜ በ 1928 በፍሬድሪክ ግሪፍት ተጀመረ። ከዚያም በ 1970 ዎቹ መጀመሪያ ላይ ይህ ዘዴ በ E.ኮላይ. የኢ.ኮላይ ለውጥ በሚደረግበት ጊዜ ሴሎቹ በበረዶ ቀዝቃዛ መፍትሄ CaCl2 ይህ እርምጃ የኢ.ኮሊ ሴሎችን ብቁ ያደርገዋል። ከዚያ በኋላ, ብቃት ያላቸው ሴሎች ከፕላዝሚድ ዲ ኤን ኤ ጋር ይደባለቃሉ እና ለ 20-30 ደቂቃዎች በበረዶ ላይ ይጣላሉ. ከዚያም የዲ ኤን ኤ ወደ ሴል እንዲተላለፍ ለማስቻል አጭር የሙቀት ድንጋጤ ይሰጣል. በመጨረሻም ህዋሳቱ በንጥረ-ምግብ ሾርባ ውስጥ ይቀመጣሉ እና በ 37 ዲግሪ ሴንቲ ግሬድ ውስጥ ለ 60-90 ደቂቃዎች ፕላስሲዶችን ለመመስረት. እነዚህ እርምጃዎች በተሳካ ሁኔታ ከተጠናቀቁ በኋላ የተቀየሩት ሴሎች ለሴሎች ስርጭት ተስማሚ በሆነ ሚዲያ ላይ ሊቀመጡ ይችላሉ. ትራንስፎርሜሽን እንደ ውጤታማ ያልሆነ ቴክኒክ ስለሚቆጠር ክሎሎን ባንኮችን ለማዘጋጀት ጥቅም ላይ ሊውል አይችልም።
የህዋስ ሽግግር ምንድነው?
የመተላለፍ የውጭ ዘረ-መል (ጅን) በተለምዶ ወደ አጥቢ ህዋሶች የማስተዋወቅ ዘዴ ነው። ሁለት የመተላለፊያ ዘዴዎች አሉ; ማለትም ጊዜያዊ ሽግግር እና የተረጋጋ ሽግግር. በጊዜያዊ ሽግግር, የጂን መግለጫ ለተወሰነ ጊዜ ይገኛል; ስለዚህ የጂን ለውጥ ጊዜያዊ መግለጫን ያስከትላል.ይህ የመተላለፊያ ዘዴ ቀላል እና ፈጣን ነው; ስለዚህ በመደበኛነት ጥቅም ላይ ሊውል ይችላል. የመሸጋገሪያ ጊዜያዊ ሽግግር አንዱ ችግር ለትልቅ የፕሮቲን ውህደት ስርአቶች የማመልከት ችግር ነው።
በተረጋጋ ሽግግር ወቅት፣ የታለመው ዘረ-መል (ጅን) ወደ አስተናጋጁ ሴል ጂኖም ይዋሃዳል፣ እናም የጂን አገላለጽ እንደ ጊዜያዊ ሽግግር ሳይሆን ዘላቂ ነው።
በለውጥ እና ሽግግር መካከል ያለው ልዩነት ምንድን ነው?
• ትራንስፎርሜሽን ጂን ወደ ፕሮካርዮቲክ ሴል (ባክቴሪያ እና እርሾ) ማስተዋወቅ ሲሆን አብዛኛውን ጊዜ መተላለፍ ግን ጂን ወደ አጥቢ ህዋሱ መግባት ይባላል።
• ትራንስፎርሜሽን በጂኖች ውስጥ በዘር የሚተላለፍ ለውጥን ያስከትላል፣ነገር ግን መተላለፍ ጊዜያዊ አገላለጽ ወይም በጂን ላይ ዘላቂ ለውጦችን ያስከትላል።
